ALP & ACP
(Alkaline Phosphatase & Acid Phosphatase)
1.“Phosphatase (ALP & ACP)”란?
; 여러가지 Monophosphate ester를 가수분해하여 Phosphate와 Alcohol을 생성하는 효소
1)ALP (Alkaline Phosphatase)
⑴Phosphate를 반응액중의 인산수용체로 전이하는 Transphosphorylation 작용을 갖는다
⑵정상 혈청중의 ALP는 성인이 (주로) 간에서 유래, 소아는 골에서 유래한 것이 많다
⑶신장의 근위세뇨관 , 소장점막 , 간의 모세담관 , 골 , 태반 등에서 활성이 높다
⑷아연을 활성중심으로한 금속효소이며 동시에 당단백 이다
2)ACP (Acid Phosphatase)
⑴정상 혈청중의 ACP의 75%가 간에서 유래, 25%는 전립선에서 유래한다
⑵전립선조직에 대량 포함, 그외에 적혈구 , 간 , 신장 , 비장 등에 널리 분포하고 있다
⑶전립선암에서 현저히 증가한다
2.ALP & ACP의 성질
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종류 |
ALP |
ACP |
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최적 pH |
pH 8～10 (pH 10.5) |
pH 4～6 |
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기질 |
Bodansky 법 : β-Glycerophosphate
Kind-King 법 : Phenylphosphate
Bessey-Lowry 법 : Para-Nitrophenylphosphate
Menten 법 : Naphthylphosphate
Babson 법 : Phenolphthaleinmonophosphate |
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활성제 |
Mg+2 , Mn+2 , Ca+2 |
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저해제 |
EDTA , Citrate , Oxalate , Cyanide , Borate , Phosphate , L-Tartrate |
?
3.검체의 안정성
1)실온에서 불안정 하므로 검체 채취 후 신속히 측정해야 한다
2)실온 2시간 , 냉장 1～2시간 , 냉동 1주일간 안정하다
3)혈청 1㎖에 Sodium citrate 18㎎ 또는 20% Sodium acetate 10㎕ 첨가로 냉장해서 1주일간 안정하다
4.정상치
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ALP |
ACP |
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Bodansky 법 |
1.5～4.0 Unit/㎗ (=100㎖) |
0.1～1.1 Unit/㎗ (=100㎖) |
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Bessey-Lowry 법 |
0.7～2.8 Unit/L |
0.13～0.63 Unit/L |
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Kind-King 법 |
2.7～10 Unit/㎗ (=100㎖) |
1～4 Unit/㎗ (=100㎖) |
※적혈구성 Acid Phosphatase 활성을 저해하는 물질은? Copper
※전립선성 Acid Phosphatase 활성을 저해하는 물질은? Tartrate
5.임상적 의의
1)ALP (Alkaline Phosphatase)
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증가 |
감소 |
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골질환 (구루병 , 골연화증 , 골육종 , 암의 골전이)
간질환 (간암 , 간염 , 간종양)
담도질환 (폐쇄성 황달) |
괴혈병
Cretinism |
2)ACP (Acid Phosphatase)
6.ALP 동질효소 (Isoenzyme) 분획에 포함된 주요성분과 전기영동상의 분류
; ALP 동질효소는 전기영동시 6분획으로 나누어지는데 어떤 분획이 증가하는가에 따라 어느 장기의 질환인지를 구분
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구 분 |
전기영동상의 분류 및 비율 |
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전기영동시
Supporting Media
(지 지 체) |
○＋ －○ |
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ALP1 |
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ALP2 |
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ALP4 |
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ALP5 |
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ALP6 |
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ALP3 |
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Dencitogram |
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ALP1 |
ALP2 |
ALP3 |
ALP4 |
ALP5 |
ALP6 |
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ALP 동질효소
분 획 |
ALP1 |
ALP2
성인혈청의 주요밴드 |
ALP3
소아혈청의 주요밴드 |
ALP4 |
ALP5 |
ALP6 |
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Protein과 비교 |
α1～α2 위치 |
α2 위치 |
α2～β 위치 |
α2～β 위치 |
β 위치 |
β～γ 위치 |
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유 래 장 기 |
간 (고분자) |
간 (Liver) |
골 (Bone) |
태반 (Placenta) |
소장 (Intestine) |
간 (IgG 결합) |
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주 요 질 환 |
폐쇄성 황달 |
간, 담도질환 |
골조성성질환
열에 약함 (이열성) |
임신후기
열에 강함
(내열성) |
B형, O형 혈액형 |
궤양성 대장염 |
※ALP : Alkaline Phosphatase
7.측정시 주의사항
1)항응고제의 영향 (혈장을 검체로할 때)
; 구연산 , EDTA , NaF , 수산염 등의 항응고제를 첨가한 혈장은 항응고제가 효소의 활성을 저해하므로 사용할 수 없다
2)용혈의 영향
⑴ALP
①용혈의 영향이 적다
②성별 , 연령별에 따라 차이가 있다 (유아 , 여자 , 임산부 > 남자)
⑵ACP
①용혈검체는 적혈구 중에 다량의 ACP가 있어서 측정할 수 없다
②전립선의 맛사지 , 촉진검사 , 요도 카테터 삽입에 의해 ACP의 상승이 보인다
8.ALP & ACP 측정법
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측정법 |
Bodansky 법
(Fisk-Subbarrow 법 이용) |
Bessey-Lowry 법 |
Kind-King 법
(= Kind-Amstrong 법) |
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종류 |
ALP |
ACP |
ALP |
ACP |
ALP |
ACP |
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원리 |
Phosphatase (ALP or ACP)
↓
β-GP → Phosphate + Glycerol
Phosphate + Amm. molybdate + ANSA
→ Blue Color |
Phosphatase (ALP or ACP)
↓
ρ-NP → Phosphate + ρ-Nitrophenol
ρ-Nitrophenol + NaOH
→ Yellow Color |
Phosphatase (ALP or ACP)
↓
Phenylphosphate → Phenol + Phosphate
Potassium ferricyanide 존재하에서
Phenol + 4-AAP → Red Color |
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최적 pH |
pH 8.6 |
pH 4.8 |
pH 10.5 |
pH 4.8 |
pH 10 |
pH 4.9 |
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Buffer |
Babital Buffer (Veronal Buffer) |
Glycine Buffer |
Citrate Buffer |
Carbonate Buffer |
Citrate Buffer |
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기질 |
β-Glycerolphosphate |
Para-Nitrophenylphosphate |
Phenylphosphate |
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반응물질 |
Phosphate |
Para-Nitrophenol |
Phenol |
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시약 |
Ammonium molybdate : 발색제
ANSA : 환원제 |
NaOH : 발색제 |
4-AAP : 발색제
Potassium ferricyanide : 탈색제 |
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반응시간 |
37℃ 60분 |
37℃ 30분 |
37℃ 15분 |
37℃ 60분 |
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종말색 |
Blue |
Yellow |
Red |
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파장 |
620㎚ |
410㎚ |
520㎚ |
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정상치 |
1.5～4.0 U/㎗ |
0.1～1.1 U/㎗ |
0.7～2.8 U/L |
0.13～0.63 U/L |
2.7～10 U/㎗ |
1～4 U/㎗ |
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단위 |
혈청 100㎖가 37℃ 60분 동안에 β-Glycerolphosphate 기질에 반응하여 생성되는 Phosphate의 ㎎수 |
혈청 1L가 60분 동안에
ρ-Nitrophenylphosphate 기질에 반응하여 생성되는 ρ-Nitrophenol의 ㎎수 |
혈청 100㎖가 15분 또는 60분 동안에 Phenylphosphate 기질에 반응하여 생성되는 Phenol의 ㎎수 |
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비고 |
⑴Kind-King = Bodansky × 1.8 (약 2배)
⑵그 밖의 측정법
①Babson 법 : Phenolphthaleinmonophosphate 기질 사용
②Menten 법 : Naphthylphosphate 기질 사용
③Shinowara-Jones-Reinhart 법 : β-Glycerolphosphate 기질 사용 |
※β-GP : β-Glycerolphosphate ※ANSA : Aminonaphthol sulfonic acid
※ρ-NP : ρ-Nitrophenylphosphate ※4-AAP : 4-Aminoantipyrine
