현미경 관찰에 의한 미생물의 특징

[Aphrodite]

(1) 현미경 관찰에 의한 미생물의 특징

1) 원생생물은 대부분 단세포 생물이다.
2) 단핵 또는 단세포구조로서 매우 간단하다.
3) 다세포성이라 하더라도 어떤 특정한 기능을 가진 조직으로 분화되지 못한 생물이다.
4) 따라서 자세히 관찰하지 않으면 서로 비슷하게 보일 수 있다.
5) 종에 따라 일정한 크기와 모양, 독특한 구조를 가지고 있다.
6) 특히 전자 현미경에 의한 미세구조와 초 미생물 구조가 상세히 밝혀지고 있다.
7) 세균의 형태학적 관찰은 광학현미경과 전자현미경을 통해 관찰 가능하다.

(2) 현미경의 종류

1) 광학 현미경
A. 크기가 0.5-2mm 인 세균을 관찰할 때 사용되어진다.
B. 현미경의 확대율은 대물렌즈와 대안렌즈의 배율에 따라 정해진다.
a. 확대율
- 대물렌즈 배율 X 대안렌즈 배율
C. 매체는 공기중이다.
D. 렌즈는 광학렌즈(유리)를 사용한다.
E. 해상 능은 0.2mm이다.
F. 배율은 10*-2000*렌즈교환 가변이다.
G. 초점은 기계적으로 맞춰진다.
H. 가시광선을 광원으로 사용한다.
I. 명암은 흡수, 반사이다.
2) 위상차 현미경
A.피검물 각 부분을 통과하는 투과광의 위상차를 명암 차이로 바꾸는 장치를 한 현미경이다.
B. 살아있는 세포의 내부구조를 직접 관찰 할 수 있다.
C. 일반 광학 현미경 집광기를 위상차 집광기로 바꾸어 사용한다.
D. 위상차 효과로 인해 halo나 shading이 생긴다.
E. Halo나 shading는 관찰을 방해하기도 한다.
F. 조그만 한 광 차이가 대조명암을 만든다.
G. 한쪽이 높은 굴절률을 가지므로 쉽게 판정할 수 있다.
H. 위상차의 검출 한계는 l/10λ-l/1000λ 사이이다.
I. 위상차에 대한 감도는 시야전체에 균일하게 나타난다.
J. 초점이 정확하지 않고 콘트라스트가 역전되는 경우도 있다.
3) 간섭 현미경
A. 광파 진로의 간섭작용으로 일어난 광로차를 방향에 따라 형성된 간섭현상을 이용한 현미경이다.
B. 위상물체에 의하여 생긴 광 위차를 검출하는 점에서 위상차와 유사점을 가진다.
C. 물체를 통과하여 위상이 변화한 광과 다른 시야(대조시야)를 통과한 광을 간섭 시킨다.
D. Nomarski형과 differential interference microscope등이 가장 널리 사용되고 있다.
4) 형광 현미경
A. 어떤 물질이 광을 흡수한 결과 여기 되고, 최초의 광보다 장파장의 광을 방사하는 현상을 이용한 현미경이다.
B. 적당한 광과 필터의 조합에 따라 시료에 있는 형광물질, 병원미생물, 항원,항체 등을 검출한다.
C. 조직, 세포 중에서의 분포를 알기 위한 장치로서 사용되어진다.
D. 병원 미생물학 분야에서는 형광색소에 의한 염색이나 형광항체 법 등을 주로 사용한다.
a. 형광색소
- 자외선을 쬐면 그 파장보다 긴 파장인 형광을 나타내는 유기화합물 이다.
- 형광색소와 결합된 물체를 관찰하기 위해 만든 특수장치 이다.
- 주로 형광항체 법을 이용하여 면역조직의 화학적 연구에 이용된다.
5) 전자 현미경
A. 전자장으로 초점을 맞춘 전자선으로 미세한 물체의 형태를 관찰하는 장치이다.
B. 조사계, 부속전원, 진공계의 3요소가 필요로 되어진다.
a. 조사계
-광원에 상당 하는 전자총, 대물렌즈, 투영렌즈, 형광판, 건판시로 구성되어 있다.
C. 관찰과정
a. 전자총이 wenert관으로 가속전압에 의해 진공 중에 전자가 사출된다.
b. 양극의 중심구멍을 통하여 전자가 직진한다.
c. 전자선이 접속렌즈로 시료면에 집속 된다.
d. 시료를 조사한다.
e. 시료를 통과한 전자선은 곧바로 대물렌즈에 의해 확대된다.
f. 투영렌즈 전면 초점면에 상을 맺는다.
- 투영렌즈
ㄱ. 상의 일부를 재차 확대하고 형광판 및 건판에 상을 맺는다.
D. 0.01mm까지 감별할 수 있다.
E. 광원은 전자선이다.
F. 매체는 진공매체 이다.
G. 렌즈는 전자렌즈(자계적 또는 정전기적)이다.
H. 배율90*-800,000*연속가변 이다.
I. 전기적으로 초점을 맞춘다.
J. 명암은 산란흡수,회절, 위상이다.

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