빌리루빈
(Bilirubin)
1.“빌리루빈 (Bilirubin)”이란?
1)Bilirubin은 Hemoglobin의 대사산물로 망상내피계에서 생성된다
2)소화효소는 없으나 지방을 유화하여 지방 소화효소 (Lipase)를 활성화 시키고, 지방산의 흡수를 돕는 담즙의 주요성분 중 하나이다
3)여러가지 원인으로 Bilirubin의 순환장애가 있거나 혈중의 Bilirubin생성이 증가하면 황달증상이 나타난다
4)Bilirubin의 혈액이나 요중의 양적 관찰이 간기능검사에서 중요하다
5)간에서 생산된 대사산물은 거의가 담즙으로 분비, 그 주요성분은 담즙색소, 담즙산, 지질, 등이다
6)Total Bilirubin = Indirect Bilirubin + Direct Bilirubin
2.Bilirubin의 대사과정
RBC 세망내피계 간 도착 전의 Bilirubin 형태
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RBC 파괴 → Hb 유출 → Hb 파괴
→ Heme과 Globin 유출 → Heme 파괴
→ Iron과 Biliverdin 유출 → Biliverdin 환원
→ Bilirubin |
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Bilirubin이 혈중 Albumin과 결합
→ Unconjugated Bilirubin
= Indirect Bilirubin (유리형)
= Protein Binding Form |
간 간 경유 후의 Bilirubin 형태 담관
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Unconjugated Bilirubin + Glucuronic acid |
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Conjugated Bilirubin
= Direct Bilirubin (포함형)
= Bilirubin Diglucuronide |
소장 대장
GSTYLE='font-family:"한양신명조,한컴돋
3.Indirect Bilirubin 과 Direct Bilirubin의 비교
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종류 |
Indirect Bilirubin |
Direct Bilirubin |
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명명 이유 |
Bilirubin + Diazo 시약이 반응하지 않으므로 다른시약으로 처리 후 반응. 즉, 지용성 성질이 있다 |
Bilirubin + 물에 탄 Diazo 시약과 직접반응.
즉, 수용성 성질이 있다 |
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다른 이름 |
= Unconjugated Bilirubin
= Protein Binding Form |
= Conjugated Bilirubin
= Bilirubin Diglucuronide |
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용해성 |
지용성 |
수용성 |
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Diazo 반응 |
간접반응 |
직접반응 |
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Albumin과 결합능 |
강하게 결합 |
약하게 결합 |
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구조 |
유리형 (Free Form) |
결합형 (Bound Form) |
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간 경유 여부 |
간 경유 전 |
간 경유 후 |
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표준 용매제
(Bilirubin Powder 용매제) |
Chloroform |
4.정상치
1)Total Bilirubin : 0～1㎎/㎗
2)Indirect Bilirubin : 0.2～0.8㎎/㎗
3)Direct Bilirubin : 0.1～0.5㎎/㎗
※신생아는 생후 1주간은 약 10㎎/㎗까지는 정상이고, 그후 일시적으로 최저치로 되었다가 서서히 증가하여 15세 정도에서 성인치에 달한다
5.임상적 의의
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Indirect Bilirubin 증가 질환 |
Direct Bilirubin 증가 질환 |
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생성증가 : 선천성 용혈성 질환 , 후천성 용혈성 질환 , 악성빈혈 ,
만성 골수성 백혈병 , ... ... ... 등
간 처리기능 이상 : 약물에 의한 중독 , 신생아 황달 , ... ... ... 등 |
간세포장해 : 간염 , 간경변증 , ... ... ... 등
간내성 담즙울체 : 알콜성 간염 , 중증 감염증에 의한 황달 , 간암 ,
원발성 담즙성 간경변 , ... ... ... 등
간외성 담즙울체 : 담석증 , 악성종양에 의한 담도폐쇄 , ... ... ... 등 |
6.측정시 주의사항
1)Bilirubin은 햇빛에 의해 산화되어 Biliverdin으로 되기 때문에 냉암소에 보존할 필요가 있다
2)검사시 불투명한 혈청의 사용은 Error의 원인이 된다
7.Bilirubin 측정법
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측정법 |
Malloy-Evelyn 법 |
Jendrassik-Grof 법 |
Michaelsson 법 |
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원리 |
총
빌리루빈 |
Bilirubin + Diazo 시약 + MEOH
→ Azobilirubin (Pink) |
Bilirubin + Diazo 시약 + Fehling
+ Caffein + Ascorbic acid
→ Azobilirubin (Blue) |
Bilirubin + Diazo 시약 + Fehling
+ Diphylline + Ascorbic acid
→ Azobilirubin (Blue) |
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직접빌리루빈 |
Bilirubin + Diazo 시약
→ Azobilirubin (Pink) |
Bilirubin + Diazo 시약 + Fehling
+ Ascorbic acid
→ Azobilirubin (Blue) |
Bilirubin + Diazo 시약 + Fehling
+ Ascorbic acid
→ Azobilirubin (Blue) |
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시약 |
⑴Diazo 시약
①A 시약 : Sulfonilic acid + HCl
(맹검시약)
②B 시약 : Sodium nitrite (NaNO2)
③Mix - A시약 : B시약 = 10 : 0.3
⑵Methanol (MEOH)
①지방분해 시약
②Total Bilirubin 측정시 발색시약
③Indirect Bilirubin을 Direct Bilirubin 으로 바꿔준다
④Indirect Bilirubin과 Albumin의 해리시약 |
⑴Diazo 시약
⑵Fehling
①NaOH + Sodium tartrate
②정색시약
⑶Caffein
①Sodium bensoate + Sodium acetate
(방부제) (pH 조절제)
②반응촉진제
③지방분해 시약
⑷Ascorbic acid
①Diazo 반응 정지제
②Hemolysis에 의한 Total Bilirubin치
의 저하를 감소시키는 효과 |
⑴Diazo 시약
⑵Fehling
①NaOH + Sodium tartrate
②정색시약
⑶Diphylline
①혼탁방지제
②지방분해 시약
⑷Ascorbic acid
①Diazo 반응 정지제
②Hemolysis에 의한 Total Bilirubin치
의 저하를 감소시키는 효과 |
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반응명 |
Van Den Bergh 반응 = Diazo 반응 |
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Color |
Pink (적자색) |
Blue |
Blue |
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파장 |
540㎚ |
600㎚ |
600㎚ |
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비고 |
⑴Jendrassik-Grof 법은 자동분석기에 많이 사용한다
⑵Icterus Index (황달지수)
①혈청중의 황달정도를 나타내는 방법 : Bilirubin 농도계측
②표준액 : 0.01% Potassium dichromate (중크롬산칼륨 : K2Cr2O7)
③정상치 : 3～8 Unit |
※중크롬산칼륨 농도 0.01%는 황달지수 1 Unit에 해당
8.황달 (Jaundice)
1)혈액내의 담즙색소 (Bilirubin)가 너무 많아지면 그 색소가 조직내로 침투하여 노란색을 띄는 현상
2)황달의 종류
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종류
순서 |
용혈성 황달
(Hemolytic Jaundice)
= Pre Hepatic Jaundice |
간세포성 황달
(Hepatocelluar Jaundice)
= Hepatic Jaundice |
폐쇄성 황달
(Obstructive Jaundice)
= Post Hepatic Jaundice |
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정의 |
적혈구의 과다 파괴로 Bilirubin-Protein 복합체의 증가를 가져오며 정상적인 간의 배설능력보다 많은 양의 담즙색소를 형성하는 경우 |
세균, 약물, 독소로 인하여 간세포의 손실 또는 괴사가 형성되며, 처음에는 Indirect Bilirubin이 증가되고 선세포의 손실로 Direct Bilirubin이 역류되는 경우 |
담석, 경련, 이상조직 등으로 담도가 폐쇄되어 Bilirubin이 장내 배설을 못하게 되는 경우 |
|
대
사
과
정 |
혈중 적혈구의 과다 파괴
?
혈중에 다량의 Indirect Bilirubin 생성
?
간에서 많은양의 담즙을 배설하는 것으로
혈중의 Indirect Bilirubin을 처리
(완전처리가 불가능하다)
?
혈중에 Indirect Bilirubin이 증가
?
혈중 Indirect Bilirubin은 신장에서 여과되지
않기 때문에 Urine으로 나타나지 않는다
?
다량의 담즙으로 배설되었던
Direct Bilirubin은 소장에서 재흡수
?
①Urobilinogen 상태 → 간문맥 →
간 → 혈중 Urbilinogen 증가
②신장 → Urobilinogen → Urobilin
→ Urine으로 배설
(Urine 중에 Urobilinogen 증가)
?
대장에서 Bacteria에 의해
Urobilinogen → Urobilin ,
Stercobilinogen → Stercobilin으로 된 후
?
Stool로 배설
(Stool 중에 Urobilinogen 증가) |
간세포의 손실로 Direct Bilirubin이 역류
?
혈중에 Direct Bilirubin이 증가
?
혈중 Direct Bilirubin은 신장에서 여과되어
Urine으로 배설된다
?
다량의 담즙으로 배설되었던
Direct Bilirubin은 소장에서 재흡수
?
①Urobilinogen 상태 → 간문맥 →
간 → 혈중 Urbilinogen 증가
②신장 → Urobilinogen → Urobilin
→ Urine으로 배설
(Urine 중에 Urobilinogen 증가)
?
대장에서 Bacteria에 의해
Urobilinogen → Urobilin ,
Stercobilinogen → Stercobilin으로 된 후
?
Stool로 배설
(Stool 중에 Urobilinogen 증가) |
간내에 고여있던 Direct Bilirubin이 역류
?
혈중에 Direct Bilirubin이 증가
?
혈중 Direct Bilirubin은 신장에서 여과되어
Urine으로 배설된다
?
담도의 폐쇄로 담즙이 장으로
배설되지 못한다 |
3)황달의 구별
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혈액 (Blood) |
요 (Urine) |
대변 (Stool) |
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D. Bilirubin |
In. Bilirubin |
Bilirubin |
Urobilinogen |
Bilirubin |
Urobilinogen |
Bilirubin |
Urobilinogen |
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용혈성 황달 |
- |
? |
? |
? |
- |
? |
- |
? |
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간세포성 황달 |
? |
- |
? |
? |
? |
? |
- |
↑ |
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폐쇄성 황달 |
? |
- |
? |
- |
? |
- |
- |
- |
4)Urobilinogen 측정법 : Wallace-Diamond 법 , Watson 법 , Ehlich-Akdehyde 반응
⑴원리 : Urobilinogen + P-Dimethylaminobenzaldehyde → Pink
⑵Urobilinogen은 조금(±)은 나와야 정상 , Negative면 장관 폐쇄를 암시
⑶담즙색소 (Bile Pigment) 제거제 : CaCl2
5)Urobilin 측정법 : Schlesinger 법 (Lugol Solution 사용 , 녹색)
