|
출처: 김천대학 임상병리과 청솔동문회 원문보기 글쓴이: 삼거리베짱이(93)
체액검사( Body Fluid Examination )
1. 검체접수
(1) 병동 및 외래접수, 응급실로부터 검체를 접수한다.
(2) Worksheet에 검체의 lab. No. 및 이름 등을 기록한다.
(3) 응고된 검체는 소견참조에 응고된 검체로 넣고 백혈구 감별계산만 해준다.
(4) Pus인 경우도 소견참조로 가서 pus로 기록하고 감별계산만 해준다.
(5) 모든 CSF 검체는 유핵세포 감별계산까지 응급으로 처리한다.
2 검체분석
(3) RBC는 10,000/ul 이상이 나오면 더 이상 희석하여 계산하지 않고 10,000/ul 이상으로 확인 한다.
(4) WBC가 10/ul 이하인 검체는 감별계산을 하지 않고 확인하며 그 이상인 경우는cytocentrifuge
를 이용한 도말표본을 만들어 감별계산한다.
일반혈액검사( Complete Blood Count )
1. 임상적 의의
혈액의 각종 세포들의 혈구 수를 측정하여 어떤 질병의 진단을 위한 기본적인 자료를 제공하는 screening test이다.
2. 검체 채취 용기
실온에서 보관한 K3 EDTA(liquid)나 Na2 EDTA(solid)가 들어 있는 용기에 전혈을 취하여 24 시간 내에 검사한다.
3. 검체 적합성 판정 기준
1) 3㎖의 EDTA 용기에는 최소한 2㎖의 전혈이 필요하다.
2) 조금이라도 응고된 검체는 적합하지 않다.
☞ 말초혈액 도말표본을 제작하여 확인해야 하는 경우☜
① HgB : < 7.0 g/dl
② MCV : < 70, > 105
③ WBC : < 2000, >15,000 /ul
④ Lymphocyte가 50% 이상일 경우나 Eosinophil 10%, Monocyte가 14% 이상인 경우 혹은
Basophil 이 3% 이상인 경우
⑤ R flag, blast, Imm Grans band 2, variant lymph, review slide, platelet clumps, RBC
agglutination, nRBC 등의 suspect flagging이 보이는 경우 등
⑥ Differential count의 histogram이 정확하지 않은 경우
⑦ PLT histogram이 큰 size로 분포되어 있으면 giant platelet이 보일 수 있으므로 도말표
본을 제작하여 확인한 다음 현미경적 소견도 함께 보고한다.
⑧ RBC histogram이 작은 크기에 분포되어 있으면 microcyte or fragmented RBC가 보일
수 있으므로 반드시 현미경적 관찰을 한 후에 보고하고 결과에는 platelet count에 영향
을 줄 수 있다는 기록을 함께 보고한다.
4 즉시 보고해야 되는 검사의 한계 (Panic Value)
1) WBC : < 2000 /ul or > 200,000 /ul
2) RBC : < 2,000,000 /ul or > 8,000,000 /ul
3) Hgb : < 7.0 g/dl or > 18.0 g/dl
4) PLT : < 20,000 /ul or > 1,000,000 /ul
Manual WBC Differential Count & PB Morphology
1. 검사원리 :
말초 혈액도말 표본을 염색하면 현미경하에서 혈액세포 감별이 가능하다. 백혈구 감별
계산은 백혈구 세포들의 상대적인 분포도를 알기 위하여 일정 숫자의(100 or 200) 백혈구만을
관찰하면서 종류별로 계산한다. 말초혈액의 형태 관찰은 적혈구, 백혈구, 혈소판을 포함한 전혈구
숫자의 증감 및 형태를 관찰하는데 혈구 이외에도 말초 혈액 내에 출현할 수 있는 구조물 및
microorganism의 관찰도 가능하다.
2. 검체준비
1) 대부분 정맥혈과 모세관 혈액을 사용한다.
2) 모세관 혈액 : 항응고제를 사용하지 않은 혈액으로 주로 신생아들에게 사용한다.
(거의 사용 안 함)
3) EDTA blood
: 응고방지, 혈소판의 응집을 막아주는데 좋으며 비교적 혈구 세포의 형태 변화를 주지 않는다.
4) 주의 : 혈액이 들어 있는 시험관에 응고가 형성되었나를 점검하고 항응고제에 의한 부산물을
방지하기 위하여 1 시간 이내에 도말 하여야 한다.
5) Unusual slides는 file box에 보관한다.
3. 검체 부적합성 판정기준
1) 검체는 24 시간 이내의 것이어야 하며 응고된 검체는 부적당하다.
2) 염색된 슬라이드가 청색이거나 혹은 적색 또는 너무 두껍거나 얇은 경우 부적당하다.
4. 도말표본 제작법
* Criteria for the PB smear
① Hb(g/dl) < 7.0
② MCV(fl) < 70 or > 105
③ WBC(/ul) < 3,000 or > 15.000
④ Lymphocyte > 50%, monocyte > 14%, eosinophil > 10%, Basophil > 3%
⑤ "N" flag와 +++ 가 보이는 경우
⑥ Histogram이 비정상일 때(giant platelet, peudomacro/microcytosis)
⑦ Diff count가 ----로 안나오는 경우
⑧ 다음과 같은 suspect flagging이 있는 경우
(Blasts, IG, varient lymphs, review slide, nRBCs, RBC agglutination, SR,
platelet clumps)
5. 참고치
1) Band neutrphil : 2 ∼ 6%
2) Segmented neutrophil : 50 ∼ 75%
3) Lymphocyte : 20 ∼ 44%
4) Monocyte : 2 ∼ 9%
5) Eosiniphil : 1 ∼ 5%
6) Basophil : 0 ∼ 2%
6. 검사결과의 임상적 의의
1) WBC differential count
Neutrophilia : 감염, 독성, 자극, 괴사, 출혈, 용혈, 혈액학적 관찰, 고형암
Neutropenia : myeloid hypoplasia, infective granulocytosis, decreased survival, pseudoneutropenia.
Eosinophilia : allergy, 피부질환, 기생충 감염.
Basophilia : allergy, CML, PV, acute basophilic leukemia, myeloid metaplasia.
Monocytosis : 감염후 회복기, subacute bacterial endocarditis, 혈액 질환 및 일부 악성종양.
2) 형태관찰
(1) WBC (백혈구)
① 다분엽 호중구(거대적 아구성 빈혈 의심시) : 호중구의 분엽이 6개 이상 분절된 경우, 악성
빈혈 또는 선천성 질환시(엽산, 비타민 B12의 결핍시)
② 독성과립(toxic granulation) : 과립이 진해지고 또한 커지며 세포질 내에도 소공포가 있다.
심한 감염증 (폐렴, 폐혈증)
③ Dohle body : 세포질 내에 호염성의 직경 2um 정도의 청색으로 염색되는 소체이다.
심한 감염증
④ 소공포(vacuolation) : 단구나 형질세포에는 정상 세포에도 소공포가 있을 수도 있다.
이 외의 세포에 소공포가 있으면 비정상이다. 보통 진행성 근이양증일때 볼 수 있다.
⑤ Auer body : 세포질 내에 적색 자색 소체며 주로 급성 백혈병일때 골수구 계통을 진단할 수 있는 가치가 있다.
⑥ 비정형 림프구 : 전염성 단핵구성때 나타나는 비정상 림프구로써 Downey cell - I, II, Ⅲ형으로 구분
⑦ Alder 이상 혹은 Reilly body : 호중구 세포질내에 굵고 진한, azurophilic granule이 있는 것,
Hurler's syndrome, genetic mucopolysaccharidosis
⑧ Pelger-Huet 이상 : 유전적으로나 후천성으로 neutrophil의 핵이 hypolobation으로 나온다.
⑨ Intracytoplasmic organisms : pathogenic bacteria, fungi(histoplasmosis, candidiasis)
(2) RBC 적혈구
① Microcytosis : 철결핍성 빈혈
② Macrocytosis : B12 or folate 결핍, 간질환, MDS
③ Anisocytosis : 빈혈의 감별진단에 중요
④ Poikilocytosis : 심한 용혈성 빈혈, 만성실혈성 빈혈, 악성빈혈 ,수혈
⑤ Spherocytosis : 선천성 구상 적혈구증
⑥ Target cell : thalassemia, hemoglobinopathies, chronic liver disease
status post splenectomy
⑦ Elliptocytosis : 철 결핍성 빈혈, 선천성 질환
⑧ Burr cell : 요독증, 위암, 위궤양
⑨ Tear-drop cell : myeloproliferative disorders
⑩ 봉입체 이상 구조물
* Basophilic stippling (호염기성 반점)
: 납, 아연, 수은, 비스무스 중독, 중금속중독, 악성빈혈, 백혈병등.
* Cabot ring : 악성 빈혈
* Heinz body : 용혈성 빈혈, phenylhydrazine, nitrobenzol, aniline 중독
* Howell-Jolly body : status post splenectomy, megaloblastic anemia 등
* Malaria, babesiosis
Erythrocyte Sedimentation Rate(ESR:적혈구 침강속도)
1. 검사원리 :
항응고제가 포함된 전혈을 수직으로 세우면 적혈구의 rouleaux 형성(초기 10 분), 일정
속도 침강(40분), RBC packing(10분)의 과정을 거쳐 혈장으로부터 적혈구가 밑으로 가라앉는다.
1 시간 후 맨 위 눈금에서 적혈구가 침강한 곳까지의 길이를 mm로 표시한 것이다.
2. 검체 채취 : 항응고제(EDTA)가 포함된 용기에 용혈 없이 채혈한다.
3. 검체 부적합 기준
1) 최소량 2ml 이하인 검체
2) 응고된 검체
3) 2 시간, 4℃에 6 시간이상 실온에 방치된 검체
4. 결과계산 및 보고방법 : 1시간 후 읽혀진 눈금 mm수를 그대로 보고한다.
5. 참고치
1) 남 자 : 0∼9 mm
2) 여 자 : 0∼20 mm
6. 임상적 의의
1) ESR이 증가하는 경우 : 염증, 조직손상으로 인한 α-2, β, γ글로불린, 섬유소의 증가를 의미한다.
(1) 감염 : 대부분의 세균성 감염, 간염, 결핵, 2차 매독, 렙토스피라증, 전신성 진균증 등
(2) 혈액질환 또는 종양 : 심한 빈혈, 백혈병, 림프종, 전이암, 만성육아종성 질환, 다발성 골수종, Cooms test 양성, 용혈성 빈혈
(3) 위장관 질환 : 궤양성 대장염, 국한성 회장염, 급성췌장염, 담낭염, 복막염
(4) 교원병 : 류마치양 관절염, 전신성 홍반성 낭창, 피부진균증, 경피증, 혈관염
(5) 신장질환 : 사구체 신염, 신증, 신우 신염, 용혈, 요독증후군
(6) 기타 : 갑상선기능 저하증, 갑상선염, 유육종(sarcoidosis), 수술 후, 화상, 약제과민반응, 만성 간질환, 한냉글로브린증, 거대
글로브린증, 심근경색증, 임신, 월경
2) ESR이 감소하는 경우 : 적혈구 증다증, 진성다혈구증, 구상적혈구혈증, 겸상적혈구빈혈, 미만성
혈관내 응고( DIC ), 악액질( Cachexia )
3) 전염성 단핵구증이나 국소적인 감염, 양성 신생물시는 ESR이 정상이다.
망상 적혈구 계산 (Reticulocyte Count)
1. 검사원리 :
망상 적혈구는 미성숙한 무핵의 적혈구로서 세포내에 헤모글로빈 합성에 필요한
리보좀과 미토콘드리아를 가지고 있다. 혈액을 new methylene blue와 같은 초생체 염색시약으로
염색을 하면 망상 적혈구내 잔여의 호염기성 RNA가 망상물(reticulum)이나 과립으로 응집하여
진한 청색의 봉입체를 형성하므로 이를 현미경으로 관찰하거나 기기로 측정한다.
2. 검체 채취 용기 : EDTA 튜브
실온에는 6 시간, 냉장에는 24 시간 이상 방치된 검체나 응고된 검체, 미세한 응고가 있는 검체는 적당하지 않다.
4. 결과 계산 및 보고 방법
: 적혈구 1000개당 망상 적혈구 수를 세어 %로 보고한다.
5. 참고치
1) 성인 남자 : 0.5 ∼ 1.5%
2) 성인 여자 : 0.5 ∼ 2.5%,
3) 신생아( 생후 2주 ) : 2.0 ∼ 6.0%
6. 검사 결과의 임상적 의의
1) 골수의 적혈구 생성을 알아보는 효과적인 방법
2) 빈혈의 병태생리별 분류
3) 감소 : 재생불량성 빈혈, 악성 빈혈, 골수 무형성증, 백혈병, 감염, 방사선이나 어떤 약물로 인한 골수 장애
증가 : 용혈성 빈혈, 급성 실혈, 치료중인 결핍성 빈혈 환자, thalassemia, sideroblastic anemia
Manual Platelet Count(혈소판 수 계산)
1. 검사원리 :
전혈을 brilliant cresyl blue가 함유되어 있는 Rees와 Ecker용액으로 희석하면 혈소판은
연한 청색으로 나타난다. 혈구 계산판(hemocytometer)을 사용하여 혈소판 수를 센다.
2. 검체조건 및 준비
1) 검체의 종류 : 전혈(모세혈관도 가능)
2) 검체채취용기 :
(1) 1회용 플라스틱 주사기 또는 siliconized vacutainer로 채취
(2) 모세혈관 검체는 micro-collection EDTA(상품명:Microtainer) tube
* 찌른 자리에서 혈소판이 소실되므로 혈소판 수 계산은 처음에 하는 것이 중요.
3) 항응고제 : 항응고제는 EDTA(K2 EDTA 나 K3 EDTA)가 가장 좋다.
(혈소판 응집을 최소화하고, 채혈 후 1-3시간 사이에 혈소판의 크기가 일정하다.)
4) 운반 시 주의점 : 뚜껑이 열리지 않도록 주의한다.
5) 검체처리법 :
6) 보관방법 : platelet 검사만을 위하여는 실온에서 서서히 rotating하는 것이 좋으나 다른 혈구의 보존등의 이유로 24시간 동안 냉장보관
가능.
* 전혈을 사용하며 항응고제는 EDTA가 가장 좋고 채혈 후 1∼3 시간 사이의 혈소판 크기가 일정하므로 적당하다.
* 조금이라도 응고된 검체는 적합하지 않음(혈소판 응집으로 인해 실제 혈소판 수보다 적게 측정된다)
* 3㎖의 EDTA용기에는 최소한 2㎖의 전혈이 필요함
* micro-collection vial에는 최소한 200㎕의 전혈이 들어감
3. 검체 부적합성 판정 기준
1) 5 시간 이내의 검사해야하고 냉장 보관되었던 검체는 24 시간 이내에 검사한다.
2) 응고된 검체는 적당하지 않다.
4. 계산 결과 및 보고 방법
1) ㎕ 당 몇 개로 보고한다.
2) 위에서 센 수를 N 이라 하면, N / 2× 10 × 200 = N × 1,000
5 참고치 : 150,000∼400,000 /㎕
6. 검사 결과의 임상적 의의
1) 증가
(1) 일차적 증가 - 골수 증식성 질환(원발성 혈소판 증가증, 진선 다혈증, 만성과립구성 백혈병)
(2) 이차적 증가 - 급성 출혈 후, 운동 후, 임신이나 월경 중, adrenalin 주사 후, 감염증, 전이 암, 비장절제,stress(수술 후)
2) 감소
(1) 골수에서의 생성 저하 : 재생 불량성 빈혈, 방사성 노출
(2) 골수의 악성 침윤 : 백혈병, 암의 전이
(3) 골수 섬유증 : 다발성 골수종, 거대 적아구성 빈혈
(4) 선천성 혈소판 이상 : Bernard-Soulier 증후군, 면역 결핍증, Wiskott-Aldrich 증후군
(5) 자가면역 항체 : 특발성 혈소판 감소성 자반증(ITP), Evans 증후군
(6) 항원 항체 복합체 : 전신성 홍반성 낭창(SLE), 악성 림프종, 만성림프구성 백혈병
(7) 미만성 혈관 내 응고(DIC), 패혈증, 심한 출혈, 약물, 비장 기능 항진
3) 혈소판의 파괴 증가
(1) 면역학적
① 자가면역항체 ; 특발성 혈소판 감소성 자반증(ITP), Evans증후군
② 항원 항체 복합체 ; 전신성 홍반성 낭창(SLE), 악성 림프종, 만성 림프구성 백혈병
(2) 미만성 혈관 내 응고(DIC), 패혈증, 심한 출혈, 약물, 비장기능 항진(비종대)
체액검사(Routine Body Fluid Examination)
1. 검사원리 ː
체액을 적혈구 용혈제(lysing agent)가 들어있는 등장액으로 희석하여 Neubauer 혈구
계산판에서 총 백혈구 수를 센 후 세포원침이나 도말을 만들어 염색한 후 PMN cell, MN cell
및 eosinophil, other cell 등을 구별하여 감별계산한다.
2. 검체 채취와 운반 및 보관
1) 검체종류 : 활액(synovial fluid), 복수(ascitic fluid), 흉막액(pleural fluid), 뇌척수액(spinal fluid),
복막액(peritoneal fluid), EVD site etc..
2) 용 기 : EDTA가 들어있는 일반혈액 용기나 plain screw cap 튜브
3) 운반 및 보관
① 운반 시 뚜껑이 열리지 않도록 주의한다.
② 처리 전에 보관 방법 ; 실온보관
③ 뇌척수액 ; 즉시 처리할 수 없을 때는 22% 우혈청 알부민을 1방울 떨어뜨려 실온에서 보관한다.
④ 병실에서 검체를 보내달라는 요구가 없으면 검사실에서 1주일 냉장보관을 한 체액검사물을 버린다.
⑤ 결정을 보기 위한 체액검사
- 냉장고에서 한 달간 보관
- "양성"과 "음성"표지를 붙인 용기에 분리하여 보관
3. 검사결과의 임상적의의
1) 림프구가 증가할 경우는 결핵, 종양, 림프종, 류마치양 관절염 등을 의심할 수 있다.
2) 호산구가 증가할 경우는 기생충 감염이나 과민성 반응 상태, 흉부 외상, 출혈등
3) 대식구는 단구에서 유래하며 탐식작용을 한다.
4) 악성종양의 전이 혹은 침윤 여부에 도움을 준다.
5) 활액내에서의 결정이 보이면 관절염 및 기타 관절질환의 감별진단에 도움을 준다.
6) 뇌척수액의 관찰은 뇌출혈시 진단 및 출혈시간 추정이 가능하다.
1. 검사원리:
대부분의 사람 혈색소는 강알칼리에 변성을 일으킨다. 검사에서는 포함된 ammonium
sulfate를 넣어 변성을 중지시키고, 변성된 혈색소를 침전시킨다.
신생아의 혈액이 포함된 구토물이나 대변 또는 위액에서 hemoglobin F의 유무를 가려내
는데 이용한다. 즉 hemoglobin A를 함유한 엄마의 혈액이 20 % sodium hydroxide와 만
나면 pink에서 yellow-brown색으로 변하지만 Hemoglobin F를 함유한 혈액은 color가
변하지 않은 pink color 그대로이다.
2. 검체 채취방법 : 혈액이 함유된 신생아의 구토물이나 대변을 이용한다. 검체를 즉시 검사할 수
없을 경우에는 냉장고에 보관한다.
3. 결과보고방법
1) 검체에 혈액이 함유되어있지 않으면 검체로서 부적합하므로 우선 strip을 사용하여 Hb을 검사
하고 음성인 경우는 결과를 occult blood negative로 기록한다.
2) NaOH를 넣었을 때
(1) pink → yellow(color change로 보고 = maternal origin)
(2) pink → pink(no clolor change로 보고 = neonate origin)
4. 임상적 의의 : 생후 2 - 3일 후 아기에게서 채취된 구토물이나 대변에 혈액의 함유가 발견될
때 그 원인이 아기의 장출혈 때문인지 아니면 수유도중 엄마의 찢어진 유두에서 나온 blood를 삼
킨 것인지를 구분해주는데 그 의의가 있다.
1. 검사원리 :
성인의 혈색소인 HbA는 산성하에서 적혈구로부터 용출된다. 그러나 태아의 혈색소인
HbF는 산성하에서 적혈구로부터 용출되지 않는다. 적혈구를 산성하에서 용출 시킨 후 eosin으
로 염색하면, 성인의 적혈구는 혈색소가 용출되어 ghost form으로 보이고, 태아의 적혈구는 HbF
의 함량에 따라 연한 분홍빛에서 진한 적색까지 염색된다.
2. 검체 채취 용기
1) 양수 : 3㎖ 이상, 육안으로 bloody한 경우는 1㎖ 이상
2) EDTA 전혈 : 1㎖ 이상
3. 결과 해석
1) 전체 RBC중 fetal RBC의 백분율을 구하여 보고한다.
2) 전혈 1㎖내의 fetomaternal hemorrhage의 부피계산은 fetal RBC % × 50이다.
3) 2세 이후에서는 2%이하가 정상이다.
4) 4개월에서는 10% 미만이다.
5) cord blood에서는 65 ∼ 90%이다.
4. 임상적 의의
1) fetomaternal hemorrhage의 확인.
2) beta-thalassemia minor의 hereditary persistence of hemoglobin F와의 감별.
3) amniotic fluid에서 적혈구 확인.
4) 다른 종류의 양수검사 결과해석에 도움을 준다.
5) 2 ∼ 5% ; hereditary spherocytosis/ hypoplastic anemia/ pernicious anemia
carcinoma/ acute & chronic leukemia/ myelophthisic anemia
6) 10%이상 ; heritary acquired aplastic anemia(children)
7) 30%이상 ; chronic myelogenous lekemia juvenile form
8) thalassemia환자의 50%가 2-5%이고, homozygous thalassemia는 15-100%에 이른다.
1. 검사원리
1) 조건
① Antibody인 LE factor가 있어야 한다.
② 핵 단백(nuclear protein) source 가 있어야 한다.
즉 외상입은 백혈구(traumazing cell)로부터 핵단백을 얻는다.
③ 백혈구의 탐식능력이 있어야 한다.
2) 원리
전신성 루푸스 홍반증 환자의 혈액을 인위적으로 파괴시키면, 이 환자의 혈청내에
존재하는 항핵단백 항체가 파괴된 핵막과 반응하여 비정형의 균일된 물질을 만든다.
이 물질을 LE소체라하고, 이 소체를 탐식한 호중구를 LE세포라 한다. 참고로 단핵
구가 탐식하여 pyknotic material을 세포질내에 갖고있는 경우를 tart세포라 부르며
LE세포와의 감별이 필요하다.
2. Sample
1) 검체의 종류 ; 전혈
2) 검체 채취용기 ; 삼각플라스틱
3) 항응고제 ; 없음
4) 운반 시 주의점 ; 응고되지 않게 계속 흔든다.
5) 검체 처리법
4. 결과
1) Tart cell, 즉 monocyte나 조직구가 원형질내에 L.E소체를 함유한 것으로 보이는 것은 L.E CELL과 구별되어야 한다.
2) 관절염, 간염, 결핵 등에서 위양성일 수 있다
3) 다음의 경우는 위음성으로 나온다.
① heparin이 지나칠 때
② 부신피질 호르몬이나 corticorsteroid의 투여시
③ 보체의 양이 부적당한 경우
4) 호중구의 핵은 periphery에서 관찰되며 LE소체는 붉은색으로 보인다.