γ-GTP
(Gamma Glutamyl Transpeptidase)
1.“γ-GTP”란?
1)γ-GTP는 γ-Glutamylpeptide를 γ-Glutamyl기와 Peptide Chain으로 가수분해하는 것과 동시에
γ-Glutamyl기를 여러 Amino acid나 Peptide로 이전시키는 작용을 갖는 전이효소이다
2)장기분포는 신장에 가장 많고 다음으로 췌장 , 간 , 담도 , 비장 등에 존재한다
3)γ-GTP는 ALP나 LAP와 함께 간, 담도 효소라 부른다
4)담즙울체에서 혈청 효소활성이 현저하게 증가한다
2.정상치
1)♂ 6~28 mUnit/㎖
2)♀ 4~18 mUnit/㎖
3.임상적 의의
이상 증가 질환 |
간, 담도계 질환
폐쇄성 황달
간담성 간경변증
원발성 및 전이성 간암
급성 및 만성간염 |
4.측정시 주의사항
; 실온에서 2~3일, 냉소에서 약 2주간 안정하다
5.γ-GTP 측정법
측정법 |
Orlowski 법 |
송합법 |
Goldberg 법 |
L-γ-G-3-C-4-H 기질
이 용 법 |
원리 |
γ-GTP (Serum)
↓
합성기질 + Glycylglycine → γ-Glutamyl-Glycylglycine + 생성물 |
|
생성물 + 정색시약 → Color |
합성기질 |
γ-Glutamyl-p-Nitroanilide |
γ-Glutamyl-β-Naphthylamide |
γ-Glutamyl-p-Nitroanilide |
L-γ-G-3-C-4-H |
생성물 |
p-Nitroaniline |
β-Naphthylamine |
p-Nitroaniline |
5-Aminosalicylic acid
p-Xylenol |
정색시약 |
|
p-Dimethylaminocinenamaldehyde |
NaNO2
Sulfamate |
Sodium metaperiodate |
Color |
Yellow |
Red |
Blue |
Blue |
파장 |
410㎚ |
540㎚ |
640㎚ |
640㎚ |
정상치 |
0~50 Unit/L |
|
|
0~43 Unit/L |
※L-γ-G-3-C-4-H : L-γ-Glutamyl-3-Carboxy-4-Hydroxyanilide
Cholinesterase
(CHS)
1.“Cholinesterase”란?
1)Cholinester를 Cholin과 유기산으로 가수분해하는 효소로 동물조직에만 존재한다
2)Cholinesterase는 간에서 합성되고, 그 합성능은 Albumin 생합성과 평행하다
3)일반적으로 임상에서 널리 사용되는 것은 Pseudo Cholinesterase이다
2.Cholinesterase의 종류 및 성질
종류 |
Pseudo Cholinesterase |
True Cholinesterase |
분포 |
혈청 , 간 , 췌장 , 심장 , ... ... ... 등 |
신경조직 , 근육 , 적혈구 , ... ... ... 등 |
기능 |
불명 |
신경 , 근육에 자극전달 |
최적 pH |
pH 8.0~8.5 |
pH 7.5~8.0 |
기질 |
여러 종류의 Acylcholine
* Benzoylcholine
* Butyrylcholine |
Acetylcholine
Acetyl-β-methylcholine
|
저해제 |
유기인제 (약물 : Eserine , Physostigmine) |
Tributyrin |
Caffeine |
3.임상적 의의
고 Cholinesterase 혈증 |
저 Cholinesterase 혈증 |
신장질환 (네프로제)
신경계 장해
갑상선 기능항진증
당뇨병 |
간질환 (간경변증)
빈혈
유기인산 중독증
심근경색
가족성 Cholinesterase 결손증 |
4.측정시 주의사항
1)실온 - 1주간 , 냉장고 - 2주간 , 동결 - 수 개월 안정하다
2)혈장을 검체로 사용할 때는 항응고제로 Heparin만을 사용한다
3)용혈 혈청은 사용할 수 없다 (그러나 Benzoylcholine 기질을 사용하면 용혈의 영향을 피할 수 있다)
5.Cholinesterase 측정법
측정법 |
비 색 법 |
효 소 법 |
Phenol Red 법 |
m-Nitrophenol 법 |
Benzoylcholine 기질 이용법 |
원리 |
Acetylcholine + Cholinesterase (Serum)
→ Acetic acid + Choline
Acetic acid + 발색시약 → Color |
Benzoylcholine + Cholinesterae (Serum) → O-Toluidic acid + Choline
Choline + Cholineoxidase → H2O2
H2O2 + Phenol + 4-AAP → Quinone |
기질 |
Acetylcholine |
Benzoylcholine |
발색시약 |
Phenol red |
m-Nitrophenol |
Phenol , 4-AAP (4-Amino Anti Pyrine) |
반응정지시약 |
Eserine |
Neostigmin |
|
Color |
Red |
Yellow |
Red |
파장 |
570㎚ |
420㎚ |
500㎚ |
정상치 |
0.8~1.1 ΔpH |
|
1,140~1,590 Unit/L |
Leucineaminopeptidase
(LAP)
1.“Leucineaminopeptidase (LAP)”란?
1)Leucineaminopeptidase는 N말단에 Leucine을 갖고 있는 Peptide를 말단에서 절단하는 효소이다
2)기타 Amino acid 잔기에도 작용하는 비교적 특이성이 낮은 Peptidase
3)소화작용 , Amino acid 대사에 관여한다
4)신장 , 췌장 , 담즙 , 소장 , 요 등에 널리 분포한다
2.Leucineaminopeptidase (LAP)의 성질
1)최적 pH 6.5~7.5
2)활성제 : Mg+2 , Mn+2
3.임상적 의의
이상 증가 질환 |
간외 담즙울체 (폐쇄성 황달)
간내 담즙울체 (세담관성 간염 , 원발성 담즙성 간경변)
임신 |
4.측정시 주의사항
1)실온 - 2~3일 , 냉장고 - 1주일 , 동결보존 - 3개월간 안정하다
2)혈장을 검체로 사용할 때는 항응고제로 Heparin만을 사용한다 (다른 항응고제는 LAP의 활성을 저해한다)
5.Leucineaminopeptidase (LAP) 측정법
측정법 |
Goldberg 법 |
Tuppy 법 |
L-Leucineamide 기질법 |
원리 |
L-L-β-N + LAP (Serum)
→ L-Leucine + β-Naphthylamine
β-Naphthylamine + B-M 시약 → NANO2 (Azo 색소)
↑
Diazo화 |
L-L-p-N + LAP (Serum)
→ L-Leucine + P-Nitroaniline |
L-Leucineamide + LAP (Serum)
→ L-Leucine + Ammonia
Ammonia + α-Ketoglutaric acid + NADPH → Glutamate + NADP
↑
Glutamate Dehydrogenase |
기질 |
L-Leucyl-β-Naphthylamide |
L-Leucyl-p-Nitroanilide |
L-Leucineamide |
Color |
Blue (Azo 색소) |
Yellow |
Colorless |
파장 |
570㎚ |
410㎚ |
340㎚ (NADPH의 감소량 측정) |
정상치 |
♂ 84~200 Goldberg Unit
♀ 76~184 Goldberg Unit |
|
♂ 13~28 mUnit/㎖
♀ 15.5~31.8 mUnit/㎖ |
단위 |
혈청0.02㎖에 의해 37℃ 120분간에 1/12㎍의 β-Naphthylamide를 생성하는 활성 (Goldberg Unit) |
※Bratton-Marshall 시약 (B-M 시약) : N-1-Naphthylethylenediamine HCl ※NANO2 : 아초산 소다
※LAP는 췌장암 환자에게 특이성을 보인다