스크랩 수확하기 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법, 아피오스 유래 펩티드 및 그 제조 방법

[한해별]

【발명의 명칭】	아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법, 아피오스 유래 펩티드 및 그 제조 방법
【발명자】	【이름】이와이 방구 【이름】마츠에 일 【이름】쿠라모토 수조 【이름】이치다 순치
【요약】	【과제】아피오스로부터, 생활 습관병의 하나인 고혈압 예방을 위한 강압 펩티드를 간단하고 쉽고 고수율에 꺼내, 그것들을 이용한 강압제나 고혈압 예방제, 기능성 식품등을 실현할 수 있는, 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법, 아피오스 유래 펩티드 및 그 제조 방법을 제공하는 것. 【해결 수단】아피오스에 10 배량 이상의 초산을 첨가해 30~40℃으로 가온해, 펩신을 이용해 37℃에서 24시간 이상 소화하는 것에 의해서, 아피오스 유래의 펩티드를 성분에 함유 한 거의 균일한 용액을 얻는다.또 이것을 감압건고 해 그 처리물을 얻거나 동결건조 후 분말화해 그 처리물이라고 해도 좋다.

【특허 청구의 범위】
【청구항 1】
아피오스 Apios americana에 초산을 첨가해, 소화 효소로 소화하는 것에 의해서, 아피오스 유래의 펩티드를 성분에 함유 한 거의 균일한 용액을 얻는 것을 특징으로 하는, 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
【청구항 2】
전기 소화 효소는 펩신인 것을 특징으로 하는, 청구항 1에 기재의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
【청구항 3】
전기 거의 균일한 용액을 얻은 후, 이것을 감압건고 해 그 처리물을 얻는지, 또는 물에 녹여, 동결건조 해, 분말화해 그 처리물을 얻는 것을 특징으로 하는, 청구항 1또는 2에 기재의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
【청구항 4】
전기 아피오스는 생의 것, 보일 한 것, 페이스트화한 것, 분말화한 것, 혹은 이것들을 동결 후에 해동한 것, 또는 이러한 찌꺼기의 어느쪽이든을 이용하는 것을 특징으로 하는, 청구항 1내지 3의 어느 쪽인가에 기재의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
【청구항 5】
전기 초산의 첨가량은, 원료 아피오스에 대해서 중량으로 10배 이상의 양으로 해, 해초산 첨가 처리에서는 가온하는 것으로 해, 또 전기 소화 효소에 의한 처리 시간은 24시간 이상으로 하는 것을 특징으로 하는, 청구항 1내지 4의 어느 쪽인가에 기재의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
【청구항 6】
아피오스 Apios americana에 초산을 첨가해, 가온해, 펩신 처리하는 것에 의해서, 안지오텐신 변환 효소(ACE) 저해 활성을 가지는 아피오스 유래의 펩티드를 얻는 것을 특징으로 하는, 아피오스 유래 펩티드 제조 방법.
【청구항 7】
초산을 이용한 가온 및 펩신 처리에 의해 아피오스를 처리해 얻을 수 있는, 안지오텐신 변환 효소(ACE) 저해 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, 아피오스 유래 펩티드.
【청구항 8】
아래와 같이(A) 또는(B)의 몇개의 아미노산 배열을 가지는 것을 특징으로 하는, 청구항 7에 기재의 아피오스 유래 펩티드.
(A) Tyr－Arg－Leu－Pro－Asn－Leu
(B) Tyr－Gln－Leu－Pro
【청구항 9】
청구항 1내지 6의 어느 쪽인가에 기재의 방법에 의해 얻을 수 있는 아피오스의 초산·효소 처리물, 또는 청구항 7혹은 8에 기재의 아피오스 유래 펩티드를 이용해 제조되는 것을 특징으로 하는, 강압제, 고혈압 예방 식품, 고혈압 예방 서플리먼트, 고혈압 예방 음료 또는 고혈압 예방 약제.
【청구항 10】
아피오스 Apios americana의 규격외근괴에 초산을 첨가해, 가온해, 펩신 처리하고, 용액장 처리물 혹은 그것을 처리해서 되는 분말상 처리물로 하는 것을 특징으로 하는, 규격외 아피오스의 처리 방법.

【발명의 상세한 설명】【기술 분야】
【0001】
본 발명은 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법, 아피오스 유래 펩티드 및 그 제조 방법과 관련된다.즉, 콩(물집)과다년초 아피오스의 근괴로부터, 생활 습관병의 하나인 고혈압 예방을 위한 강압 펩티드를 간단하고 쉽고 고수율에, 게다가 용액장 혹은 분말상에서 얻을 수 있는 기술, 또 이것들을 이용한 강압제, 고혈압 예방 효과를 가지는 기능성 식품·음료등의 제조 방법에 관한 것이다.
【배경 기술】
【0002】
북미 원산의 아피오스(Apios americana)는 콩(물집)과의 다년초이며, 뿌리가 수센치 간격으로 부풀어 올라 근괴를 형성해, 이것을 음식 할 수 있다.이 근괴는 감자와 비교하면 영양가가 높고, 전국적인 인지도는 아직 낮지만, 아오모리현을 중심으로 재배·유통이 퍼지고 있다.
【0003】
아피오스의 재배 방법은 거의 확립되어 있어 현재, 아오모리현 고노헤마치 쿠라이시 지역 및 아오모리현 시치노헤마치 텐마바야시 지역을 중심으로 재배를 하고 있다.이러한 지역에서 매년 11월 무렵에 수확된 아피오스근괴는, 생으로로, 혹은 보일 가공 후에 냉동된 상태로 시판되고 있다.아피오스는 일부의 소비자로부터 뿌리 깊은 인기를 얻고 있지만, 그 배경에는, 률과 감자를 대면시킨 것 같은 특징이 있는 음식맛은 물론이고, 변비 해소, 피로 회복 혹은 비만 예방 등에 대하는 효과의 것(정도)만큼이, 상당 정도 풍부하게 경험적으로 주장되고 있는 일도 줄 수 있다.그렇지만, 이러한 효과에 관한 과학적 근거는, 지금까지는 나타나지 않은 현상이다.
【0004】
한편, 원인이 되는 성분은 특정되어 있지 않기는 하지만, 아피오스는 과식에 의해 설사를 유인 하는 것이 알려져 있다.아피오스는 콩(물집)과식물이면서, 탄수화물, 특히 식물 섬유가 약 10%과 풍부하고, 이것이 설사의 요인이 되어 있을 것으로 예상된다.따라서, 얼마나 건강한 효과가 하면 집들, 1일에 음식 다투는 아피오스는 종래, 겨우 3~4개(1개 10 g전후)에 머무르고 있다.
【0005】
또, 생산 상황에 주목하면, 수확된 근괴는 크기가 고르지 않음이며, 한편, 그러한 근괴는 염주장으로 연결되어 있기 위해서, 거기로부터 크기가 갖추어진 근괴, 통상은 길이 3~4 cm, 무게 10 g전후의 것을 선별하는 것에는 다대한 노력을 필요로 한다.한층 더 아피오스는 다년초이기 위해, 2년째 및 3년째의 근괴는 크게 비대하지만 단단하지도 된다.따라서, 생식 또는 보일 가공에 사용할 수 있는 근괴와 사용할 수 없는 규격외근괴가 존재해, 상기 쿠라이시 지역에서는 연간 수확량의 30~40%에 상당하는 3 t전후가 규격외근괴가 되고 있다.이 규격외근괴를 이용하기 위해서는, 미, 형, 크기 모든 점에 대해 어떠한 가공 처리를 가하지 않을 수 없기 때문에, 종래는 분말화 및 페이스트화 처리가 이용되고 있다.그러나, 제과, 제면등을 목적으로 한 가공 원재료용 분말로서는 코스트가 비싸지기 위해, 이용 빈도는 낮다.
【0006】
한편, 일본인의 평균수명은 세계 최장으로는 되었지만, 동시에 진행되고 있는 식생활의 혼란이나 구미화는, 생활 습관병의 증가를 일으키는 요인이나 되고 있다.이 때문에, 일본이 뛰어난 식생활에 관한 과학적 연구의 성과를 새로운 식품으로서 구체화해, 그것을 이용하는 것으로, 생활 습관병의 증가가 억제된다고 생각되고 있다.
【0007】
걸리는 생활 습관병 중(안)에서, 고혈압은 혈압의 높은 상태가 계속 되는 질병이지만, 그 성인은 아직도 확실하지 않다.또, 고혈압 자체는 치사적이지 않기는 하지만, 동맥 경화를 시작으로 하는 뇌혈관, 마음 질환 등 시게아츠인 질환의 요인이나 되는 것부터, 조기 개선이 강하게 바람직하고 있다.현재의 대다수의 고혈압 치료법에서는 약물 치료가 필요하고, 고혈압 개선약으로서는, 그 작용 기서의 차이에 의해, 안지오텐신 I변환 효소 저해약, Ca대항약, 이뇨약, 안지오텐신II수용체 대항약,α또는β차단약등이 개발되어 그 효과가 실증되고 있다(후게비특허 문헌 1).한편, 경증 고혈압증 혹은 정상 고가 혈압증을 시작으로 하는, 고혈압 예비군에 대해서의 제일의 치료법은, 생활 습관의 시정이다.이것은, 식생활을 포함한 생활 습관이 고혈압의 진전에 크게 관계되어 있어 경계역고혈압증의 경우에는 그 시정에 의해서 어느 정도의 혈압 개선이 가능한 일을 시사하고 있다(후게비특허 문헌 2).
【0008】
걸리는 상황하, 음식에 관한 과학적 연구 중(안)에서도 고혈압의 예방·개선에 관한 연구가 진행되어 혈압 강하 작용을 가지는 식품이 카미이치 되게 되었다.강압 작용을 가지는 식품 소재가 개발되는 배경은, Cheung등(후게비특허 문헌 3)에 의한 생리 활성 펩티드의 보고가 계기가 되어, 각종 천연 단백질로부터의 안지오텐신 변환 효소(이하, 「ACE」라고도 약기한다) 저해 펩티드의 조제와 단리·분류가 이루어져 왔다.게다가 마츠이등(후게비특허 문헌 4)은 정어리에 포함되는 ACE 저해 펩티드가 펩신에 의한 효소 처리에서는 쓴 맛을 가지는데 대해, 다른 프로테아제 처리에서는, 무미 무취로 강압 작용이 향상하는 것을 보고했다.
【0009】
거기서, 이러한 점에 주목한 숙원 발명자의 한 사람으로 있는 이와이는, 아피오스근괴의 건강적 유익성을 분명하게 방법구연구에 임해, 자연 발증 고혈압 래트(이하, 「SHR」라고도 약기한다)에게 아피오스근괴분말을 섭취시켰는데, 온화한 혈압 강하 작용을 찾아냈다(후게비특허 문헌 5).이것에 의해서, 아피오스의 건강적 부가가치의 하나가 인정되었다.
【0010】
덧붙여 아피오스를 키워드로서 IPDL의 특·실공보 텍스트 검색되는 예에는 후게특허 문헌 1의 기술이 있지만, 이것은, 아피오스화다의 제조법에 관한 것이다.
【특허 문헌 1】특개평 07－030545 「아피오스차 및 그 제조 방법」
【비특허 문헌 1】마츠이, bioscience와 산업： Vol.60, pp.665－670, 2002.
【비특허 문헌 2】현장 의가를 위한 고혈압 치료 가이드 라인： 2000.
【비특허 문헌 3】H.S.Cheung, F.L.Wang, M.A.Ondetti, E.F.Sabo, D.W.Cushman： J. Biol. Chem.： Vol.225, pp.401－407, 1991.
【비특허 문헌 4】T.Matsui, 외, Recent Research Deｖelopments in Agricultural and Food Chemistry： pp.9－16, 1997.
【비특허 문헌 5】이와이, 일본미병 시스템 학회 잡지： Vol. 11, pp.188－193, 2005.
【발명의 개시】
【발명이 해결하려고 하는 과제】
【0011】
그런데, 일반적으로 단백질은 고분자이기 위해, 실제로 생체내에 흡수되고 있는 것은 펩티드등의 저분자이며, 따라서 저분자 펩티드가 보다 높은 부가가치를 낳기에 이르고 있다.아피오스의 수분 함량은 55%이며, 이것을 이용하기 쉬운 형태로 하기 위해서는, 각종의 소재와 자유로운 조합이 생겨 게다가 각종 식품에 사용되기 쉬운 분말이나 용액의 형태로 하는 것이 바람직하다.
【0012】
게다가 그러한 소재는 고혈압 예방 효과의 지표인 ACE 저해 활성등의 생리 활성을 가져, 게다가 제조 공정으로 그 활성을 유지하는 것이 바람직하다.또, 아피오스 유래 펩티드는, 식품 학문적 및 영양학적으로도, 위액 분비 능력이 활발하지 않은, 또는 소화 능력이 쇠약해져 온 고령자, 또 위적출자 등에게 있어도 흡수하기 쉬운 펩티드 소재인 것이 바람직하다.
【0013】
또, 그러한 소재는, 아피오스의 과식에 의해 유발되는 설사의 요인이 되는, 식물 섬유를 포함한 탄수화물이 적은 것이 바람직하다.
【0014】
상술한 것처럼, 아피오스의 규격외근괴의 이용 정도는 낮은 것에 머무르고 있다.결국 그것은, 생산 및 유통 관계자에게 있어서 큰 고민거리가 되고 있어 아피오스 유래 펩티드를 실용적으로 제조할 수 있는 기술이 개발되면, 관계자에게 있어서는 년간의 문제를 해결할 수 있는 도움이 되는 위, 반대로 고부가 가치 제품화할 수 있는 것은 틀림없다. 뿐만 아니라, 걸리는 기술개발은, 생리 기능이 저하하는 고령자나, 고혈압등의 생활 습관병을 안은 많은 사람들에 있어서도 많이 유익하고, 아피오스 규격외근괴의 유효 이용 기술의 개발은 많은 사람들로부터 강하게 바람직하고 있다.
【0015】
또, 아피오스의 과식에 의한 설사 유발은, 아피오스 애호자 및 아피오스의 건강적 효과를 기대하는 사람들에게 있어서는, 섭식 수량에 제한을 가져오고 있는 것부터, 이 부작용적인 영향을 제거 혹은 감소시키는 기술도 많은 사람들로부터 바람직하고 있다.
【0016】
그렇지만 위에서 설명한 바와 같이, 아피오스근괴를 이용하기 위한 용액화 기술은 아직도 존재하지 않고, 또 분말화 기술은 이미 존재하고는 있지만, 코스트적으로 문제가 있어, 산업상 이용의 관점으로부터 폭넓은 용도를 얻는에는 이르지 않았다.
【0017】
본 발명이 해결하려고 하는 과제는, 상기 종래 기술의 문제점을 제외해, 유용한 생리 기능을 가지는 아피오스로부터, 생활 습관병의 하나인 고혈압 예방을 위한 강압 펩티드를 간단하고 쉽고 고수율에 꺼내, 그것들을 이용한 강압제나 고혈압 예방제, 기능성 식품등을 실현할 수 있는, 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법, 아피오스 유래 펩티드 및 그 제조 방법을 제공하는 것이다.
【과제를 해결하기 위한 수단】
【0018】
숙원 발명자는 상기 과제에 대해 검토해, 각종 시험을 거듭한 결과, 경구 섭취 가능한 유기산, 즉 동서 고금을 불문하고식 되어 온 초산을 이용해 아피오스 본체, 아피오스 분말 또는 아피오스페이스트, 혹은 이러한 찌꺼기를 가온, 소화 효소(펩신이 특히 적합)로 소화하는 것으로써, 그것을 가용화하거나 분말화할 수 있는 펩티드 단편 으로 분해할 수 있는 것을 찾아냈다.게다가 이 펩티드 용액이나 분말에 혈압 강하 작용의 지표인 안지오텐신 변환 효소 저해 활성이 있을 것을 밝혀, 상기 과제의 해결이 가능한 것을 찾아내, 숙원에 이르렀다.즉, 상기 과제를 해결하기 위한 수단으로서 숙원으로 특허 청구되는 발명, 혹은 적어도 개시되는 발명은, 이하와 같다.
【0019】
(1) 아피오스 Apios americana에 초산을 첨가해, 소화 효소로 소화하는 것에 의해서, 아피오스 유래의 펩티드를 성분에 함유 한 거의 균일한 용액을 얻는 것을 특징으로 하는, 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
(2) 전기 소화 효소는 펩신인 것을 특징으로 하는, (1)에 기재의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
(3) 전기 거의 균일한 용액을 얻은 후, 이것을 감압건고 해 그 처리물을 얻는지, 또는 물에 녹여, 동결건조 해, 분말화해 그 처리물을 얻는 것을 특징으로 한다, (1) 또는(2)에 기재의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
(4) 전기 아피오스는 생의 것, 보일 한 것, 페이스트화한 것, 분말화한 것, 혹은 이것들을 동결 후에 해동한 것, 또는 이러한 찌꺼기의 어느쪽이든을 이용하는 것을 특징으로 하는, (1) 없고(3)의 어느 쪽인가에 기재의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
(5) 전기 초산의 첨가량은, 원료 아피오스에 대해서 중량으로 10배 이상의 양으로 해, 해초산 첨가 처리에서는 가온하는 것으로 해, 또 전기 소화 효소에 의한 처리 시간은 24시간 이상으로 하는 것을 특징으로 하는, (1) 없고(4)의 어느 쪽인가에 기재의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법.
【0020】
(6) 아피오스 Apios americana에 초산을 첨가해, 가온해, 펩신 처리하는 것에 의해서, 안지오텐신 변환 효소(ACE) 저해 활성을 가지는 아피오스 유래의 펩티드를 얻는 것을 특징으로 하는, 아피오스 유래 펩티드 제조 방법.
(7) 초산을 이용한 가온 및 펩신 처리에 의해 아피오스를 처리해 얻을 수 있는, 안지오텐신 변환 효소(ACE) 저해 활성을 가지는 것을 특징으로 하는, 아피오스 유래 펩티드.
(8) 아래와 같이(A) 또는(B)의 몇개의 아미노산 배열을 가지는 것을 특징으로 하는, (7)에 기재의 아피오스 유래 펩티드.
(A) Tyr－Arg－Leu－Pro－Asn－Leu
(B) Tyr－Gln－Leu－Pro
(9) (1) 없고(6)의 어느 쪽인가에 기재의 방법에 의해 얻을 수 있는 아피오스의 초산·효소 처리물, 또는(7) 혹은(8)에 기재의 아피오스 유래 펩티드를 이용해 제조되는 것을 특징으로 하는, 강압제, 고혈압 예방 식품, 고혈압 예방 서플리먼트, 고혈압 예방 음료 또는 고혈압 예방 약제.
(10) 아피오스 Apios americana의 규격외근괴에 초산을 첨가해, 가온해, 펩신 처리하고, 용액장 처리물 혹은 그것을 처리해서 되는 분말상 처리물로 하는 것을 특징으로 하는, 규격외 아피오스의 처리 방법.
【0021】
즉 본 발명은, 아피오스 또는 아피오스의 찌꺼기를, 미, 사과, 포도등의 당질 원료로부터 발효시켜 제조되어 게다가 경구 섭취 가능한 산인 초산을 이용해 가열해, 소화 효소로 처리하는 것에 의해서, 이것을 가용화, 분말화 가능한 펩티드 단편 으로 분해할 수 있는 신규 기술에 관한 것이다.또, 이와 같이 해 얻을 수 있는 펩티드 용액이나 분말은 각종 식품 소재에 자유로운 비율로 혼합해 이용하는 것이 가능하다.게다가 이 용액이나 분말 및 혼합물은, 고혈압 예방 효과의 지표인 ACE 저해 활성을 가진다고 하는 특징이 있다.
【0022】
본 발명은, 판매가 곤란해지고 있는 규격외 아피오스근괴를 적용 대상으로 한 연구로부터 태어난 것이지만, 적용 대상은 규격외 아피오스근괴로 한정되지 않고, 넓고 아피오스 전체(생, 분말, 페이스트등)에 대해서 이용할 수 있는 것이다.
【0023】
아피오스근괴는, 생, 보일물, 페이스트, 분말, 혹은 이것들을 동결 보존 후에 해동했지만 모두, 출발 원료로 할 수 있다.또, 사용하는 아피오스근괴는 1년의 한편 규격내의 것으로 한정되지 않고, 규격외의 것에서도, 혹은 또 2년의 이상의 것에서도 상관없다.또, 첨가하는 초산의 양은 원료의 약 10 배량 정도로 하는 것으로, 특히 양호한 결과를 얻을 수 있다.또, 초산 첨가시의 가온은, 30~40℃에서 10분 ~30분 정도가 적당하다.또, 첨가하는 초산은, 화확적으로 합성한 초산에서도, 혹은 양조 발효한 쌀식초, 사과식초, 바르사미코식초등의 이른바 식초라도 좋다.소화 효소로서는 펩신을 매우 적합하게 이용할 수 있지만, 펩신 처리는 구체적으로는, 펩신을 1%정도 첨가해, 37℃으로 대체로 24시간 이상 실시하는 것으로, 특히 양호한 결과를 얻을 수 있다.
【0024】
얻을 수 있는 초산 펩신 처리물의 형태에는, 아피오스 유래의 펩신 분해 펩티드를 주성분으로 한 거의 균일한 용액으로 한 것, 그 후 감압건고 한 것, 혹은 물에 녹여 동결건조 해 분말로 한 것이 있지만, 이것들을 용액인 채, 분말인 채, 혹은 분말을 재용해한 형태로, 각종 가공 소재로서 자유로운 비율로 혼합해 이용할 수 있어 식품, 서플리먼트 혹은 약제등의 제조에 제공할 수 있다.
【발명의 효과】
【0025】
본 발명의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법, 아피오스 유래 펩티드 및 그 제조 방법은 위에서 설명한 바와 같이 구성되기 위해, 아피오스근괴를 효율적 한편 간단하고 쉬운 방법에 의해, 가용화, 분말화 가능한 펩티드 단편 으로 분해할 수 있다.또 본 발명에 의하면, 판매 불가인 규격외 아피오스근괴로부터, ACE 저해 활성을 가지는 강압 펩티드를 간단하고 쉽고 고수율에 꺼내, 고혈압 예방 효과등의 생리 기능을 가지는 소재로서 이것을 의약·식품에 이용할 수 있다.게다가 이것은 탄수화물 함량이 적기 위해(때문에) 설사 유인의 가능성도 저하한다.즉, 지금까지 용도가 없고, 처분되어 있던 규격외 아피오스근괴에 대해서, 그 유효한 처리 대책으로 할 수 있어 또 고도 이용을 도모할 수 있는 것과 동시에, 이것을 높은 산업적 이용가치를 갖춘 생물자원으로 할 수 있다.
【발명을 실시하기 위한 최선의 형태】
【0026】
이하, 본 발명에 대해서, 실시예도 이용해보다 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이하의 설명에 나타난 기술로 한정되는 것은 아니다.
아래와 같이 실시예에서는, 2004년 11월에 고노헤마치 쿠라이시 지역에서 수확된 아피오스근괴의 분말을 이용했다.원료로서는 그 외, 생근괴 혹은 이것을 적당한 크기에 절단 한 것, 보일 한 것, 페이스트, 분말화한 것, 또 그 후 그것들을 냉동한 것 등, 각종 사전 처리 한 아피오스를 사용하는 것이 가능하다.통상, 보존을 위해서 동결된 아피오스근괴나 페이스트는, 유수중에서 해동 후에 출발 원료로서 사용 가능하다.이하, 숙원으로 말하는 아피오스란, 아피오스근괴그 자체, 및 동결물에 대해서는 그 동결을 해제한 것을 포함해 말한다.또, 상기 아피오스의 물처리에 의해 얻은 아피오스 찌꺼기로부터 같은 펩티드 시료를 조제하기 위해서, 이 원료(아피오스 찌꺼기)도 시험에 제공했다.
【0027】
첨가하는 초산으로서는 기본적으로는 3%초산 용액, 혹은 3%정도의 초산 용액을 사용하는 것이 바람직하지만, 이것은 식초 또는 합성식초 어디라도 상관없다.또, 아피오스는, 다른 야채나 고구마류와 비교해 수분이 적고, 불용성의 높은 것이 대부분이다.이 때문에, 지금까지 용액화는 실현되어 있지 않다.또, 분말은 보일 후에 소매치기 망치고 나서 건조시켜 얻기 위해, 아피오스 자체의 성질에 의한 기술면, 코스트면의 쌍방에 대하고 문제가 있었지만, 숙원 발명자는, 각종 초산을 이용해 용액화와 그 후의 처리에 의한 분말화를 시도한 것이다.
【0028】
그 결과, 양조식초, 합성식초, 또는 린고식초등의 각종 식초중에서 가온해, 펩신 처리시키는 것으로, 용이하게 용액화하는 것이 가능해져, 게다가, 그 후의 동결건조등의 처리에 의해서, 용이하게 분말화하는 일도 가능해졌다.또, 처리량이 많은 경우에는 이 제조 공정을 대형화하는 것에 의해서, 효율적으로, 낭비 없고, 정도 좋게, 게다가 안정적으로 아피오스의 용액이나 분말의 제조가 가능하게 되었다.
【0029】
출발 원료로서 아피오스 분말을 사용하는 경우는, 예를 들어 다음과 같은 방법에 따라 본 발명의 아피오스 초산·효소 처리물을 얻을 수 있다.즉, 아피오스 분말 5 g를 0.5 M초산 50 mL에 가세해 37℃으로 5분간 가온해, 그 다음에 소화 효소로서 펩신을, 전체 중량의 1%가 되도록(듯이) 더해 37℃으로 24시간 반응시킨다.그 후, 10000 rpm로 30분간의 원심분리를 실시해, 얻을 수 있는 상청에 10분간의 자비 처리를 가한다.이와 같이 해 얻을 수 있는 초산 용액을 감압건고 해, 한층 더 물에 용해 후, 동결건조 하는 것으로써, 백색의 아피오스 초산 펩신 처리 분말을 얻을 수 있다.
【0030】
제조한 아피오스 초산 펩신 처리물의 유용성을 확인하기 위해(때문에), 첨가 펩신량을 바꾸어 상기 방법에 의해 처리물의 제조를 실시해, 얻을 수 있던 4 종류의 처리 분말에 대해서, 혈압 강하 작용의 지표인 ACE 저해 활성 시험을 실시했다.첨가 펩신량은, 0.1%, 1%, 10%, 및 0%(물추출)로 했다.표 1에는, 각종 처리 방법에 따르는 수율, 당함량(중성당, 산성당), 단백질 함량, 아미노산 함량, 및 ACE 저해 활성(IC₅₀값)을 나타낸다.
【0031】
【표 1】



【0032】
그 결과, 가장 저해 활성이 강한 1%펩신 첨가의 처리물에서는, IC₅₀값(원의 효소 활성을 50%저해하기 위해서 필요한 농도로, 수치가 작을 정도 저해 활성이 강한 것을 나타낸다)은 1.3mg/mL이며, 높은 활성을 얻을 수 있었다.이것은, 다른 소화 효소(예.트리프신, 키모트리프신, 서모라이신등)을 이용한 처리 분말과 거의 동등의 결과를 나타냈다.그러나 소화 효소로서의 취급·처리 조작이 간단하고 쉬운 것으로부터, 본 발명의 초산 펩신 처리에 의한 제조법의 유용성이 분명해졌다.
【0033】
또, 얻을 수 있던 본 발명 처리물의 강압 효과를 확인하기 위해서, 자연 발증 고혈압 래트(SHR)에게 아피오스의 1%펩신 처리물을 체중 1 kg 당 200 mg경구투여해, 그 후의 혈압의 변화를 거쳐 때적으로 측정했다.
그림 1은, 본 발명과 관련되는 아피오스의 초산 펩신 처리물(아피오스·펩신 처리)을, SHR에 대해서 경구투여했을 때의 수축기 혈압의 변화를, 투여전 혈압에 대한 변화율에서 나타내 보인 그래프이다.본측정에서는 비교예로서 물, 양성 대조약인 리지노프릴, 아피오스의 물추출 찌꺼기(아피오스 찌꺼기)를 이용했다.
【0034】
그 결과, 물을 투여한 SHR의 혈압은 2시간의 사이에 변동을 보지 못하고, 리지노프릴(50 mg/kg)을 투여한 SHR에서는, 투여 0.5시간 후에 혈압이 약 20%저하해, 2시간 뒤에까지 낮은 상태가 유지되었다.한편, 아피오스를 이용했을 경우여도, 200 mg/kg의 아피오스 찌꺼기를 단순하게 투여한 SHR에서는, 물투여와 같게 혈압의 변동은 볼 수 없었다.그러나, 본 발명의 아피오스 초산 펩신 처리물을 투여한 SHR에서는, 투여 후 0.5~1시간의 사이에 혈압이 약 20%저하해, 2시간 후에는 약 10%의 저하를 나타냈다.즉, 찌꺼기 자체의 단순 사용에서는 혈압 강하 작용이 완전히 인정받지 못한 아피오스에 대해서, 초산 첨가 처리 및 펩신 처리를 가한다고 하는 본 발명을 적용하는 것에 의해서, 강압 효과를 가지는 처리물(펩티드)을 얻을 수 있는 것이 분명해졌다.
【0035】
다음에, 이 초산 펩신 처리 분말에 강압 성분이 물질로서 포함되어 있는 것을 확인하기 위해서, Sep－Pak C₁₈에 의한 결점 분획을 실시해, 물아세트니트릴(CH₃CN)의 용매를 이용해 CH₃CN를 0%, 20%, 40%과 단계적으로 증가시켜 용출을 실시해, 이것들을 감압건고 하고, 동결건조 처리했다.얻을 수 있던 각 백색 분말에 대해서, 혈압 강하 작용의 지표인 ACE 저해 활성 측정 시험을 실시했다.표 2에는, Sep－Pak C₁₈결점 분획화 분의 수량, 당함량(중성당, 산성당), 아미노산 함량, 단백질 함량 및 ACE 저해 활성(IC₅₀값)을 나타낸다.
【0036】
【표 2】



【0037】
그 결과, 저해 활성은 40%CH₃CN화분이 가장 강했다.또, 20%CH₃CN화분도, 40%CH₃CN화분정은 아니기는 하지만 강한 저해 활성을 나타내, 한층 더 수율도 높았다.이러한 화 분은, 가장 아미노산 및 단백질 함유량이 많아, 반대로 당함량은 원래의 1%펩신 처리물의 반이하에 감소했다.이것으로부터 이러한 화 분이, ACE 저해 펩티드를 포함한 펩티드화분인 것이 나타났다.
【0038】
ACE 저해 활성이 강한 Sep－Pak C₁₈ 20%CH₃CN용출화분을, 역상 HPLC(ODS120T, 4.6×250 mm, 동쪽 소사)를 이용해 분리·정제 했다.
그림 2는, 이 ACE 저해 활성이 강한 용출화분에 대한 역상 HPLC 크로마토 그램(A), 및 저해율(B)을 나타내는 그래프이다.이다.그림중(A)에 나타나도록(듯이), 220 nm에 흡수를 나타내는 피크가, 용출시간 20분 ~50 분의 사이에 얻을 수 있었다.분석 개시시부터 1분 마다 분취 해, 분말로서 얻을 수 있던 합계 60화 분의 ACE 저해 활성을 조사했는데, 피크 29, 33, 37, 41의 4화분에는 50~70%의 ACE 저해 활성이, 또 피크 50의 화 분에는 90%의 ACE 저해 활성이 있었다.
【0039】
거기서, 피크 50을 한층 더 분리·정제 한 결과, Fr.1 및 Fr.2의 ACE 저해화분을 얻었다.이 Fr.1 및 Fr.2에 포함되어 있는 펩티드에 대해서, Protein Sequencer(PPSQ－10, 시마즈 제작소, 기상 에도 맨 분해법)를 이용해 아미노산 배열의 결정을 실시했다.그 결과, Fr.1에는, Tyr－Arg－Leu－Pro－Asn－Leu라고 하는 아미노산 배열이 확인되어 또 Fr.2에는, Tyr－Gln－Leu－Pro라고 하는 배열이 확인되었지만, 이 그 밖에도 몇개의 아미노산 배열을 가지는 것이 포함되어 있었다.
【0040】
본 발명에 의해 얻을 수 있는 아피오스의 초산 펩신 처리물은, 상술한 아미노산 배열로부터 되는 펩티드를 포함해, 이러한 펩티드는, 혈압 강하 작용을 가지고 있어 생활 습관병의 하나인 고혈압을 예방하는 등의 유용성을 갖춘 것이었다.또, 아피오스 자체를 그대로 사용하는 경우와 비교해 당함량이 적고, 설사를 유발할 가능성도 낮은 것이었다.게다가 안전하고, 한편 액상 및 분말 등 식품에도 이용하기 쉬운 형태의 소재 제공이 가능해졌다.
【실시예】
【0041】
＜실시예 1＞
아피오스 분말을 사용하고, 상술의 방법에 의해 아피오스 초산 펩신 처리 분말을 얻었다.즉, 분말 5 g를 0.5 M초산 50 mL에 가세해 37℃으로 5분간 가온해, 펩신을 1%가 되도록(듯이) 더해 37℃으로 24시간 반응시켰다.그 후, 10000 rpm로 30분간의 원심분리 후, 상청에 10분간의 자비 처리를 실시해, 초산 용액을 감압건고 해, 물에 용해 후, 동결건조에 의해 백색의 아피오스 초산 펩신 처리 분말을 얻었다.
【0042】
＜실시예 2＞
실시예 1으로 얻은 아피오스 초산 펩신 처리 분말을, 소맥분, 곁 가루, 멥쌀 쌀가루와 각각 조정 작업이라고 각종 과자 원료로 해, 구이 과자를 얻었다.그 결과, 일본과 서양을 묻지 않는 각종 구이 과자의 원료로서 사용 가능하다라고 하는 것이 실증되었다.아피오스 초산 펩신 처리 분말은 이러한 원료와 모든 비율로 혼합 가능하다.
【0043】
＜실시예 3＞
실시예 1으로 얻은 아피오스 초산 펩신 처리 분말을, 곁, 우동, 파스타나 라면의 면원료에 각각 첨가해, 각종면을 제조했다.그 결과, 본아피오스 초산 펩신 처리 분말은, 이러한 면류에도 사용 가능하다라고 하는 것이 실증되었다.이 경우도, 아피오스 초산 펩신 처리 분말은 사용하는 원료와 모든 비율로 혼합 가능하고, 조정이 가능하다.
【0044】
＜실시예 4＞
실시예 1으로 얻은 아피오스 초산 펩신 처리 분말을 물, 린고식초나 과실식초등에서 용해했다.그 결과, 혈압 강하 펩티드를 풍부하게 함유 하는 것과 동시에 아미노산 스코아의 비싼 음료를, 간단하게 제조 가능하다라고 하는 것이 실증되었다.본음료는 건강에 자주(잘), 게다가 보존성의 높은 조미 음료이다.또 본음료는, 펩티드가 주성분이기 위해, 소화 흡수력이 저하한 고령자나 병약의 소비자에게도 유익한 식품 소재이다.
【0045】
＜실시예 5＞
아피오스 초산 펩신 처리 분말을 서플리먼트에 가공했다.아피오스 초산 펩신 처리 분말을 포트 밀등으로 미분말화해, 이것에 당류등의 첨가제(부형제)를 적당히 더해 균일하게 충분히 혼합했다.이것을 타정기에 제공해, 타정·성형하는 것에 의해서 아피오스 초산 펩신 처리 분말을 주성분으로 하는 정제를 제조할 수 있었다.정제는, 당의코팅등에 의해, 단맛이나 광택을 더할 수 있었다.
【0046】
아피오스 초산 펩신 처리 분말의 혼합물에 적당히 수분을 더해 혼합해, 밀어내기 조립기로 pellet에 조립해, 게다가 마르메라이자등에서 구상에 정형하는 것에 의해서, 아피오스 초산 펩신 처리 과립을 제조할 수 있었다.또, 아피오스 초산 펩신 처리 분말 단독 혹은 첨가제와 균일하고 충분히 혼합한 것을, 건조 상태로 캅셀 충전하는 것으로써, 아피오스카프셀을 제조할 수 있었다.
【0047】
이것들 서플리먼트는, 크기를 바꿀 수 있는 것과 동시에, 첨가제의 종류나 양을 바꾸는 것에 의해서 아피오스 초산 펩신 처리 분말의 함유량이나 서플리먼트의 맛, 섭취시의 먹을 때의 느낌등을 조절할 수 있다.이러한 아피오스 초산 펩신 처리 분말 서플리먼트는, 아피오스 유래의 강압 펩티드 및 아미노산등을 나중에에서도 보충 가능한 제품으로 할 수 있는 것이 특징이다.
【산업상의 이용 가능성】
【0048】
본 발명의 아피오스의 초산·효소 처리물 제조 방법, 아피오스 유래 펩티드 및 그 제조 방법에 의하면, 아피오스를 효율적 한편 간단하고 쉬운 방법에 의해, 가용화, 분말화 가능한 펩티드 단편 으로 분해할 수 있어 처리 방법으로 문제가 있던 규격외 아피오스근괴로부터도 ACE 저해 활성을 가지는 강압 펩티드를 간단하고 쉽고 고수율에 꺼낼 수 있어 고혈압 예방 효과등의 생리 기능을 가지는 소재로서 의약·식품에 이용할 수 있다.이와 같이, 아직도 이용도의 낮은 아피오스를 높은 산업적 이용가치를 갖춘 생물자원에 변모시킬 수 있기 위해, 관련하는 각 산업에 대해 이용가치가 높은 발명이다.
【도면의 간단한 설명】
【0049】
【그림 1】본 발명 제조 방법 실시예에 의해 얻을 수 있던 아피오스 초산 펩신 처리물 및 비교예에 대해서, 자연 발증 고혈압 래트에게 경구투여했을 때의 래트 혈압(수축기)의 투여전 혈압에 대한 변화율을 나타내는 그래프이다.
【그림 2】본 발명 제조 방법 실시예에 의해 얻을 수 있던 아피오스 초산 펩신 처리물의, ACE 저해 활성이 강한 용출화분에 대한 역상 HPLC 크로마토 그램(A), 및 저해율(B)을 나타내는 그래프이다.

【출원인】	【식별 번호】591005453 【이름 또는 명칭】아오모리현
【출원일】	헤세이 18년 6월 6일(2006.6.6)
【대리인】	【식별 번호】100119264 【변리사】 【이름 또는 명칭】토미자와 지성
【공개 번호】	특개 2007－326790(P2007－326790 A)
【공개일】	헤세이 19년 12월 20일(2007.12.20)
【출원 번호】	특원 2006－156976(P2006－156976