[편입반]베네딕트시약과 펠링시약의 차이점

*문서제목 베네딕트시약 (Benedict's reagent) URL http://100.empas.com/entry.html/?i=74135 당뇨 검출에 사용하는 시약. 미국의 의사 A.L.베네딕트가 만들었다. 결정(結晶) 시트르산나트륨 173g, 탄산나트륨무수물 90g을 물 800mℓ에 가온 용해하여 냉각 후 여기에 결정 황산구리 17.3g을 물 100mℓ에 녹인 액을 가하고 물을 채워 1ℓ로 한 것이다. 이 시약 5mℓ에 요(尿) 8방울을 가하여 바로 불꽃 위에 얹어 2분 간 가열하면 요중(尿中)의 당량에 따라 여러 색으로 변한다. 원리는 포도당이 알칼리성으로 황산구리를 환원시켜 산화구리의 적색 ·자주색 ·녹색 등 당량에 따른 빛깔의 침전이 생기는데 근거하지만, 이 방법은 특히 탄산나트륨을 사용하여 알칼리성은 약하게 해 두었기 때문에 당의 분해가 적고, 요산(尿酸) ·크레아티닌(creatinine) 등의 영향은 없다. 그러나 에스테르형 글루크로나이드 및 n-글루크로나이드는 이 방법에 의해 양성되므로 최종적 검출법으로는 글루코오스산화효소를 사용하는 반응이나 효모에 의한 발효를 사용하여야 한다 *문서제목 펠링 (Fehling, Hermann von, 1812.6.9 ~ 1885.7.2) URL http://100.empas.com/entry.html/?i=181386 독일의 화학자. 국적 : 독일 활동분야 : 화학 출생지 : 독일 뤼베크 뤼베크에서 출생하였다. 처음에는 약학을 지망하여 하이델베르크대학교에서 L.그멜린에게서 배웠다. 뒤에 기센대학교로 옮겨, J.리비히의 제자가 되어 알데히드 중합체, 벤젠술폰산(酸), 히푸르산 등을 연구하였다. 1839년 리비히의 추천으로 슈투트가르트공과대학 교수가 되어 43년간 재직하였다. 1844년 벤조니트릴을 발견, 1848년 당류(糖類)의 시약으로서 펠링 용액을 만들었다. 그 후에는 지방산업의 개발과 공중위생의 증진, 의술약업(醫術藥業)의 신장 등 화학의 응용면에 힘썼다. *문서제목 시약과 염색약 URL http://bongbt.netian.com/dua.htm 시약과 염색약 1. 수단Ⅲ용액(SudanⅢ): 지방 검출용 sudanⅢ의 무수알코올포화액(50ml) + glycerin(50ml) + 지방 ……붉은색 2. 베네딕트 용액(Benedict): 포도당 검출용 식품, 혈액 그리고 뇨에 있는 단당류의 존재를 알아보기 위한 시험용액으로 이용된다. 이 시약을 미지의 물질에 넣고 가열하여 황갈색의 CuO2 가 생성되면 그 곳에 당이 있 다. 이 시험법으로 0.15~0.20%포도당을 검출할 수 있다. 이 용액은 기성품을 구입하여 쓸 수 도 있다. * 제조법: Na2CO3 와 구연산나트륨(C6H5Na3O7)을 각각 아래의 양 만큼씩 800mL의 물에 녹인다. 이때 약간 가열하여 주면 빨리 녹는다. 이것을 여과한 다음 물 100mL에 17.3g 의 CuSO4를 녹이고 첫번 용액과 혼합한다. 이것을 식히고 증류수를 부어 용액을 1L로 만든다. 구연산나트륨 이나 구연산 칼륨 ……………… 173.0g Na2CO3 결정 이나 100%의 무수 분말 …… 200.0g CuSO4결정 …………………………………… 17.3g 3. 뷰렛 시약(Biurett): 단백질 검출용 CuSO4 2.5g을 물 1L 에 녹여 0.01M용액을 만든다. 다음에 NaOH 400g을 물에 녹여 1L의 용액(10M)을 만든다. 사용하기 전에 NaOH용액 1L에 약 25mL의 CuSO4용액을 혼합한다. WalKer수정액을 만들어도 좋다. 40%NaOH용액에 CuSO4한방울을 1화에 한 방울씩 떨어뜨 려 잘 휘저어가면서 진한 청색이 될 때 까지 가열한다. 이 용액에 여과지를 담그었다 가 꺼내어 말린 다음 작게 잘라 단백질 검출용으로 쓰인다. 4. 요오드화 칼륨용액: 녹말 검출용 증류수 25mL에 KI용액 3g을 녹인다. 여기에 요오드 0.6g을 가하여 녹인다. 증류수를 부어 200mL로 만든다. 이것은 갈색병에 보관한다. 5. 페엘링 용액(Fehing): 포도당 검출용 용액1( CuSO4 34.65g+ 증류수 500mL)과 용액2(KOH 125g + 칼륨나트륨 타르타르산 173g+ 증류수 500mL)를 구하여 고무마개를 막고 한 병 속에 보관한다. 포도당의 유무 를 알기 위하여 각각의 용액을 같은 양씩 혼합하여 시험할 물질에 가ㅏ뒤 가열해 본 다. 포도당이 있으면 녹황색 또는 적갈색 침전(CuO2 )이 생긴다. 6. 아세트산 카아민 용액(Aceto-Carmine): 염색체 염색제 카아민 1g을 45% 초산 100mL에 놓고 끓이면서 잘 용해 시킨다. 실온까지 충분히 식혀 서 여과한다. 이 것을 슬라이드 글라스위의 재료에 떨어 뜨리고 20분 정도 지난 후 커 버그라스를 덮고 검경한다. 7. 메틸렌블루 염색액( Methylene blue) 동물 세포의 핵 염색에 이용한다. 0.3g의 메틸렌블루를 30mL의 에탄올(95%)에 녹인 후 100mL의 증류수를 첨가한다. 8. 라이트 염색액(Wright): 혈구 관찰용 0.2g~0.3g의 라이트 염색시약(powder)을 100mL의 메탄올(adsolute)에 녹여 1~2일 방치 한 후 사용한다. 9. 김자 염색액(Giemsa): 백혈구 관찰용 김자 0.8g과 글리세롤 50mL와 메탄올 500mL를 혼합하여 2~3일 동안 흔들어 준다. 이것 을 저장액으로 하여 염색액으로 사용할 때에는 저장액 1mL에 50mL의 증류수를 넣어 희 석한 후 사용한다. 10. 염기성 푸크신액(basic fuchsin solution): 핵 염색 basic fuchsin(1g)+ 50% 알코올(100cc) 염기성 색소로서 핵, 원형질, 목화된 세포막, 세균, 배낭, plankton 등을 붉게 염색한 다. 너무 많이 염색된 경우 알코올 혹은 酸 알코올로 탈색한다. methylene blue와 복 염하면 핵과 인은 붉으게 다른 것들은 푸르게 염색한다. Feulgen씨는 치모핵산의 검출 에 응용하였다. 11. 에오신액(eosin solutio): 세포질 염색제 eosin(1g)+ 70% 알코올(100cc) 혹은 1% 수용액 산성새소로서 세포질 염색제로 유명하다. 세포내 단백질의 결정, 호분립,입균, 조류, 동물조직 들을 붉게 염색한다. haematoxylin이나 메틸그린 같은 염기성 색소로 염색한 것으로 알 코올 용액으로서 사용한다. 다른 것은 세포질 염색을 목적으로 수용액으로 서 염기성 색소 사용전에 염색한다. 12. 오렌지 G액(orange G solution) * 오렌지G (1g)+ 증류수(100cc) 산성색소이며 세포질 염색에 적당하고, 수초~수분간 염색한다. safranin액 또는 haematoxylin액과의 複染色에 적당하다. 13. 비스마르크 브라운액(bismark brown solution) * bismark solution(1g) + 증류수(100cc) 염기성색소로서 세포질 염색에 좋다. 끓이면 색소가 파괴된다. 14. 헤마톡실린 용액(haematoxylin soiution) 세포벽, 염색체 등의 염색체에 사용한다. 암모늄 명반의 포화 수용액에 섞어서 혼합액을 만들고 공기가 통하도록 거어즈로 병입 을싸면 다음 1주일 정도 둔다..여기에 글리세롤, 알코올을 타서 몇 달 동안 놓아 두고 때때로 흔들어 진한 암자색이 된 다음에 걸러서 쓴다. 염색하면 청자색으로 진하게 물 들므로 염산 알코올로 탈색한다. 그 다음 70% 알코올 용액을 넣으면 염산에 의해 붉게 물든 부분이 알맞게 청색으로 회복되므로 알코올로 탈수한다. 15. 메틸셀룰로오스 용액(methyl cellulose) 현미경 검경시에 원생동물의 운동성을 줄인다. 건조한 메틸셀룰로오스 5g을 95mL의 증 류수에 녹인다. 70~80℃의 물에서 녹인후, 24시간 동안 냉장실에 보관하였다가 사용한 다. 이 용액은 끈끈한 점성을 지니는데 원생동물 배양액 한방울에 메틸켈롤로오스 용 액 한방울을 섞어 사용한다. 16. 사프라닌 용액(safranin solution) * safranin(1g)+ 50% 알코올(100cc) 핵, 인, 중심립의 염색에 이용된다. 사프라닌올 순 알코올에 녹이고 며칠 후 증류수를 가해서 쓴다. 이것은 농적색으로 염 색되며 순 알코올로 탈색하면 인과 염색질만이 남고 다른 것은 탈색된다. 17. 콩고레드 용액(congored) 코아세르베이트 염색용 콩고레드 O.1 g을 100mL의 증류수에 잘 녹이고 필요한 경우에는 여과하여 사용한다. 18. 링거 용액(Ringer Solution) (1) 개구리 조직용 이 용액은 개구리 조직과 등장액이므로 개구리의 생체조직을 관찰하는데 이용한다. 절 제한 개구리의 심장을 이 완충액에 넣어두면 몇 시간 동안 박동을 지속시킬수 있다. * 다음 물질들을 증류수 1L에 녹인다. KCI(0.14g) + NaCl(7.50g) + CaCl2(0.12g) (2) 포유동물 조직용 이 용액은 포유동물 조직과 등장이므로 포유류의 생체 조직관찰에 유용하다. * 증류수 1L에 다음 물질을 녹여서 만든다. KCI(0.42g) + NaCl(9.0g) + CaCl2(0.12g) + NaHCO3(0.20g) 19. 산성 푸크신액( acid fuchsin solution) 원형질(적색), 원생동물, 신경세포 염색 산성 푸크신 1 g을 중류수 또는 70% 알코올 100cc에 녹인다. 20. 메틸 그린액(methy green solution) * methy green(1~2.5g)+ 증류수(100cc) 염기성색소로서 핵염색체로 가장 좋다. 이미 고정한 재료의 염색에는 승홍이외로 고정 한 것은 효과가 적다. <참고문헌: 생물학사전(창원출판사,1986), 과학교육자료집(광주광역시교육 청,1996)>