● C-Peptide 생성과
작용기전
C-peptide는 인슐린과 그 전구물질(precursor)인 프로인슐린을
연결하는 연결펩티드(connecting peptide)이다. 인슐린과 같이 췌장 랑게르한스섬의 β-세포에서 만들어지지만 호르몬 작용이나 생리적
활성은 없다. 프로인슐린은 췌장 β-세포의 분비과립에서 인슐린과 c-peptide로 분할기 때문에 항상 같은 양으로 분비된다. 그러나
C-peptide는 반감기가 길기 때문에 실제 혈장 농도는 인슐린보다 높다.
혈중 인슐린을 측정하면 외인성 인슐린이 측정치에 포함되므로 인슐린 치료 중에는 외견상 고농도를 보여 인슐린 농도만으로는 췌장의 β-세포의
기능을 평가하기는 어렵다. 또한 순환하는 항인슐린 항체가 있을 경우에도 내인성 인슐린 생산의 측정이 가능하다. 게다가 요에서 C-peptide의
측정은 인슐린 생산의 신뢰할 수 있는 지표가 된다.
임상적으로는 비만, 인슐린종(insulinoma), 인슐린 자가면역증후군,
이차성당뇨병 등에서는 높은 값을 보이고, 당뇨병, 췌장암, 담석, 뇌하수체기능저하증, 갑상선기능저하증, 부신기능저하증 등에서는 낮은 값을
보인다. 신부전이나 요로감염증 등의 합병에서는 요중 C-peptide는 낮게 나타난다. 실제 소아 초기부터 β-세포의 완전 파괴로 이어지는
자가면역성 제I형 당뇨병이나 일부 II형 당뇨병에서 β-세포의 파괴가 있게되면 인슐린이나 C-peptide의 결핍이 나타난다. 이러한 환자들은
통상적으로 인슐린 생성 부족을 보상하기 위해 인슐린 주사를 맞지만 C-peptide는 공급되지 못한다.
C-peptide는 여러 조직에서 혈관의 항정성을 유지하는데 생물학적 활성을 보이는 펩티드 호르몬으로 작용한다. 만약 높은 혈당치와 함께
C-peptide 부족이 있게되면 작은 혈관의 순환이 감소하고 신경, 신장, 망막까지 손상을 받는다. 제I형 당뇨병 치료를 위해
C-peptide를 보충해 주면 장기 합병증을 예방하거나 진행 속도를 지연 시킬 수 있다는 보고가 있다.
●C-Peptide 측정
검사방법은 방사성면역분석법(RIA)인 one step solid phase IRMA법인데, 이는 먼저 monoclonal anti
C-peptide가 흡착된 코팅튜브에 standard나 검체 내에 존재하는 C-peptide가 반응하며 이어서 I-125로 표지된
monoclonal anti C-peptide가 반응하는 원리이다. 반응이 끝나면 sandwich complex를 형성하게 되며 결합되지 않은
tracer는 세척 단계에서 떨어져 나간다. 결합된 tracer의 양은 검체 내에 존재하는 C-peptide의 양과 비례한다.
검체로는 혈청을 사용하고, 검사 당일에는 금식한다. 검체의 반복된 냉동과 해동은 피하고, 검체를 보관 시 2-8℃에서 보관하되 24시간이상
보관할 경우는 -20℃에서 냉동보관한다. 검체의 측정치가 높을 경우에는 standard 0로 희석하여야 한다. 본원에서 사용하는
시약은 C-PEPTIDE MYRIA-S 킷트 (제조사 TECHNO GENETICS)
킷트는 다음과 같이 구성되어 있는데 모든 시약은 검사전 최소한 30분 동안 실온에서 예열하고, 거품이 생기지 않도록 하여 시약을
재구성한다.
㉠ coated tube : anti c-peptide (100T),
㉡ tracer : monoclonal anti c-peptide i125 ( 11mL / 1 vial )
㉢ standard 0 :
bovine serum → DW 5mL를 첨가하여 사용
㉣ standard : 6 vials , bovine serum : DW
1mL첨가하여 사용
( 0.25, 0.5, 1.5, 4.5, 9, 16 ng/mL )
㉤ control : 2
vials human serum
정도관리물질로는 : kit 내의 control 물질1.2이 들어 있다. 검사기구와 장비로는 ① micro pipette (50,
100uL) ② vortex mixer ③ gamma counter ④ tube ⑤ shaker이 필요하고, 검사 방법은 다음과 같다.
① standards, control와 검체를 미리 표기해둔 코팅 튜브에 50uL씩 가한다.
② total을 포함한 모든 코팅
튜브에 tracer를 100uL씩 가한다.
③ vortex mixer로 내용물을 혼합한다.
④ 250-350rpm 으로 실온에서
2시간 (±5분) 동안 반응한다.
⑤ 반응이 끝난 후 total을 제외한 모든 튜브에 세척을 통하여 B/F분리를 한다.
⑥
gamma counter를 이용하여 cpm을 측정한다.
* X축은 농도 , Y축은 cpm을 이용하여 standard curve를
그린다.
⑦ standard curve를 이용하여 모르는 환자의 농도를 결정한다.
검사결과 : 각 농도의 표준액의 계측값을 이용하여 logit-log graph에 표준곡선을
작성한다. 표준곡선에서 각 검체의 계측 값을 가지고 C-peptide의 값을 찾는다. 식후보다 공복에서 높게 나오거나 이전 결과와 차이가 많이
날 경우에는 재검을 실시한다. 식사량이나 식사 조성에 따라 일내변동, 일차변동이 있으므로 3일 연속 측정하여 평균을 구하는 것이 좋다.
참고치는 혈청 1.0-3.5
ng/mL이다.
출처 : 네이버 청해님 블로그 http://blog.naver.com/hyouncho2/60167466484
첫댓글 오잉??쭉 읽어 보긴했으나...떨어지는 이해력으로 한번으론 뭔말인지 잘모르겠어요~프린트해서 틈나는 대로 읽어봐야겠어요~좋은 정보 감사드려요^^
역시...울 또야맘님은 울 엄마들이 느슨해 지지않도록....
숙제꺼리를 남겨주셨네요...^^또 공부...그리고 공부...해야만
저도살고 울 애들도 사는길~~아자아자!!!감사해용~~
저도 오늘 프린트물 하나 늘었네요~이거...이거...어려운 숙제 주셨어요 ^^
정성스러운 또야님의 정보들 많은 도움 받고 있습니다~
감사하게 열심히 공부 하겠습니다 ^^
저도..뇌가 모지라서..휙휙 안돌아가네요...눈으로만 보아요 ..
공부공부...ㅠ.ㅠ...
열심히 읽고보고 굴려서 공부할게요~감사해요~
컴상으론 증말 눈이 아프네요,,,프린트가정답이네요,,,감사해요,,