CHO CELL
중국햄스터난소 (조) 세포 아 상피세포 셀 라인 에서 파생된 난소 의 중국햄스터, 자주 생물학적 그리고 의학연구 상업적으로 재조합 치료제의 생산에서 단백질.[1] 그들은 유전학, 독성 검사, 영양, 유전자 발현에 대한 연구에서 특히 재조합 단백질이요 CHO 세포는 재조합 단백질 치료제의 산업적 생산을 위해 가장 많이 사용되는 포유류 숙주이다.[1]
표면에 접착된 CHO 세포, 아래에 보이는 위상 조영법
역사
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중국 햄스터는 1919년부터 연구에 사용되어 왔으며, 이 햄스터는 쥐를 대신하여 타이핑을 할 때 사용되었다 폐렴. 이후 kala-azar 전송을 위한 우수한 벡터로 밝혀졌다 (내장 레슈마니아증), 촉진 레이슈마니아 연구.[2][3]
1948년 중국 햄스터는 미국에서 연구소에서 번식을 위해 처음 사용되었다. 1957년, 테오도르 t. 퍽 보스턴 암 연구 재단에 있는 조지 예르가니안 박사의 실험실에서 암컷 중국산 햄스터를 입수하여 원래 중국산 햄스터 난소(CHO) 세포 라인을 도출하는 데 사용했다. 이후 CHO 세포는 급성장이 빨라져 세포주가 선택됐다 현탁배양 높은 단백질 생산입니다.[2][4]
혈전분해 약물은 알테플라제 (Activase)는 미국의 승인을 받은 식품의약국 1987년, CHO 세포에서 생산된 최초의 상업적으로 이용가능한 재조합 단백질이었습니다.[2][5] CHO 세포는 CHO 세포가 70%를 생산하는 등 재조합 단백질 치료제 생산에 큰 역할을 해왔다 생물학적 그리고 단일클론항체 2016년에요.[6][7]
모든 CHO 셀 라인이 부족합니다. 프롤린 합성.[8] 또한 CHO 셀은 표현하지 않습니다. 표피 성장 인자 수용체 (EGFR) 각종 EGFR 돌연변이 조사에 있어 이들을 이상적으로 만드는 것.[9]
또 중국 햄스터 난소세포도 생산할 수 있다 단백질 복잡한 글리코실화, 인간에서 생산된 것과 유사한 번역후 수정(PTM) 대규모 문화에서 쉽게 재배할 수 있고 생존력이 뛰어나 이상적이다 GMP 단백질 생산. 또한, CHO 세포는 산소 수치와 같은 매개변수의 변화에 내성이 있습니다. pH 값, 온도 또는 세포 밀도입니다.[10]
아주 낮은 염색체 a에 대한 수 (2n = 22) 포유동물, 중국 햄스터는 방사선 세포 유전학과 조직 배양에도 좋은 모델입니다.
1956년 원래 CHO 세포 라인이 서술된 이후, 세포 라인의 많은 변형이 다양한 목적으로 개발되었다.[8] 1957년 CHO 세포의 단일 클론으로부터 CHO-K1을 생성했다.[12] K1의 변종으로는 ATCC, ECACC 내 침전물 및 무단백질 매질에서 성장을 위한 버전이 있다.[12]
CHO-K1은 1970년대에 돌연변이화되었다. 메탄술포네이트에틸 결핍된 세포주를 생성하다 디히드로폴레이트 환원효소 (DHFR) 활동, CHO-DXB11(CHO-DUKX라고도 함)이라고 한다.[13] 하지만, 이 세포들은, 돌연변이가 발생했을 때, 반전 하다 DHFR 활동에 대한 그들의 효용성을 다소 제한적으로 만듭니다.[13] 그 후 1983년에 CHO 세포는 돌연변이 생성되었습니다. 감마선 세포 라인을 양보하다 대립형질 DHFR의 로커스 CHO-DG44라고 불리는 완전히 제거되었습니다.[14] 이러한 DHFR 결핍 균주는 글리신, 하이폭산틴및 티미딘 성장을 위해서요.[14] 돌연변이 DHFR을 갖는 세포주는 세포로서 유전자 조작에 유용하다 트랜스펙트 와 함께 관심 유전자 기능성 사본과 함께 디프아르 티미딘이 결핍된 미디어에서 유전자가 쉽게 선별될 수 있다. 이로 인해 DHFR이 부족한 CHO 세포는 산업용 단백질 생산에 가장 널리 사용되는 CHO 세포이다.
최근에는 다른 선택 시스템이 인기를 끌면서 CHO 세포에서 활성 크로마틴을 보다 효율적으로 표적할 수 있는 벡터 시스템과 항생제 선택(푸로마이신)은 단백질을 높은 수준에서 발현하는 재조합 세포를 생성하는 것뿐만 아니라 사용될 수 있다. 이러한 시스템은 특별한 돌연변이가 필요하지 않으므로, 비 DHFR 결핍 숙주 세포 배양이 우수한 수준의 단백질을 생산하는 것으로 밝혀졌다.
CHO 세포는 유전적 불안정(모든 불멸 세포와 마찬가지로) 성향이 매우 높기 때문에 적용된 이름이 제조 목적의 유용성을 나타낸다고 가정해서는 안 된다. 예를 들어, 2013년에 이용 가능한 세 개의 K1 자손 문화는 각각 서로에 비해 상당한 축적된 돌연변이를 가지고 있다.[12] 대부분 산업적으로 사용되는 CHO 세포 라인은 아닐지라도 현재 동물 성분 자유 매체나 화학적으로 정의된 매체에서 재배되고 있으며, 현탁배양 하의 대규모 생물반응기에 사용되고 있다.[8][12] CHO 세포의 복잡한 유전학과 세포 집단의 클론 유도에 관한 문제들이 광범위하게 논의되었다.[15][16]
유전적 조작
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CHO 세포에서 행해지는 유전자 조작의 대부분은 부족한 세포에서 이루어진다 디프아르 효소. 이 유전자 선택 방식은 재조합 치료 단백질의 생산을 위해 형질전환된 CHO 세포 라인을 구축하는 표준 방법 중 하나로 남아있다. 프로세스는 다음과 같이 시작합니다. 분자복제 관심 있는 유전자와 디프아르 단일 포유류로 유전자를 주입하다. 표현방식.. 플라스미드 두 유전자를 가진 DNA는 트랜스펙트 세포로, 세포는 선택적 티미딘이 부족한 상태 미디엄생존 세포는 외인성 디프아르 유전자와 함께 게놈.[17][18] 성장률과 수준이 재조합 단백질 각 셀 라인의 생산은 매우 다양합니다. 원하는 표현형 특성을 갖는 안정된 셀 라인 몇 개를 얻기 위해서는 수백 개의 후보 셀 라인을 평가하는 것이 필요할 수 있다.
CHO 및 CHO-K1 세포 라인은 다음과 같은 여러 생물 자원 센터로부터 얻을 수 있습니다. 유럽 세포 배양 컬렉션이 단체는 보건보호청 문화수집의 일부입니다. 이러한 조직은 또한 성장 곡선, 성장 시간 단축 비디오, 이미지 및 하위 문화 일상 정보와 같은 데이터를 유지합니다.[19]
산업용
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CHO 세포는 치료성 단백질의 양산에 사용되는 가장 흔한 포유류 세포 라인이다.[1] 그들은 리터당 3-10g의 비율로 재조합 단백질을 생성할 수 있습니다.[8] CHO 세포의 제품은 인간에게 기능할 수 있는 재조합 단백질에 번역 후 변형을 허용하기 때문에 인간 응용에 적합하다.[20]
참조 또한
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위키미디어 공용에는 관련 미디어가 있습니다. CHO세포.
세포 배양
약물 개발
임상 전 개발
참고 문헌
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외부 링크
17일 전에 마지막으로 편집한 에 의해 위키피디아루바
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