LDH
(Lactic Dehydrogenase : LD)
1.“LDH (유산탈수소효소)”란?
1)Pyridine nucleotide 존재하에서 Lactic acid와 Pyruvic acid의 가역적 이행반응을 촉매하는 산화, 환원효소
2)LDH는 혐기적 해당계의 최종단계에서 관여하는 중요한 효소
(생리적 조건에서는 Pyruvic acid → Lactic acid로의 방향이 짙다)
3)동물의 전체 조직에 존재하는 편재성 효소
4)심장 , 심근 , 간 , 골격근, 등에서 생성된다
5)LDH는 2개의 Subunit인 심근형 (H형)과 골격근형 (M형)으로 되는 4량체이다
(일반적으로 H형이 안정하고 M형이 활성을 잃기쉽다)
6)혈청 LDH의 측정은 각종 질환 진단 때문에 보조 Data의 하나로서 및 여러 질환의 경과 관찰 또는
예후 판정지표의 하나로 이용
2.LDH의 성질
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정반응
(Lactic acid → Pyruvic acid) |
역반응
(Pyruvic acid → Lactic acid) |
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최적 pH |
pH 8.8～9.8 (pH 9.5) |
pH 7.4～7.8 (pH 6.0～8.5) |
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기질 |
Lactic acid |
Pyruvic acid |
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보조효소 |
NAD |
NADH |
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저해제 |
EDTA , Borate (Sodium boric acid) , Oxalate |
3.정상치 : 200～450 Unit
1)어린이는 성인보다 활성이 높다
2)출생시에는 성인의 약 2배 , 14세부터 성인치를 보인다
4.임상적 의의
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이상 증가 질환 |
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악성종양 |
간 담도암 , 췌장암 , 대장암 , ... ... ... 등 |
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심폐질환 |
급성 심근경색 , 울혈성 심부전 , 폐경색 , ... ... ... 등 |
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혈액질환 |
악성빈혈 , 만성골수성 백혈병 , 용혈성 빈혈 , ... ... ... 등 |
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간질환 |
급성 간염 초기 , 간경변 , |
5.LDH (= LD) 동질효소 (Isoenzyme) 분획에 포함된 주요성분과 전기영동상의 분류
; LDH 동질효소는 전기영동시 5분획으로 나누어지는데 어떤 분획이 증가하는가에 따라 어느 장기의 질환인지를 구분
LDH는 2개의 Subunit인 심근형 (H형)과 골격근형 (M형)으로 되는 4량체이다
일반적으로 H형이 안정하고 M형이 활성을 잃기쉽다
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구 분 |
전기영동상의 분류 및 비율 |
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전기영동시
Supporting Media
(지 지 체)
혈청 단백질과의
비 교 |
＋○ ┌───────── Globulin ─────────┐ ○－ |
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Albumin |
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α1 |
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α2 |
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β |
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γ |
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LDH1 |
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LDH2 |
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LDH3 |
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L
D
H4 |
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LDH5 |
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Dencitogram |
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LDH1 |
LDH2 |
LDH3 |
LDH4 |
LDH5 |
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LDH 동질효소 분획 |
LDH1 |
LDH2 |
LDH3 |
LDH4 |
LDH5 |
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Subunit의 구성 |
HHHH형 |
HHHM형 |
HHMM형 |
HMMM형 |
MMMM형 |
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Protein과 비교 |
Albumin ～α1 위치 |
α1～α2 위치 |
α2～β 위치 |
β～γ 위치 |
γ～○－극 쪽에 위치 |
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정 상 치 |
21～33% |
36～46% |
23～32% |
1～6% |
0～5% |
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유 래 장 기 |
심장 , 적혈구 |
신장 , 적혈구 |
폐 , 비장 , 갑상선 |
위 , 종양 , 태반 |
간 , 골격근 |
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주 요 질 환 |
심근경색
용혈성 질환 |
용혈성 질환
* 혈관내 용혈
* 악성 빈혈
* 용혈성 빈혈
심근경색 |
폐경색 |
전이암 |
급성간염 |
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기 타 |
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낮은 온도에서 불안정 |
/<SPAN
※LDH : Lactic Dehydrogenase (= LD)
6.측정시 주의사항
1)실온에서 24시간 이내 , 냉장고에서 3일 이내
2)동결보존의 경우 -20℃에서는 불안정하므로 -40℃ 이하로 할 필요가 있다
3)약간의 용혈에도 큰 영향을 받는다 (혈구 중의 LDH는 정상 혈청의 약 100배의 농도)
4)전혈을 그대로 방치하면 실온에서도 냉소에서도 1시간에 10～25% 상승하므로 신속한 혈청분리가 필요하다
5)심근경색의 경우 2주일 이내에 측정해야 의의가 있다
7.LDH 측정법
1)Pyruvic acid를 기질로 사용하는 방법 (역반응 이용)
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측정법 |
UV 법 |
비 색 법 |
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Wroblewski-Ladue 법 |
Cabaud-Wroblewski 법 |
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원리 |
LDH (Serum)
↓
Pyruvic acid + NADH → Lactic acid + NAD |
LDH (Serum)
↓
Pyruvic acid + NADH → Lactic acid + NAD
남은 Pyruvic acid + 2,4 DNPH → Hydrazone
Hydrazone + NaOH → Brown Color |
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기질액 |
Pyruvic acid |
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보조효소 |
NADH |
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반응물질 |
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남은 Pyruvic acid |
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정색시약 |
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2,4 DNPH (2,4 Dinitrophenyl Hydrazine) |
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반응정지시약 |
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NaOH |
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측정물질 |
NADH의 감소량 |
Hydrazone |
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파장 |
340㎚ |
500㎚ |
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Color |
Colorless |
Brown (적갈색) |
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pH |
pH 7.4～7.8 |
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정상치 |
100～600 Unit |
50～400 Unit |
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단위 |
혈청 1㎖에 의해 NADH 흡광도가 25℃에서 매분 0.001씩 감소할 때를 1 Unit로 한다 (Wroblewski Unit) |
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비고 |
⑴IU/L = Wroblewski Unit × 0.48 |
?
2)Lactic acid를 기질로 사용하는 방법 (정반응 이용)
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측정법 |
UV 법 |
비 색 법 |
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Wacker 법 |
Babson 법 (Tetrazolium 법) |
King 법 (2,4 DNPH 법) |
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원리 |
LDH (Serum)
↓
Lactic acid + NAD →
Pyruvic acid + NADH |
LDH (Serum)
↓
Lactic acid + NAD →
Pyruvic acid + NADH
PMS
↓
NADH + Tetrazolium → Formazan |
LDH (Serum)
↓
Lactic acid + NAD →
Pyruvic acid + NADH
Pyruvic acid + 2,4 DNPH → Hydrazone
Hydrazone + NaOH → Brown Color |
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기질액 |
Lactic acid |
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보조효소 |
NAD |
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반응물질 |
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NADH |
Pyruvic acid |
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정색시약 |
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Tetrazolium , PMS |
2,4 DNPH |
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반응정지시약 |
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HCl |
NaOH |
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측정물질 |
NADH의 증가량 |
Formazan |
Hydrazone |
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파장 |
340㎚ |
570㎚ |
500㎚ |
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Color |
Colorless |
Red |
Brown |
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pH |
pH 8.8～9.8 |
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정상치 |
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100～190 Unit |
225±525 Unit |
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단위 |
혈청 1㎖에 의해 NADH 흡광도가 25℃에서 매분 0.001씩 증가할 때를 1 Unit로 한다 (Wacker Unit) |
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비고 |
⑴Wacker Unit × 3 = Wroblewski Unit |
※PMS : Phenazine methosulfate ※2,4 DNPH : 2,4 Dinitrophenyl Hydrazine
