프로폴리스의 추출(�) 방법

[봉이 사랑(우성명포항)]

나. 프로폴리스의 추출(�) 방법

프로폴리스를 활용하기 위해서는 고형 프로폴리스와 액상 프로폴리스로 구분하는데, 일반적으로 이용하는 것은 액상(EEP : Ethanol extracted propolis)으로 하여 이용한다. 액상 프로폴리스도 용매에 따라 추출 방법이 다르다.

1) 에타놀(Ethanol) 추출방법
프로폴리스 1kg에다 70～80% 에타놀액 2～3ℓ와 함께 6개월 이상 하루에 2～3번 흔들어 혼합하여 가며 추출한다. 가능하면 3년 이상 추출하는 것이 좋다. 추출 할 때 용기를 꽉 밀폐시키지 말고 가끔 열어주어 프로폴리스의 독성을 휘발시키는 것이 좋다.

2) 주정이나 소주로 추출하는 방법
에타놀 추출법과 같이 프로폴리스 1㎏을 주정 70～80%액 2～3리터에 혼합 에타놀 추출법과 똑같이 추출한다. 소주는 알콜 농도가 낮으므로 장기간 (1년이상) 담가 가능한 한 매일 흔들어 혼합하여 추출하는 것이 좋다.

3) 물에 추출하는 방법(���
프로폴리스 원괴(
??)로부터 밀납(

� 제거.
밀납에는 유효 성분이 없을 뿐 아니라 물에 녹지 않는다.
a. 원괴를 아주잘게 부수어 1:5(100gr: 500㎖의물)의 비율로 50°C 전후의 열탕(��에 6시간 넣어두면 원괴 표면의 밀납이 녹아서 �~위로 뜨므로 용이하게 제거됨과 프로폴리스성분이 충분히 용출된다.
b. 추출액을 10,000rpm에서 10분간 원심분리 상등액(���을 취하고 남은 침전물을 한번 더 같은 방법으로 한다음 1과 2를 여과후 동결건조한 원말(
�I)을 성분추출의 효율을 높이기 위해 300～400메쉬 밀가루 보다 약간 큰 정도 고운 가루(�'I)로 한다. 보통 11-13%의 회수율임.
c. 고운 가루(�'I) 프로폴리스에다 zg��加한다. 그리고 상대적으로 온도를 50˚C 전후로 하면서 감압(減�한다.
d. 추출액(��을 동결건조(���!)하여 프로폴리스 'I��
※프로폴리스 분말에는 항암작용 성분이 포함된 것이 밝혀졌다.
※물추출 분말은 수용성 이므로 2차 가공에도 용이하다.

4) 초임계 추출법(�� ��
프로폴리스의 새로운 성분 추출법
a. 초임계상태: ����이산화 기체를 실온～100˚C 정도의 온도에서 수십 기압으로 처리하면 액체상태로 됨)의 액체(�� {
�추출법으로 액화 2산화탄소(�U}�U��Co₂- 초임계 상태의 액상이산화탄소는 무독이며, 다른 화합물과 반응하지 않는 안정한 액체)로 추출한다.
b. 액화이산화탄소추출법(�U}�U����의 특징
프로폴리스의 향기성분이 남으며, 산패 방지, 항 알러지 성분이 많으며, EEP보다 후라보노이드 성분은 적으나 항알러지의 활성은 5～10배나 강하며, 항암 활성이 높은 것으로 확인되었다.




다. 프로폴리스의 성분분석

1) 프로폴리스 구성성분
꿀벌이 수집한 프로폴리스의 구성성분은 봉장 주변에 어떤 프로폴리스 분비수목이 있는가에 따라서 달라진다. 독일 Kilu 대학의 Habsten 박사의 보고에 따르면, 프로폴리스 중 약 50～55%가 점성 수지이며, 밀랍이 5～10%, 정유가 약 8～10%, 화분 ester류가 5～10%이며, 농도가 비교적 높은 후라보노이드는 약 20～30종류 포함되어 있다고 하였다.
프로폴리스의 구성성분 중에 가장 중요한 것은 후라보노이드이다. 프로폴리스에 있는 후라보노이드는 지금까지 약 124종류가 분석 되었으며, 이 중에 어떤 성분이 암이나 바이러스에 효능이 있는 것으로 알려져 있다.

표-12 프로폴리스의 성분분석

1) Quercetin은 후라보노이드의 일종이다.
2) 광물질류에서 납성분은 검출되지 않았다.

후라보노이드 이외의 주요 성분으로는 아미노산을 비롯하여 각종 무기질과 비타민이 있다. 프로폴리스에 함유되어 있는 무기질은 철(Fe), 아연(Zn), 망간(Mn), 알루미늄(Al), 마그네슘(Mg), 코발트(Co), 실리콘(Si), 칼슘(Ca) 등이 있으며, 비타민은 프로비타민A, 비타민B1, 비타민B2, 비타민D, 니코틴산, 베타카로틴(β-carotene)등이 있다.

2) 프로폴리스 성분분석 결과
전라북도내 3개 양봉장으로부터 프로폴리스를 수집하여 성분분석을 실시한 결과는 표12와 같았다.
프로폴리스를 성분분석 했을 때, 가장 많이 차지하는 성분은 수지성 물질로서 50～55%이었다. 그 다음으로 큰 비중을 차지하는 성분은 밀랍(Wax)으로 10～40%이었다. 기타 성분으로는 정유(�)가 8～10%, 화분이 5～8% 정도였다. 수분은 평균 3.9%가 함유되어 있었다.
기능성 물질인 무기질과 비타민은 대개 미량으로 함유되어 있었다. 대표적인 무기질은 철, 아연, 망간, 알루미늄, 마그네슘, 칼슘 등이었으며, 납은 검출되지 않았다. 비타민으로는 프로비타민 A, 비타민 B1, B2, D, 니코틴산, β-카로틴 등이 함유되어 있었다. 그 외에도 퀘르세틴(Quercetin)을 비롯한 다양한 후라보노이드가 함유되어 있는 것으로 나타났다.

3) 납성분 분석결과
납성분을 검출하기 위한 분석을 수차례 실시하였지만 한번도 납성분이 검출되지 않았다. 참고로 일본은 납성분을 20ppm 이하로 규제하고 있다.

4) 후라보노이드 성분의 함량분석 결과
후라보노이드는 기능성 물질로 프로폴리스의 효능에 중요한 역할을 한다. 따라서, 각 양봉장별로 프로폴리스에 함유도어 있는 후라보노이드 중 퀘르세틴(Quercetin)의 함량을 정확히 분석하기 위해 다음과 같은 실험을 실시하였다.
a. 분석과정
후라보노이드 중에서 주요 분석대상은 퀘르세친이라는 성분이다. EEP 속에 퀘르세친이 얼마나 함유되어 있는가를 알기 위해서는 EEP를 희석한 용액에다가 퀘르세친을 가장 잘 흡수하는 415㎚의 파장을 비추어 보면 알 수 있다.
EEP 희석액 속에 퀘르세친의 함량이 많으면 415㎚의 파장을 많이 흡수할 것이고, 퀘르세친의 함량이 적으면 415㎚의 파장을 조금 흡수한다.
따라서, 얼마만큼의 퀘르세친이 있을때 얼마만큼 파장을 흡수하는지 알 수 있는 표준곡선을 만들면, EEP 희석액에 415㎚ 파장이 얼마나 흡수되는지 조사하면 그 속에 함유되어 있는 퀘르세친 양을 계산해 낼 수 있다.
b. 분석결과
위와 같은 방법으로 분석한 결과 퀘르세친 함량은 A양봉장의 1차 EEP가 2.01㎍/㎖로 가장 높았다.
그리고, 모든 양봉장에서 1차 EEP가 2차 EEP보다 퀘르세친 함량이 높았다. A양봉장에서 1차 EEP의 퀘르세친 수치는 2.01㎍/㎖로서, 2차 EEP의 퀘르세친 수치인 1.36㎍/㎖보다 47.8%가 높았다. B양봉장에서는 1차 EEP는 1.96㎍/㎖로서 2차 EEP의 퀘르세친 수치인 1.16㎍/㎖보다 70.0%가 높았다. C양봉장의 경우에도 1차 EEP의 퀘르세친 수치는 1.12㎍/㎖로서, 2차 EEP의 퀘르세친 수치인 0.84㎍/㎖보다 33.3%가 높았다.
이와 같은 결과는 첫 번째 추출한 1차 프로폴리스의 퀘르세친 농도가 2차 프로폴리스의 퀘르세친 농도보다 높은 것을 보여주고 있지만, 그 편차(30～70%)는 양봉장마다 심한 것을 알 수 있다. 그리고, 퀘르세친 농도가 각 양봉장마다 차이가 심하여, C양봉장의 1차 EEP의 퀘르세친 농도가 A양봉장과 B양봉장의 2차 EEP의 퀘르세친 농도보다 낮은 것으로 나타났다.

라. 프로폴리스의 음용(b
� 방법
일반적으로 프로폴리스를 환자들이 마실 때 각자 마시기 쉬운 방법 으로 마시는 경향이 있다. 프로폴리스는 건강유지 및 건강증진을 위해서 그리고 질병의 치유를 위해서 음용하게 된다. 따라서 되도록 아래와 같은 사항을 주의하여 음용 하여야 효과를 증진할 수 있다고 사료된다.

1) 물은 냉수보다는 따스한 체온 정도의 온수에 희석하여 마시는 것이 효과적이다.

2) 마시기 쉬운 방법보다 효과가 높게 마신다. 꿀이나 다른 음료수에 타서 마시는 것은 좋지 않으므로 물에 타서 마시는 것이 효과적이다.

3) 어떤 질환이 있어 약(墾을 먹고 있을 경우에는 약과 같이 먹지 말 고 2-3시간의 간격을 두고 마시는 것이 효과적이다.

4) 식후(i� 만복(=�시 보다는 식간이나 식전의 공복(n�시에 마시는 것이 효과적이다.

5) 치료를 위하여 많이 마실 때에는 1일 3회로 나누어 음용하는 것 보 다 여러번 나누어 마셔서 항상 몸 전체에 프로폴리스 성분이 있도록 하는 것이 대단히 효과적이다.

6) 많이 마셔도(체중 1kg당 10～15g) 인체에 전혀 무해(�� 하며 음 용기간중 금기사항이나 부작용이 없다. 알레르기 증상이 나타날 경우 복용을 중단하면 된다.


7. 우리나라 프로폴리스 요법에 대한 설문 조사

현재 전세계적으로 프로폴리스에 대한 관심이 높은 가운데 우리나라에서도 프로폴리스 민간요법이 양봉가들에 의하여 수년전부터 시행되고 있으며 많은 경험을 쌓고 있는 실정이다.
민간요법에 대한 실상을 조사 분석하여 우리 나라 프로폴리스의 기능적 특성을 파악하기 위하여 1997년 1월부터 2000년 6월까지 3년 6개월동안 조사하였다.
조사지역으로는 경기(인천.여주), 경남, 경북, 서울, 전북, 제주, 충남(대전.아산), 충북지역의 양봉가들을 대상으로 채취 처리한 프로폴리스로 치료한 여러질환의 치유 사례를 양봉가들과 직접만나거나, 설문지를 우송하여 조사 하였다.

가. 양봉가들의 프로폴리스 민간요법에 의한 내과질환 치유효과

1) 위궤양 치유(C$) : 내과질환중에서 위궤양이 69(16%)명으로 제일 많이 치유된 것으로 설문되었다. 이같은 효과는 위궤양의 원인이 되는 헤리코박터피로리(Helico-bacter-pylori)를 완전히 억제하는 아피제닌, 피노셈부린(Apigenin, Pinocembrin) 성분이 프로폴리스에 있기 때문이라고 하였다(Itoh et al., 1994).
소화불량 치유(C$) : 프로폴리스가 소화불량 질환자 63(14%)명, 위질환 28(6%)명과 위염, 십이지장 및 궤양등이 대단히 많이 치유된 것으로 조사되었는데, 이것은 프로폴리스의 주성분인 후라보노이드의 항염증, 항균 등 인체의 생리활성을 증강시키는 기능에 의한 것으로 본다 (Ravina, 1969. Bankova et al., 1983).
현재까지 계속한 조사에 의하면 양봉가가 보내준 프로폴리스 희석액을 복용하여 온가족이 위장질환을 완전히 치유한 사례가 적지 않다.

2) 치통 치유(C$) : 치통(S�이 41(19%)명으로 많이 치유된 것은 오랜동안 양봉가 등이 치통에 프로폴리스를 직접 활용하면 치통이 멈추었으며 치유되었기 때문이다. 이것은 프로폴리스의 구성 성분중 피노셈부린, 피노스트로빈(pinocembrin, pinostrobin) 그리고 카페인산, 에스테르(caffeic acid ester) 화합물에 의한 것으로 본다. (Paintz and Metzner, 1979)

3) 당뇨질환 치유(C$) : 당뇨질환은 36(8%)명이 프로폴리스 민간요법으로 치유된 것으로 나타났다. 쥐실험에서, 농축된 프로폴리스 추출물은 혈압을 낮추고 가라앉히는 효과 뿐 아니라 혈액의 포도당 수준을 유지시키는 기능을 보여주었다고 한다(Kedzia, 1988).

4) 암 치유(C$) : 이번조사에서 가장 중요시 되는 것은 12(3%)명의 암 환자가 프로폴리스 민간요법에 의해 치유되었다는 사실이다.
마쯔노(Matsuno, 1992)에 의하면 프로폴리스의 에탄올 추출물들은 실험실 테스트에서 인간의 간암과 자궁암종 세포들을 변형시키고 그 성장을 억제하는 것으로 나타났다고 하였다. 이러한 효과를 유발하는, 프로폴리스에서 분리된 물질들로는 퀘르세틴(quercetin), 카페인산(caffeic acid), 클레로단 디터펜도이드(clerodanne diterpendoid)가 있다. 클레로단 디터펜도이드는 종양 세포들에 대해서 선별적인 유독성을 보인다고 하였다.

5) 감기 치유(C$) : 감기에 프로폴리스가 잘 듣는다고 한다. 4(1%)명이 치유되었다.
임상실험에서 사람에 대한 인플루엔자 감염에 긍정적인 효과가 있었다. 일반적인 감기 감염에 대한 임상 실험에서는 프로폴리스를 투여하지 않은 환자들이 5일 정도가 지나 회복하는 것에 비해, 프로폴리스로 치료한 환자는 3일 안에 완벽하게 나아서 감염 기간이 줄어드는 것으로 나타났다고 한다(Szmeja, 1989).
이같은 치료효과를 나타내는 프로폴리스의 항 인플루엔자 바이러스 성분은 이소펜틸 훼루레이트(lsopentyl ferulate)이다 (Serkedjieva, 1992).

6) 부인질환 치유(C$) : 부인질환에 대해서 프로폴리스가 탁월한 효과를 나타낸다. 2(0.5%)명이 치유된것으로 나타났다. 화농연쇄상구균에 의해 일어나는 자궁경관과 질 염증을 가진 90명의 환자를 3%프로폴리스 에탄올 추출물로 치료하였다. 이러한 치료로 50%가 넘는 환자에게서 좋은 결과를 얻었다 (Zawadzki, Scheller 1973).
질의 여러 가지 기생충 감염증에 의해 야기되는 급성 자궁경관 염증으로 고생하는 환자에 대해 5%의 프로폴리스를 사용한 질붕대를 사용하여 90%의 환자가 치료 10일안에 자궁경부가 완전히 치료되었다(Santana Perez ,1995)

7) 대장염, 방광염, 위염 치유(C$) : 대장염, 방광염, 위염 등이 각각 1명씩 치유되어 각종 염증( ��질환이 프로폴리스 치료에 의해 치유되고 있다.
쥐에 대한 연구들에서, 프로폴리스 추출물은 염증 치료제로 사용되는 이도메타신(Idomethacin)과 대체로 비슷한 항염 효과를 보이는 것으로 밝혀졌다. 또 한편, 후라보노이드와 카페인산은 염증반응을 억제하는 역할을 하는 것으로 알려진다 (Mirzeva, Calder , 1996).

8) 폐결핵 치유(C$) : 폐결핵에 대한 프로폴리스의 치유효과를 보면, 유럽에서는 프로폴리스의 항균성(Karimova and Rodinova, 1963; Lindenfelser, 1967) 진통성등 많은 약리활성이 인정되어 주로 동구 유럽에서 민간전통약으로 이용되었다. 특히 구소련에서는 Propolis를 폐결핵 환자에게 이용?치료해 오고 있다 (Karimova, 1961, Masterov, 1995).
이같이 결핵을 치유할 수 있는 프로폴리스의 구성 성분은 리팜피신(Rifampicin)이며 항결핵(Anti-Tuberculosis) 특성을 나타낸다고 하였다.

나. 프로폴리스 민간요법에 의한 외과질환 치유효과

외과 질환에서 가장 많이 치유된 것이 습진으로 50(11%)명이나 되며 여드름이 18(4%)명, 교통상해 17(4%)명의 치유효과를 나타낸 것으로 조사되었다. 그리고 화상이 9(2%)명, 염증과 상처가 각각 5명, 무좀, 종기, 탈모 등이 각각 3명이며 피부질환과 구취(�1), 안질(��이 각각 2명씩 이고, 기미, 티눈 특히 아토피성 피부염이 각각 1명씩 치유 되었다. 이외에 노화방지, 정력증강, 피로회복에 효과가 있다고 하였다. 그리고 숙취와 팔다리 저린데, 미숙아 발육촉진에 효과가 있다고 하였다.
일반적으로 외과(
Dw) 질환은 상해(��나 균(
H)류, 바이러스에 의한 염증( ��성이 대부분이다.
프로폴리스에 대한 수많은 논문들은 프로폴리스가 항균적인 성분을 아주 많이 함유하고 있음을 보여주었다. 프로폴리스는 최소한 29종의 박테리아(MRSA를 포함), 24종의 fungus균류(개똥지빠귀, 백선(ringworm), 무좀에 나타나는 미생물들을 포함), 4종의 원생동물(Giardia 포함)과 바이러스 영역들(헤르페스와 인플루엔자를 포함)에 대해 억제력을 가지고 있는 것으로 나타났다.
프로폴리스의 최소 억제 농도가 바시러스 섭틸리스(Bacillus subtillis)와 스타피로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus)에 대해서 테트라싸이클린보다 53배나 더 높았으며, 대장균(E. coli)에 대해서는 400배나 더 높은 것으로 나타났다 (Bonvehi 등, 1994).

1) 습진 치유 : 습진은 가장많은 피부질환으로 외인(
D� 염증성( ��g)인 것이며, 50(11%)명이 프로폴리스 민간요법으로 치유 되었다고 답하였다. 이와같은 치유효과는 항균효과를 보여주는 프로폴리스의 활동성분들인 피노셈브린(pinocembrin), 갈란긴(galangin), 카페인산(caffeic acid), 페룰릭산(ferulic acid) 등과 살균성분들인 피노셈브린(pinocembrin), 피노백신(pinobanksin), 카페인산(caffeic acid), 벤질 에스테르(benzyl ester), 사쿠라네틴(sakuranetin), 프테로스틸벤(pterostilbene)을 포함하고 있기 때문이며, 항바이러스 성분들인 카페인산(caffeic acid), 루테올린(luteolin), 케르세틴을 함유하고 있는 프로폴리스의 기능적 특성으로 간주된다 (Schmidt & Buchmann, 1992).

2) 여드름(acne) 치유 : 여성들이 여드름으로 고민을 많이 하고 있다. 여드름 치유에 프로폴리스가 대단히 효과적이다. 루마니아의 프로폴리스 제제 여드름 치료약은 세계적으로 유명하다. 여드름으로 고생하는 30명의 환자에게 2개월 동안 매일 5% 프로폴리스 연고를 피부에 직접 사용하였다. 치료가 끝날 무렵에 18명(60%)은 좋은 향상을, 9명(30%)은 중간 정도의 향상을 보였으며, 3명은 전혀 효과가 없었다고 하였다. 백선(버짐)에 감염된 환자(110)의 50%가 프로폴리스 연고로 치료 되었다. 이중 97명의 환자(88%)에게서 이 연고가 훌륭한 결과를 나타내었다 (Bolshakova, 1975).

3) 피부병 치유 : 최근 세계 여러 나라에서 프로폴리스 제제 연고( �)로 방사선 장애, 궤양성 염증, 화상, 알러지(Allergy) 질환에 이용되고 있으며, 난치병인 아토피성 피부염(유전성, 가족성)도 고율로 치유되고 있다. 현재는 피부종양, 사마귀, 교통상해 피부, 여드름, 습진 및 무좀 치유에 많은 연구가 이루어지고 있으며, 특효가 있는 것으로 알려지고 있다 (Metzner, 1975, Lindenfelser, 1967).

4) 상처(�o) 치유 : 프로폴리스는 외과적 상처들을 치료하는데 효율적이다. 감염된 상처들을 지니고 있는 병원 환자들을 실험한 결과 프로폴리스로 외부치료를 하면 상처치료가 가속화 된다는 사실이 드러났다. 4일 안에 절반이 넘는 감염된 박테리아가 제거되었다. 프로폴리스는 박테리아의 항생제에 대한 저항 효과도 유발하지 않았다. (Damyanliev, 1982)

5) 화상(Y� 치유 : 프로폴리스는 화상 치료를 호전시킬 뿐 아니라 다양한 효소 시스템, 세포의 신진대사 순환과 콜라겐 형성을 자극하는 것으로 나타났다 (Ghisalberti, 1979). 화상을 입은 쥐들에게 프로폴리스와 요소를 발랐더니 2주 내에 조직 재생이 나타났다 (Troshev 등, 1990).

6) 무좀 치유 : 프로폴리스는 백선과 무좀 같은 피부 감염들의 원인이 되는 이스트와 진균류의 성장을 억제하는데 효과적이다(Metzner 등, 1979). 이러한 미생물들에 반응하는 프로폴리스 합성물들로는 후라보노이드와 카페인산 파생물들이 있다.

7) 안질(�� 치유 : 눈병치료에 프로폴리스가 효과적이다. 백내장(x
�7)도 치료가 가능하며 다래끼는 즉효(
��이다. 눈의 헤르페스를 앓고 있는 55명의 환자에게 의학적 프로폴리스 필름을 10～15일 동안 잠자는 시간에 눈꺼풀 뒤에 붙여 놓았다. 이 물질이 각막의 치료를 가속화 시키고 부종을 빠르게 사라지게 만드는 것으로 나타났다. 환자들의 회복기간이 대비(�G)집단에 비해 2배 정도까지 빨랐다(7.6일 대비 14.1일). (Maichuk등, 1995)

8) 노화 방지, 정력증강, 피로회복, 그리고 미숙아 발육촉진의 효과(퀅)가 있다고 기타에서 10여명이 응답하였다. 이같은 효과는 프로폴리스의 기능적 특성인 항산화 및 면역 증강 특성 때문이라고 본다.
프로폴리스에 농축된 후라보노이드는 강력한 노화 방지제이다. 노화 방지제들은 유리기(Free radical)들을 청소할 수 있고, 따라서 지질 및 비타민 C 같은 다른 합성물들이 산화되거나 파괴되는 것을 막아 주는 것으로 나타났다고 하였다 (Popeskovic 등, 1980).
프로폴리스는 또한 고도 불포화 유지 지방들을 과다하게 섭취한 동물들에게서 비타민 E보다 더 뚜렷한 노화 방지 효과를 유발시켰다 (Okonenko, 1986).
그리고 과산화물 생성 억제 작용이 있어 인간의 노화나 암발생을 방지 회춘(�) 효과를 가져오는 기능이 있음을 활성산소(zg�� 억제 기능에 의하여 알 수 있었다 (Chiao 등, 1995; Matsuno, 1992).

프로폴리스는 옛날부터 여러가지 질병치료를 위하여 민간요법으로 활용되어 왔다. 오늘날에도 프로폴리스의 항염증(���, 항바이러스, 면역촉진(u _��, 그리고 항암 활성등 대단히 중요한 약물학적 특성 때문에 세계적으로 프로폴리스 민간요법이 행하여지고 있다.
이와같이 Propolis 추출물(EEP)이 각종질환을 치유할 수 있었던 것은 여러식물들의 보호물질과 꿀벌의 보호물질에 들어있는 Propolis에 여러 가지 생리학적, 약리학적 특성에 의한 것으로 본다.
이같은 결과는 한국의 프로폴리스 추출물이 여러 가지 질환치료에 대단히 효과적임을 시사하고 있으며, 우리나라의 프로폴리스와 이들의 구성성분이 광범위한 여러 가지 생물학적 약제와 약리학적 활성을 제시한 것이 증명되었다.
앞으로 더 많은 양질의 Propolis를 생산 활용하여 보다 많은 사람들이 온갖 질병으로부터 벗어나