고초균에 의한 부저병 및 백묵병의 억제

[꿀벌나라]

아래 칸에 올라온 자료인 양봉전용 청국장 가루제품에서 참고한 문헌의 내용을 살펴 봤습니다.

하나 얻은게 있습니다.  

아래 실험 자료를 보니, 꿀 샘플과 벌 창자에서 분리한 세 가지  Bacillus 중 부저병과 백묵병에 대해

사전에 선택하여 실험한 결과, 같은 Bacillus 속(屬) 균주임이 밝혀졌다고 하였습니다.  나머지 하나는

노제마일 것입니다.  부저병이 백묵병과 같은 Bacillus 屬이고, subtilis 種이면 ??? 답은 나왔습니다.

------ 으로 노제마를 멸균하듯이, 부저도 같은 속, 종이면 멸균된다!!!!!!!!!.

Inhibition of Paenibacillus larvae and Ascosphaera apis by Bacillus subtilis

isolated from honeybee gut and honey samples

꿀벌 창자와 꿀 샘플에서 분리한 고초균에 의한 부저병 및 백묵병의 억제.

Abstract

요약

Three Bacillus strains isolated from honey samples and bee gut were pre-selected for their in vitro 

antimicrobial activity against Paenibacillus larvae and Ascosphaera apis, important honeybee pathogens.

The analysis of their 16S rRNA sequences revealed that C4, M1 and G2III strains belong to the subtilis

species.

꿀 샘플과  벌 창자에서 분리한 세 가지 Bacillus 균주는 중요한 꿀벌 병원체인 Paenibacillus larvae

(부저병)과 Ascosphaera apis(백묵병)에 대한 시험관 내에서 항균 활성을 위해 사전에 선택되었다. 16S rRNA

서열을 분석한 결과 C4, M1 및 G2III 균주가 subtilis 종에 속한다는 것이 밝혀졌다.

Surfactin synthesis was verified by IR spectroscopy and HPLC studies. Surfactin inhibited P. larvae but it

failed to affect A. apis.  Vegetative cells of P. larvae were affected as soon as they came in contact with

the surfactin sample; two orders of magnitude less in log scale were recorded.

계면활성물질 합성은 IR 분광기 사용 및 HPLC 연구로 확인되었다.  계면활성물질(界面活性物質)은 부저병을

억제했지만, 백묵병에는 영향을 주지 못했다. P. 유생(부저병)의 식물 세포는 계면활성물질 샘플과 접촉하자

마자 영향을 받았다 ; 로그 스케일에서 두번째 보다 더 작은 규모로 기록되었다.

Optimal surfactin production was observed in MEL medium, a broth with molasses as the only carbon

source. Bacillus subtilis G2III strain exhibited the highest levels of surfactin synthesis in BHI and MEL broths:

1391 AU/ml and 2782 AU/ml, respectively.

최적의 계면활성제 생산은 당밀을 유일한 탄소원으로 하는 MEL 배지(培地)에서 관찰되었다. 고초균 G2III

변종은 BHI와 MEL 묽은 수프에서 각각, 1391AU/ml와 2782AU/ml 일때, 가장 높은 수준의 계면활성물질

합성을 보였다.

Since only A. apis inhibition was observed when cell suspensions were assayed, we suspect that there may

be an antimycotic compound within cells. The co-production of surfactin and a fungicide by these strains

might biologically control bee pathogens in apiculture.

세포 현탁액을 분석할 때 백묵병 억제만이 관찰 되었기 때문에, 우리는 세포 내에 항진균성 화합물이 있을 수

있다는 생각한다. 이러한 균주에 의한 계면활성물질 및 살균제의 공동 생산은 양봉에서 꿀벌 병원체를 생물학

적으로 억제할 수 있다.

Introduction

서론

The genus Bacillus species are ubiquitous, endospore-forming Gram-positive bacteria that are harmless to

mammalians, with the exception of Bacillus cereus and Bacillus anthracis. Their primary habitat is the soil and,

due to their extreme heat-resistant spores, they can colonize different environments such as honey, food,

animals, insects, etc.

Bacillus속 종(種)은 Bacillus cereus와 Bacillus anthracis를 제외하고, 포유류에 해를 주지 않는 아주 흔한, 내생

포자형성 그람 양성 박테리아이다.  그들의 주요 서식지는 토양이며, 극도의 내열성 포자로 인해 꿀, 음식, 동물,

곤충 등과 같은 다양한 환경에 대량 서식할 수 있다.

In particular, different Bacillus subtilis strains are ingested in the diet as contaminants or as part of selected

fermented foods like nato- or probiotic supplements, available not only for humans, but also for animals [8],

[20], [40], [45]. They are also biologically and commercially important as producers of a great variety of

secondary metabolites such as antibiotics, bioinsecticides, enzymes and lipopeptides [11], [22], [29], [36].

특히, 다양한 고초균 균주는 식단에서 오염균 또는 나또 나 프로바이오틱 보충제와 같이 선택된 발효식품의

일부로 섭취가 되며, 이는 인간뿐만 아니라 동물에게도 유용하다. 그들은 또한 항생제, 생물학적 살충제, 효소

및 지질 펩티드와 같은 매우 다양한 2차 대사산물의 생산자로서 생물학적으로 그리고 상업적으로 중요하다.

주) probiotic(프로바이오틱) ; 인체에 이로운 미생물의 성장을 촉진하는

Paenibacillus larvae, a Gram-positive sporulated bacterium that causes the American foulbrood disease, is an

extremely contagious and dangerous pathogen of honeybees [47]. It only takes 10 spores to make a 24-h-old

larva ill [6], and economic loss in apiculture is substantial due to high mortality rates.

미국 부저병을 일으키는 그람 양성 포자형성 박테리아인, 패니바실루스 유생은 꿀벌의  매우 높은 전염성이 있고

위험한 병원균이다.  24시간 된 유충을 병들게 하는데는 10개의 포자만 필요하며, 높은 사망률로 인해 양봉의

경제적 손실은 상당하다.

Oxytetracycline has been used to control American foulbrood, but resistant strains have already been identified.

Chalkbrood is a fungal disease caused by the heterothalic ascomycete Ascosphaera apis that results in

mummified bee larvae.

옥시테트라사이클린은 미국 부저병을 억제하는 사용되었지만, 내성있는 균주는 이미 확인되었다. 백묵병은

heterothalic ascomycete Ascosphaera apis에 의해 발생하는 곰팡이 질병으로 벌 유충을 미이라처럼 바싹

마르게 만든다. 

Although it is not as serious as American foulbrood, since the spread of the fungus within a colony is limited,

pharmacological and chemical treatments have proved to be ineffective in controlling it because they fail to

kill the spores in the beehives [17], [23]. As the presence of these pathogens causes significant economic loss

to apiculture, natural approaches to controlling and preventing these diseases must be found.

미국의 부저병 만큼 심각하지는 않지만, 봉군내 균류의 확산이 제한적이므로, 약리학적, 화학적 처리는 벌통에

있는 포자를 죽이지 못하기 때문에 이를 억제하는데 효과가 없는 것으로 판명되었다.  이러한 병원균의 존재는

양봉에 상당한 경제적 손실을 초래하기 때문에, 이러한 질병을 억제하고 예방하기 위한 자연적인 접근법을

찾아야 한다.

Therefore, the aim of this work was to phenotypically and genotypically isolate and characterize Bacillus strains

associated with the bee intestine and/or honey and to determine their in vitro potential against P. larvae and

A. apis, with the purpose of exploring feasible biological control.

따라서,이 연구의 목적은 실현 가능한 생물학적 억제를 연구하기 위한 목적으로, 벌의 창자 및 / 또는 꿀과 관련된

바실루스 균주를 표현형 및 유전형으로 분리 및 특성화하고 부저병 및 백묵병에 대한 시험관내 잠재력을 측정하는

것이다. 

Figures

그림

Chromatographic profile by HPLC analyses of a crude mixture of surfactins produced by B. subtilis G2III

in MEL medium. A, sigma surfactin standard; B, G2III strain fraction.

MEL 배지(培地)에서 고초균 G2III에 의해 생성된 천연 그대로의 계면활성물질 혼합물의 HPLC 분석에 의한

색층(色層) 분석표.

A, 시그마 계면활성물질 표준;  B, G2III 균주 일부.

P. larvae Azul inhibition by direct contact with: A, surfactin fraction; B, cell-free supernatant (CFS). -ċ-

P. larvae Azul control; ⋯ B. subtilis subsp. niger C4; --- B. subtilis M1; – B. subtilis G2...

P.  다음과 같은 직접 접촉에 의한 패니바실루스 유생(부저병) Azul 억제 : A, 계면활성분수 ; B, 세포가 없는

상청액(CFS). -c- 패니바실루스 유생  Azul 억제, ⋯ 고초균 아종. 니제르 C4; --- 고초균 M1; – B. 고초균 G2...

•  Inhibition of A, A. apis M and B, A. apis B by cell suspensions of 1: Bacillus subtilis subsp. niger C4, 2:
• B. subtilis G2III and 3: B. subtilis M1.
• 1의 세포 현탁액에 의한 A, 백묵병 포자 M 및 B, 백묵병 포자 B의 억제 : 고초균 아종 niger C4, 2 : 고초균
• G2III 및 3 : 고초균 M1.

Section snippets

단면 분할 

Honeybee intestinal tract and honey sampling, culture media and growth conditions for Bacillus strain

isolation 

바실러스 균주 분리를 위한 꿀벌 장내관 및 꿀 샘플링, 배양 배지 및 성장 조건

Honey samples from Atamisqui, Morillos and Tartagal (northwestern Argentina towns) and independent

pools of the whole intestinal tract, midgut and posterior intestine of different honeybees from El Galpón

(Salta, Argentina) were homogenized in saline solution (0.85% w/v NaCl) [43].

아타미스키, 모릴로스, 타르타갈(아르헨티나 북서부 타르타갈)의 꿀 샘플과 엘 갈폰(아르헨티나 살타)의 서로

다른 꿀벌의 창자 내관, 중장, 후장의 독립된 풀은 식염수 용액에 균질화하였다[0.85% w/v NaCl]

The samples were carefully handled to avoid contamination either by environmental material or by the

external surface of the bee body. Each honey sample was dissolved with sterile distilled water and warmed

at 80 °C

샘플은 환경 물질이나 꿀벌 몸체의 외부 표면에 의한 오염을 피하기 위해 조심스럽게 취급되었다. 각 꿀 샘플을

멸균 증류수에 용해시키고 80 °C에서 데웠다.

Results and discussion

결과 및 토론

Innocuous bacterial strains that may produce antimicrobial substances are of great interest to confine or

inhibit different pathogens or spoilage microorganisms by natural means. With the exception of B. anthracis

and many B. cereus toxin-producer strains, Bacillus strains are considered safe.

항균 물질을 생산할 수 있는 무해한 박테리아 균주는 자연적인 방법으로 다양한 병원체 또는 부패 미생물을

가두거나 억제하는데 큰 관심이 있다.  B. 앤쓰라시스와 많은 B. 세레우스 독소 생산자 균주를 제외하면,

바실러스 균주는 안전한 것으로 간주된다.

The non-toxigenic species, as they do not harbor drug resistance genes and are non-pathogenic, are safe

and could be used for agricultural, veterinary and human purposes [13], [41], [46]. Within this

비 독성 종은 약물 내성 유전자를 가지고 있지 않고 병원성이 없기 때문에, 안전하며 농업, 수의학 및 인간의

목적으로 사용될 수 있다. 이 안에서

Acknowledgements

감사

This paper was supported by grants PICTR890/06 (ANPCyT) and PIP6472 (CONICET). M.C. Audisio is a member

of the Research Career of CONICET. D.C.

Sabaté thanks CONICET for her fellowships.Sabaté thanks CONICET for her fellowships. The authors wish to thank

Dr. Baigorí for his help with phylogenetic characterization of Bacillus strains isolated.

이 문서는 PICTR890 / 06 (ANPCyT) 및 PIP6472 (CONICET) 보조금으로 지원되었다. M.C. Audisio는 CONICET.D.C.

의 연구 경력 회원이다.  Sabaté는 CONICET의 동호인 모임에 감사드린다.

References (49)

생략

[하얀꽃잎새윤 ♡ 윤 순상 ♡ 청주]

모든 생물중
균들 ~~~ ㅋ
좋은균과나뿐균이 있다는듯 읽어봅니다,
저는 무엇의균을 죽이고
어떤균은 살려야 할지
아님 벌통안에있는 모든균들을 다~~~죽여가며 꿀벌을 키워나가야 하는지....
걱정.에 걱정을 또 않고
어라이 모르겠따~~~ ㅋ
청주에서 장흥으로 꿀벌들 이동이나 해야징 🎶
오늘도 고생하신 꿀벌나라님께 고개숙여 인~~~사
행복하세염!~~~^-*

[꿀벌나라]

감사합니다. 그런데, 겨울철에 이동이라.. 유기양봉에서는 겨울철 진동, 소음은 금기시하는데 좀 더 일찍안하시고..

[하얀꽃잎새윤 ♡ 윤 순상 ♡ 청주]

지금가면 딱 맞아요~~~^-*
그런데 눈이 오기에 조금 힘들뿐~~~ ㅋ
영광쪽 지나가니 흐리기만 하구용
해마다 이쯤이면 남쪽으로 이동합니다~~~^-*
언제나 응원하며
꿀벌나라님을 기다리는~~~♡
하얀꽃잎새윤