γ-GTP , Cholinesterase, Leucineaminopeptidase

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검사방법 스크랩 γ-GTP , Cholinesterase, Leucineaminopeptidase

겨울사랑 추천 0 조회 89 13.07.18 18:26 댓글 0

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γ-GTP

(Gamma Glutamyl Transpeptidase)

1.“γ-GTP”란?

1)γ-GTP는 γ-Glutamylpeptide를 γ-Glutamyl기와 Peptide Chain으로 가수분해하는 것과 동시에

γ-Glutamyl기를 여러 Amino acid나 Peptide로 이전시키는 작용을 갖는 전이효소이다

2)장기분포는 신장에 가장 많고 다음으로 췌장 , 간 , 담도 , 비장 등에 존재한다

3)γ-GTP는 ALP나 LAP와 함께 간, 담도 효소라 부른다

4)담즙울체에서 혈청 효소활성이 현저하게 증가한다

2.정상치

1)♂ 6～28 mUnit/㎖

2)♀ 4～18 mUnit/㎖

3.임상적 의의

이상 증가 질환

간, 담도계 질환

폐쇄성 황달

간담성 간경변증

원발성 및 전이성 간암

급성 및 만성간염

4.측정시 주의사항

; 실온에서 2～3일, 냉소에서 약 2주간 안정하다

5.γ-GTP 측정법

측정법	Orlowski 법	송합법	Goldberg 법	L-γ-G-3-C-4-H 기질 이 용 법
원리	γ-GTP (Serum) ↓ 합성기질 + Glycylglycine → γ-Glutamyl-Glycylglycine + 생성물
원리		생성물 + 정색시약 → Color
합성기질	γ-Glutamyl-p-Nitroanilide	γ-Glutamyl-β-Naphthylamide	γ-Glutamyl-p-Nitroanilide	L-γ-G-3-C-4-H
생성물	p-Nitroaniline	β-Naphthylamine	p-Nitroaniline	5-Aminosalicylic acid p-Xylenol
정색시약		p-Dimethylaminocinenamaldehyde	NaNO₂ Sulfamate	Sodium metaperiodate
Color	Yellow	Red	Blue	Blue
파장	410㎚	540㎚	640㎚	640㎚
정상치	0～50 Unit/L			0～43 Unit/L

※L-γ-G-3-C-4-H : L-γ-Glutamyl-3-Carboxy-4-Hydroxyanilide

Cholinesterase

(CHS)

1.“Cholinesterase”란?

1)Cholinester를 Cholin과 유기산으로 가수분해하는 효소로 동물조직에만 존재한다

2)Cholinesterase는 간에서 합성되고, 그 합성능은 Albumin 생합성과 평행하다

3)일반적으로 임상에서 널리 사용되는 것은 Pseudo Cholinesterase이다

2.Cholinesterase의 종류 및 성질

종류	Pseudo Cholinesterase	True Cholinesterase
분포	혈청 , 간 , 췌장 , 심장 , ... ... ... 등	신경조직 , 근육 , 적혈구 , ... ... ... 등
기능	불명	신경 , 근육에 자극전달
최적 pH	pH 8.0～8.5	pH 7.5～8.0
기질	여러 종류의 Acylcholine * Benzoylcholine * Butyrylcholine	Acetylcholine Acetyl-β-methylcholine
저해제	유기인제 (약물 : Eserine , Physostigmine)
저해제	Tributyrin	Caffeine

3.임상적 의의

고 Cholinesterase 혈증

저 Cholinesterase 혈증

신장질환 (네프로제)

신경계 장해

갑상선 기능항진증

당뇨병

간질환 (간경변증)

빈혈

유기인산 중독증

심근경색

가족성 Cholinesterase 결손증

4.측정시 주의사항

1)실온 - 1주간 , 냉장고 - 2주간 , 동결 - 수 개월 안정하다

2)혈장을 검체로 사용할 때는 항응고제로 Heparin만을 사용한다

3)용혈 혈청은 사용할 수 없다 (그러나 Benzoylcholine 기질을 사용하면 용혈의 영향을 피할 수 있다)

5.Cholinesterase 측정법

측정법	비 색 법		효 소 법
측정법	Phenol Red 법	m-Nitrophenol 법	Benzoylcholine 기질 이용법
원리	Acetylcholine + Cholinesterase (Serum) → Acetic acid + Choline Acetic acid + 발색시약 → Color		Benzoylcholine + Cholinesterae (Serum) → O-Toluidic acid + Choline Choline + Cholineoxidase → H₂O₂ H₂O₂ + Phenol + 4-AAP → Quinone
기질	Acetylcholine		Benzoylcholine
발색시약	Phenol red	m-Nitrophenol	Phenol , 4-AAP (4-Amino Anti Pyrine)
반응정지시약	Eserine	Neostigmin
Color	Red	Yellow	Red
파장	570㎚	420㎚	500㎚
정상치	0.8～1.1 ΔpH		1,140～1,590 Unit/L

Leucineaminopeptidase

(LAP)

1.“Leucineaminopeptidase (LAP)”란?

1)Leucineaminopeptidase는 N말단에 Leucine을 갖고 있는 Peptide를 말단에서 절단하는 효소이다

2)기타 Amino acid 잔기에도 작용하는 비교적 특이성이 낮은 Peptidase

3)소화작용 , Amino acid 대사에 관여한다

4)신장 , 췌장 , 담즙 , 소장 , 요 등에 널리 분포한다

2.Leucineaminopeptidase (LAP)의 성질

1)최적 pH 6.5～7.5

2)활성제 : Mg⁺² , Mn⁺²

3.임상적 의의

이상 증가 질환

간외 담즙울체 (폐쇄성 황달)

간내 담즙울체 (세담관성 간염 , 원발성 담즙성 간경변)

임신

4.측정시 주의사항

1)실온 - 2～3일 , 냉장고 - 1주일 , 동결보존 - 3개월간 안정하다

2)혈장을 검체로 사용할 때는 항응고제로 Heparin만을 사용한다 (다른 항응고제는 LAP의 활성을 저해한다)

5.Leucineaminopeptidase (LAP) 측정법

측정법	Goldberg 법	Tuppy 법	L-Leucineamide 기질법
원리	L-L-β-N + LAP (Serum) → L-Leucine + β-Naphthylamine β-Naphthylamine + B-M 시약 → NANO₂ (Azo 색소) ↑ Diazo화	L-L-p-N + LAP (Serum) → L-Leucine + P-Nitroaniline	L-Leucineamide + LAP (Serum) → L-Leucine + Ammonia Ammonia + α-Ketoglutaric acid + NADPH → Glutamate + NADP ↑ Glutamate Dehydrogenase
기질	L-Leucyl-β-Naphthylamide	L-Leucyl-p-Nitroanilide	L-Leucineamide
Color	Blue (Azo 색소)	Yellow	Colorless
파장	570㎚	410㎚	340㎚ (NADPH의 감소량 측정)
정상치	♂ 84～200 Goldberg Unit ♀ 76～184 Goldberg Unit		♂ 13～28 mUnit/㎖ ♀ 15.5～31.8 mUnit/㎖
단위	혈청0.02㎖에 의해 37℃ 120분간에 1/12㎍의 β-Naphthylamide를 생성하는 활성 (Goldberg Unit)