실험실 안전장비와 절차-펌

[atom]

3. 실험실 안전장비와 절차

3.1 실험실 안전 장비

 대부분 흔한 노출의 경로는 아래와 같다.

• 입

• 호흡기

• 피부 상처

• 피부 침투

• 눈의 결막

• 병원균의 매개체

  원인이 알려진 모든 감염의 65-75%가 호흡기 노출에 속한다. 생물학적 위험과 잠재적 감염성 물질을 다루는 작업자는 그것들과 관련된 위험을 알고 적절한 실험실 장비를 사용하여 불필요한 노출을 막는 것이 매우 중요하다.

  개인보호장비는 생물학적 위험 물질과 직접적인 접촉으로부터 보호한다. 개인보호 장비의 효과적인 사용은 작업하는 물질의 오염 가능성을 최소화하는 것이다.

  (1) 눈 보호

  옆면 보호대를 가진 보안경은 잠재적인 혈액, 체액 또는 시약류가 튀길 가능성이 있을 때 착용한다. 위의 상황이 확실하다고 판단되면 전용 고글을 착용한다. 콘택즈 렌즈 착용자는 눈과 얼굴 보호장구를 덮을 수 있는 적절한 덮개를 착용한다. 상황에 따라 안면 보호 장비로 대체 사용할 수 있다.

  (2) 안면 보호

  튀거나 스프레이가 확실하면 외과용 마스크와 보호 안경을 착용해야 한다. 이런 타입의 마스크는 에어졸에 대해서는 보호 받지 못한다. 턱 길이의 얼굴 보호 장비를 착용해야 한다.

  (3) 실험복

  실험복은 실험용 코트, 작업복, 세척복, 가운 등의 종류가 있다. 실험복을 선택할 때 중요한 점은 소매의 길이이다. 긴 소매의 옷은 피부 오염을 최소화한다. 부가적으로 액체가 튀길 가능성이 있다면 적절한 방수복을 착용하는 것이 좋다. 의류가 일회용이 아니면 오염이 되었을 때 멸균에도 견디어야 한다.

감염성 물질로 오염이 된 실험복은 그 지역을 떠나기 전에 제거하거나 폐기한다. 추가적으로 모든 오염된 의류는 실험실에서 버리든지 그 시설에서 세탁하여야 한다. 절대 집에서 세탁하지 않는다.

  (4) 장갑

  장갑은 위험 물질이 다루어지거나 노출 가능성이 있으면 착용해야 한다. 라텍스 장갑은 거의 구멍이 나지 않으며 비닐장갑보다 사용 실패율이 아주 낮다.  만일 라텍스에 민감하거나 알러지가 있으면 니트릴 또는 특별하게 세척된 라텍스 장갑과 같은 합성 장갑을 착용해 본다.

위험도가 높으면 두 개의 장갑을 착용할 수 있다. 일반 실험실은 한 겹을 착용하고 바이오안전 캐비넷에서 작업하는 경우 두 겹의 장갑을 착용할 수 있다.

위험 물질과 작업할 때 보호를 최대화하기 위해서 장갑은 짧은 소매를 덮어야 한다. 긴 소매를 가진 장갑 또는 일회용 팔 보호 장비를 착용할 수 있다. 유사하게 뜨거운 물질과 드라이아이스를 다룰 때 온도 저항 장갑을 착용한다.

오염되는 즉시 장갑은 버린다. 실험실 이외의 장소에서 절대로 착용하지 말고 일회용 장갑을 씻거나 재사용에 대한 미련을 버린다.

  (5) 방독면

  방독면은 감염성 에어졸에 대비하는 부가적인 보호 장비이다. 잠재적인 위험 환경에서 사용하기 전에 사용자는 자신에게 크기가 맞는 지 여부를 반드시 확인해야 하며 점검하여야 한다. 방독면은 크게 두 가지에 속한다.

공기정화 방독면은 필터, 카트리지, 여과통을 가지며, 이것들은 사용자에 도착하기 전에 오염된 공기가 공기 정화 물질을 통과하여 오염물질을 제거한다. 이 부류에는 3 가지의 공기ㆍ정화 방독면이 있다.

  • 공기 중에 먼지, 흄, 미스트 등의 입자를 잡는 미립자용 방독면

  • 미립자와 가스의 위험이 포함되는 환경에서 사용되는 혼합 방독면

  • 공기 중에 가스나 증기가 있을 때 사용하는 가스와 증기용 방독면

공기ㆍ공급 방독면은 바로 근원지에 깨끗한 공기를 공급한다. 이 방독면도 3 가지 종류가 있다.

  • 고압가스로부터 깨끗하고 안전한 공기를 옮기기 위해 호스를 사용하는 공기-공급용 방독면

  • 일차 공급이 실패하면 사용할 수 있는 공기 보조장치를 가진 겸용 방독면

  • 착용할 수 있는 크린-공기 공급팩으로 구성된 공기 주입가능 호흡 방독면

3.2 바이오 안전 캐비넷(Biosafety Cabinets, BSC)

  바이오안전 캐비넷은 적절한 수행과 절차를 준수할 때 사용자, 환경, 생산물의 보호를 위해 설계되었다. 그것들은 안전한 미생물 취급에 꼭 필요한 바이오안전 프로그램의 한 부분이다. 3 종류의 BSC가 있고, Class I, Class II, Class III로 구분하여 다양한 요구에 맞게 개발되어 왔다.

  (1) BSC의 역사

  미생물분리박스의 개발은 1909년도이다. 미리 필터된 공기가 캐비넷으로 들어가고 배출된 공기는 소독 용액이 담긴 플라스크로 통과한다. 1943년에 최초의 현대적인 바이오안전 캐비넷은 Van Den Ende에 의해 개발되었다 이 디자인은 배출관에 가스버너가 장착되어 있다. 이것의 목적은 버너가 작동되면 캐비넷을 지나는 공기의 내부 흐름이 발생되고 외부로 나가기 전에 미생물이 소각된다. 1953년에 배출 필터가 바이오안전캐비넷에 포함된다. 하지만 이러한 필터는 glass wool이나 면으로 되어 있어서 기껏해야 96%의 효율성을 보였다. 이것은 배기가스가 소각되어 외부로 빠져 나가게 된다. 작업장에 공기의 재순환도 여전히 불가능하였다.

  1962년에 고효율미세필터(High Efficiency Particulate Filter, HEPA)가 개발되었다. 이 필터는 99.5-99.99%의 효율성을 가진다. 작업자에 공기가 다시 재순환시키고 현재의 Class I, Class II, Class III 형태의 캐비넷을 개발하는 데 중요한 역할을 한다.

현재 3 종류의 바이오안전 캐비넷이 규정되어 있다. Class I 은 앞면 개방형 공기 유입 캐비넷(open-front air inflow cabinet)이며 보통 고정된 높이의 작업 가능 개방구로 구성되어 있다. Class II는 앞면이 개방형이고 수직 기류 캐비넷(vertical airflow cabinets)이며 여러 개의 타입의 캐비넷으로 분류된다. Class III 캐비넷은 가스가 통하지 않는 공기 잠금 시스템으로 밀폐되어 있으며 고정되고 튼튼한 팔 길이의 고무장갑을 통해서 작업이 수행된다.

  세 가지의 캐비넷은 바로 바이오안전수준(BSL)과 관련되어 있지 않다. Class I과 II캐비넷은 BSL1-3에서의 작업을 위해 사용할 수 있다. Class III 캐비넷은 BSL 4에 작업을 위해 마련되었다.

  (2) HEPA 필터

  HEPA필터는 boron silicate의 초미세합성섬유로 구성된 얇은 시트이다. 필터 종이는 주름이 잡혀 있으며 이것은 표면적을 늘린다. 물결 모양의 알루미늄 격리판이 주름 사이에 놓여져 있어서 공기가 전체 필터 표면을 통과할 수 있게 한다. 미세 필터인 헤파 필터는 공기 중의 입자나 미생물을 거르게 되고 가스는 자유로이 필터를 통과할 것이다. 필터 과정은 5 가지 뚜렷한 메카니즘을 통하여 이루어진다.

 i) 침강 (sedimentation)

 ii) 정전기 인력 (Electrostatic attraction)

 iii) 간섭 (interception)

 iv) 관성 충돌 (inertial impaction)

 v) 확산 (diffusion)

  가장 낮은 효율성의 메카니즘은 침강과 정전기 인력이다. 침강은 입자가 중력에 의해 여과지에 머물 때 일어난다. 정전기 인력은 여과지의 전하와 반대 전하를 띤 입자는 여과지에 접근하였을 때 여과지 쪽으로 끌려가게 되는 것이다.

  간섭, 관성 충돌, 확산은 헤파 필터가 공기의 오염물을 제거하는 주요 메카니즘이다. 간섭은 입자의 크기에 의존하고 공기 기류가 여과지의 표면 위에 도달할 때 입자가 포획된다. 관성 충돌에서 작은 입자는 공기 유선에 따라 이동하며 그 방향이 바뀌어도 유선을 따라 이동한다. 그러나 입자의 크기가 커질수록 운동량은 커지게 되며, 따라서 입자는 유선의 방향이 바뀔 때 유선으로부터 벗어날려는 경향이 있다. 운동량이 충분히 클 때 운동하는 입자는 방향을 바꾸지 않으려고 하고 여과지에 부딪히게 된다. 이 기전이 관성충돌이다. 확산은 보다 작은 입자는 공기유선에 따라 운동하다가 여과지에 접근하였을 때 브라운 운동(Brownian motion) 또는 확산(diffusion)에 의해 입자가 여과지 쪽으로 이동하게 된다. 브라운 운동은 기체분자(gas molecules)가 입자에 충돌하여, 그 결과 일어나는 입자의 운동이다. 이것은 입자가 여과지표면에 무작위로 배치되도록 한다. (그림1)

  헤파 필터는 0.3 마이크론의 크기를 가진 입자를 여과하는 능력에 따라 등급이 정해 진다. 헤파 필터는 일반적으로 Dioctyl phthalate (DOP)를 사용하여 테스트한다. DOP가 공기 분무기에 의해 충돌되면 에어졸이 평균 0.3 ㎛의 입자크기로 발생한다. 헤파 필터의 하류 측면이 광도계로 검사된다. 그 여과지가 최초 10,000 개의 입자의 농도 중 1 개나 그 이하의 입자가 투과되면 99.99%의 효율성을 가진다고 할 수 있다.

대부분의 에어졸의 방울은 0.3 ㎛ 이상이다. 이것은 단일 바이러스나 박테리아성 세포의 입자가 에어졸로 존재하지 않을 것이기 때문이다. 이 에어졸 입자는 세포 덩어리로 이루어지고 액체의 형태로 되어 있다. 따라서 이러한 방울의 여과 효율성은 실제적으로 헤파 필터의 등급화된 퍼센트보다 훨씬 높다.

  (3) Laminar Flow Hoods (Clean Air Benches)

  이 후드는 오직 실험대상물을 보호할 때 사용하고 바이오위험이나 화학적인 위험이 있는 작업은 절대 하지 않는다. 이 후드는 헤파 필터로 여과된 공기의 층흐름(laminar flow)을 만들어 작업 표면을 가로질러 무균 작업 환경을 제공하기 때문에 정작 실험자 자신은 어떠한 잠재적인 감염성 에어졸에 노출되게 된다. 이 후드는 실험대상이 실험자에게 무해할 경우 사용해야 한다.

  이 클린 벤치는 헤파 필터로 통과된 대략 100 lfpm (0.5 m/s)의 공기 흐름은 어떤 장애물이 없다면 여과된 몇 피트의 기류로 인하여 입자 없는 환경을 제공한다. 이를 laminar flow라고 부르고 섞이지 않은 공기의 흐름을 뜻하며 작업 결과물을 보호하기 위해 clean room 또는 Clean benches에서 사용된다. (그림 2)

                    

그림1.

               

                                   그림2

수평적인 공기 흐름을 가진 작업대는 거의 무균 작업 공간을  제공하기 위해 수년간 세포 배양 실험실에서 사용되어 왔으나 작업자 안전은 제공하지 못하고 감염성 물질의 에어졸에 노출될 수 있다. 이러한 형태의 캐비넷은 미생물 실험실에는 부적합하다.

  (4) Class I Cabinets

  Class I cabinet은 개인과 환경 보호를 보장하는 환기 캐비넷 (ventilated cabinet)으로 정의한다. 공기 흐름은 작업자로부터 멀어지고 캐비넷의 작업지역에 들어오기 전에 헤파 여과되지 않는다. class I 캐비넷은 바이오위험성 물질의 가능한 방출로부터 외부 환경을 보호하기 위해서 배출 시스템에 헤파 여과지가 존재하는 것을 제외하면 흄 후드의 디자인과 유사하다. 작업자는 75～100 fpm의 내부 유속을 가진 공기 커튼에 의해 작업 지역에서 만들어진 에어졸로부터 보호 받는다. 

  Class I 캐비넷은 결과물에 대한 안전은 보장하지 않기 때문에 제한을 받는다. 대부분의 경우 그것들은 작업자의 보호가 유지될 필요가 있는 연구용 동물이 있는 실험실에서 사용한다. 이 캐비넷의 공기 흐름은 앞쪽 작업 개방면으로 방의 공기가 들어 가고 작업대를 지나서 송풍기를 지나 고효율 여과지를 통해서 나가게 된다. 그 캐비넷은 작업에서 작업자의 안전을 보장할 수 있고 전기 소각로, 가스버너, 소형 원심분리기 등의 사용이 가능하다. 스테인리스 강철과 방열 플라스틱 등으로 만들어질 수 있으며 보통 길이는 0.9 m -1.8 m 까지 가능하다. (그림3)

                                     그림3

적절한 작업자의 안전을 보장하기 위해서는 내부 공기 유속이 75～125 lfpm (0.38 ～ 0.63 m/s)을 유지하여야 한다. Class I 캐비넷은 작업자 또는 환경으로부터 작업의 안전 보장을 제공하지 않는다. 깨끗한 공기를 공급하지 못하는 실험실 또는 작업자의 오염이 작업 결과물에 영향을 줄 수 있는 세포 배양 작업에 있어서 Class I 캐비넷은 사용하지 않을 수 있지만 class I 캐비넷은 경제적이고 쉽게 설치 가능하며 방사성 동위원소나 독성 화학약품을 사용할 수 있고 특별한 절차의 요구에 만족하는 다양한 형태에 적용 가능하다는 점에서 많은 장점이 있다.

  (5) Class II Cabinets

  class II cabinets 은 개인, 결과물, 환경 등의 보호를 보장하는 캐비넷으로 정의한다. 개인 보호는 공기 커튼을 발생하는 내부공기 흐름으로 가능하다. 결과물 보호는 헤파 여과된 공기의 아래쪽으로 흐르는 laminar flow에 의해 유지된다. 환경 보호는 모든 배출 공기가 헤파 여과되어 배출된다.

사용자 입장에서의 Class I과 II의 주요 차이점은 Class II vertical laminar-flow 생물 캐비넷이 수행하는 작업과 작업자에 대한 보호를 할 수 있다는 점이다.

  (6) Class II Cabinets의 종류

IIA와 IIB의 두 가지 형태가 있다. 일반적으로 IIA 캐비넷은 앞면 작업 개방 지역을 통과하는 내부 유속이 최소 75 lfpm (0.4 m/s)로 유지되고 작업 표면을 통과하는 공기의 대략 70%가 재순환한다. 반면에 Class IIB 캐비넷은 100 lfpm(0.5 m/s)의 내부 유속을 유지하고 작업 표면을 통과하여 외부로 나가는 공기의 70% (type B1) 또는 100% (type B2)가 방출된다.

class II 캐비넷의 4 가지 주요한 기능적인 종류는 캐비넷 내부에서 재순환하는 공기의 양에 따라 결정되고 공간의 충만 상태(plenum)가 음압(negative pressure)인지 양압(positive pressure)인지에 따라 분류된다.

  (7) Class II Type A Cabinets

Type A 캐비넷은 휘발성 독성 화학약품과 휘발성 방사성핵종이 없는 바이오위험 물질을 다루는 작업에 적당하다. 헤파 여과지를 통과하여 70%가 다시 재순환한다. 오염 공기의 30%가 배출 헤파 여과지를 통과된다. (그림4)

          

                                              그림4.

공기가 안으로 들어가서 재순환 또는 배출 여과지까지 도달하고 출구 여과지는 작업대와 방으로부터 오염된다. 그 이유로 공기 plenum은 공기가 새지 않아야 하고 누출이 방지되어야 한다. 캐비넷 안에 공기의 상당한 부분(70%)이 공급 여과를 통하여 재순환되기 때문에 Type A 캐비넷은 일반적으로 고방사능 물질이나 독성 및 발암성 화학 약품의 사용에 적절하지 못하다. Class IIA 캐비넷의 근본적은 요소는 헤파-여과된 laminar flow 순환된 공기라는 점이다. 이 공기가 작업 지역의 전면을 걸쳐 아래쪽으로 흐르고 개방된 앞쪽면의 공기는 아래로 흡입되어 작업 표면으로부터 멀어지고 캐비넷에 있던 공기는 HEPA 여과지를 거쳐 방이나 외부 공간으로 방출된다. 캐비넷 안에 송풍기는 재순환 공기 여과지와 배출 공기 여과지 모두에 공기를 강압적으로 보내고 예상되는 작동이 이루어지 위해서는 신중한 공기의 균형이 성취되어야 한다.

  (8) Class II Type B Cabinets

 Class IIB 캐비넷의 최소 평균 내부 유입속도는 100 lfpm (0.5 m/s)이고 건물 외부에 재순환되지 않는 높이와 위치에 전용의 외부 배출을 위해 튼튼한 배출 시스템을 갖추어야 한다. B1, B2, B3의 3가지 종류가 있다. class IIB1 캐비넷은 오염되지 않는 재순환된 유입공기 통로와  작업 지역 뒤쪽으로 가는 공기는 헤파 필터 후에 바로 외부로 배출하는 지역으로 크게 구성된다. 이 캐비넷은 음압하에(negative pressure) 모든 생물학적으로 오염된 duct와 plenum을 가지며 내부 유속은 100 lfpm (0.5 m/s)를 가진다. 그 캐비넷은 미생물 작업과 낮은 수위의 방사성 동위원소와 제한된 독성 화학약품의 양의 작업에 유용하다.

Type IIB2는 디자인에 있어서 유사하지만 캐비넷에 들어오는 모든 공기는 HEPA 여과지를 통해 외부로 배출되기 전에 캐비넷을 지나 오직 한 곳만을 지나도록 만든다. 개방된 앞쪽면의 내부 유입 속도는 평균 100 lfpm (0.5 m/s) 또는 그 보다 높은 속도를 가진다. 미생물 연구에서 요구되는 독성 물질이나 방사성핵종의 제한된 적은 양의 작업을 수행하는 데 적당하다.

    Class IIB3는 Type IIA 캐비넷의 정의와 유사하다.

  (9) Class II Type B1 Cabinets

  Type B1 캐비넷은 작업 허용 개방면을 통해 100 lfpm의 최소 평균 유입속도를 유지한다. 아래 그림에서 보는 것처럼 아래쪽에 헤파-여과된 laminar flow로 인해 결과물의 보호를 보장한다. 배출 공기는 전용 덕트를 거쳐 외부 환경에 빠져나가기 전에 HEPA 여과지를 지난다. 배출 공기의 양은 70%이다.(오염 공기의 30%가 공급 HEPA 여과지를 지나 재순환된다.) 모든 생물학적으로 오염된 plenum과 duct는 음압하에 있으며 음압 ducts와 plenum에 의해 둘러싸여 있다. 이것은 누출이 일어날 가능성에서 작업자를 보호한다. (그림5)

   Type B1 캐비넷은 매우 소량의 미생물, 독성물질, 방사성핵종을 다루는 데 적합하다.

            

                                           그림5

  (10) Class II Type B2 Cabinet

  이 캐비넷은 완전배출캐비넷(total exhaust cabinet)으로 언급된다. 캐비넷 내부에 작업 표면에 공기의 재순환은 없다. 모든 공급 헤파 여과된 공기가 흡입되어 방출된다.

모든 오염된 공기와 작업 허용 개방면으로 들어온 공기는 곧바로  HEPA 여과지를 거친 후에 전용 환기 시스템을 통하여 외부로 배출되어 진다. Type B1 캐비넷처럼  음압하에 plenum과 duct를 가진다.

이 캐비넷은 독성 화학약품과 방사선핵종을 다루는 생물학적 인자를 다루는 데 사용할 수 있고 항종양이나 항암제등을 다루는 약학에서 사용한다.

             

                                         그림6.

  (11) Class II Type B3 Cabinet

 이 캐비넷은 개조 가능한(convertible) 캐비넷이다. 모든 생물학적으로 오염된 plenum과 duct는 음압하에 있거나 음압으로 둘러싸여 있는 type B와 type A의 캐비넷에 상호 교차된다. (그림7)

이 캐비넷은 type A처럼 공급 필터를 통해 공기의 70%가 재순환된다. 따라서 Type B3 캐비넷은 매우 미세한 독성 화학물질과 방사성핵종의 극소량을 다루는 생물학적 인자를 다루는 작업에 적합하다.

             

                                          그림7.

  (12)  Class III Cabinet (Specialized Glove Box)

대부분의 경우 Class III 캐비넷 시스템은 극도로 위험한 작업에 적합한 완전하게 용접 

                                  그림8.

밀봉된 캐비넷 시스템으로 구성되어 있다. 그 캐비넷은 가스가 새지 않으며 모든 작업은 팔 길이의 고무장갑을 통해서 수행한다. (그림8)

캐비넷안의 출입은 보통 밀봉된 공기 안전장치를 통해서 이루어지고 물질의 배출은 고압 증기 멸균기, 멸균 타입의 공기 안전장치 또는 액체 소독제로 채워진 탱크를 통해서 이루어질 수 있다.

이러한 캐비넷은 모듈로 세워지거나 실험실 안에 모든 작동이 가능한 세트를 포함하는 시스템이나 특별한 라인으로 구성되기도 한다. 이상적으로, 작업자는 필요한 재료를 캐비넷 시스템에 넣고 작업을 수행하고 폐기물을 제거할 수 있어야 한다. Class III 캐비넷 또는 글러브 박스(Glove Box)에서 위험하거나 매우 긴 반감기를 가진 방사성 동위원소를 사용하면 추가적인 보호 장치나 재킷을 제공할 수 있다.

이것의 단점은 장비, 설치, 유지 관리의 비용이 비싸다. 캐비넷 안에서 실제 작업이 이루어지기 전 준비단계가 포괄적이고 작업이 상대적으로 두꺼운 팔-길이 장갑의 사용에 의해 훨씬 어려워질 수 있다. 하지만 그 캐비넷은 매우 높은 안전 보장이 작업자와 환경에 요구되면 매우 유용하다. 적절한 훈련을 받은 실험자는 고정된 장갑을 통해 작업하는 한계에 익숙해져야 한다.

3.3 BSC의 사용 가이드라인

  사용자, 작업 지역, 주위 환경에 최대의 안전을 보장하기 위해서 제작업체의 지침서를 언제나 준수한다. BSC를 사용하는 개인은 적절한 훈련을 받아야 하며 안전 지침서는 캐비넷에 가까운 장소에 비치되어 있어야 한다. 아래는 작동에 대한 일반적인 가이드라인이다.

  (1) 시작

① 필요하면 실험실에 들어가자마자 자외선 멸균기를 끈다.

② 모든 송풍기와 캐비넷 조명을 켠다.

③ 정화시스템을 약 5분 정도 작동시킨다. 흐름 경보기와 시청각 경보 기능을 체크한다.

④ 의심 위험 물질이 존재하는 경우 멸균한다.

  (2) 정지

① 내부 작업 지역의 모든 불필요한 항목들은 멸균하고 제거한다. 저장고로 사용하지 않는다.

② 의심 위험 물질이 존재하는 경우 멸균한다.

③ 있다면 자외선 소독기를 켠다.

④ 정화시스템을 약 5분 동안 가동시킨다.

⑤ 캐비넷 송풍 시스템을 끈다.

  (3) BSC는 저장고로 사용하지 않는다.

   • 해마다 점검한다.

3.4 흄 후드

  흄 후드는 화학약품이나 가스의 노출로부터 실험자를 보호하는 데 사용한다. 흄 후드는 HEPA 필터가 장착되어 있지 않다. 바이오위험 물질은 흄 후드에서 사용하지 않는다.

3.5 원심분리기

  기기적인 결함을 최소화하기 위해 원심분리기를 사용할 때 제조업자의 지침서를 준수한다.

원심분리기를 사용하는 개인은 적절하게 교육을 받아야 하며 안전 지침서는 그 주위에 비치한다.

에어졸은 원심분리기용 튜브를 채울 때, 마개나 뚜껑을 제거할 때 발생한다. 아래의 리스트는 바이오위험 물질을 원심 분리할 때 에어졸의 발생을 최소화하기 위해 관찰해야 하는 가장 효과적인 사용 방법과 테크닉에 관한 목록이다.

① O-링으로 밀폐된 버킷(bucket)과 밀봉 튜브를 사용한다. 원심분리기를 사용할 때 튜브,

   O-링, 버킷을 조사한다. 튜브를 씌우기 위해 알루미늄 호일을 사용하지 않는다.

② 바이오 안전 캐비넷 안에서 원심분리기 튜브, 로터, 부속품을 열고 채운다. 넘치지

   않도록 한다. 튜브가 채워지고 밀봉되면 살균제로 겉을 닦는다.

③ 만일 깨지는 경우 그 물질을 소독하기 위해 튜브와 버킷사이의 공간에 소독제를 넣는다.

④ 언제나 원심 분리기 작동 전에 버킷, 튜브, 로터의 균형을 맞춘다.

⑤ 만일 원심 분리 튜브의 내용물이 바이오 위험 물질이면 BSC 안에서 튜브가 자신을 향하지

   않도록 하여 연다.

⑥ 다시 침전물을 띄울 경우 BSC에서 작업한다. 반드시 필요하면 물질을 흔들고 튜브를 열기

   전에 에어졸이 진정되도록 몇 분을 기다린다.

⑦ 작고 느린 속도를 가진 원심분리기는 에어졸이 벗어나는 것을 줄이기 위해 BSC안에서 사용할    수 있다. 아주 빠른 속도를 가진 원심분리기는 진공라인에서 배출공기를 필터하는 데 매우    신중한 주의가 필요하다.

⑧ 바이오위험 물질은 셀룰로이드 튜브의 사용을 금한다. 튜브는 매우 가연성이고 수축하기

   쉽다. 또한 열에 민감하고 고압 멸균기에서 매우 폭발성이 있다.

3.6 고압증기멸균기(Autoclaves)

 고압 증기 멸균은 폐기물을 처분 전에 폐기물과 바이오위험 폐기물을 비감염성 폐기물로 만드는 데 사용된다. 고압 증기 멸균된 폐기물은 더 이상 위험한 성질을 포함하지 않으면 의학 고체 폐기물과 같이 버리면 된다.

① 스팀 멸균기는 표준 작동 절차를 준수한다. 시간, 온도, 압력, 폐기물의 형태, 용기의 타입,    용기의 잠금, 쌓는 패턴, 물 내용물과 최대 적재량

② 전체 적재량의 멸균을 성취하기 위해서는 적재량의 밀집과 양에 의존하여 30분 이상

   120^oC 까지 온도가 도달하였는지 기록하거나 점검하여야 한다. 온도계는 해마다 보정하여

    점검한다.

③ 적절한 멸균 조건의 상태를 확신하기 위하여 최소 매월 적재의 중앙에 생물학적 지시약

   (Bacillus stearothernophilus)을 사용하여 표준 작동 상태를 유지한다.

④ 특정 절차에 대한 기록을 유지한다.

⑤ 고압멸균기의 작동에 대한 로그북을 기록한다.

   (날짜, 양, 작동자, 무게, 최고 온도에서 멸균시간)

⑥ 액체를 가진 용기류는 가열 동안 폭발하지 않도록 뚜껑을 느슨하게 하고 절대 밀봉하지

   않는다.

⑦ 폭발 가능성 때문에 어떠한 가연성 또는 휘발성 액체를 그 안에 넣지 않는다.

⑧ 방사능 물질을 넣지 않는다.

⑨ 뜨거운 병류는 충격이 가지 않도록 한다.

⑩ 용기는 2/3이상 채우지 않는다.

3.7 표시(Signs)

  바이오위험을 나타내는 표지가 조직배양실의 출입구나 실험실의 출입구에 선명하게 나타내어야 한다. 이 표지는 문자와 심볼을 가진 형광의 오렌지-빨간색으로 표시하여 사용중인 바이오위험 물질의 이름을 알린다.  국제 바이오 위험 상징을 나타내는 문구 “BIOHAZARD" 또는 ”BIOHAZARDOUS Waste" 는 색깔과 대조적으로 나타내어야 하며 각각 위험 물질의 용기에 부착하여야 한다.

전용 봉투(bag)와 날카로운 물질의 용기는 건물명, 실험실 번호, 연락처 등이 포함된 표지를 하여야 한다. 라벨은 사용 전에 부착하여 사용한다.