HPLC(액체크로마토그래피)와 화합물의 사상체질(四象體質)
HPLC(고성능액체크로마토그래피,high performance liquid chromatography)는
혼합물의 시료에 매질을 사용하므로써, 그 매질내의 혼합물 이동 속도의 차이를 이용해 그 성분을 분리하고 또한 분석하는
장치입니다.
크로마토그래피는 칼럼내의 고정상(칼럼,분리해주는 장치,매질)과 시료간의
작용에 따라 흡착형, 분배형, 이온교환형, 크기배제형 등으로 분류합니다. 고정상(칼럼)으로는 실리카겔, 활성탄, 산화알루미늄, 이온교환체 등을
사용합니다. 이것은 시료를 분리해내는 역할이고 시료의 분석은 주로 UV검출기와 차동굴절계, 전도도측정기에서 이루어 집니다.
흡착크로마토크래피에서는 고정상인 칼럼에 극성 흡수제인 실리카겔,
산화알루미늄, 산화마그네슘에 대해 용리액(이동상)으로 무극성용매와 헥산, 염화메틸렌과 같은 약간의 극성용매가 함께 사용됩니다.
흡착크로마토그래피는 분리해내려고하는 용액이 고정상을 지나갈때 고정상과 이동상용매 사이의 흡착되는 시간차에 의해 시료가 분리됩니다. 고정상은
시료를 칼럼내에서 분리해내는 역할을 하고, 이동상은 분리된 시료를 순차적으로 꺼내는 역할을 합니다.
분배크로마토그래피는 시료의 혼합물이 서로 섞이지 않는 상태일때 고정상
역할을 하는 액체와 이동상 역할을 하는 용질의 분배 비율의 차이를 이용하여 시료의 성분을 분리해내는 장치입니다. 분배크로마토그래피의 경우 극성이 큰 고정상(칼럼)과 이것보다 극성이
작은 이동상 용매를 조합시킬 경우를 순상크로마토그래피(normal-phase), 그리고 반대로 이동상보다 극성이 낮은 고정상을 쓰는 경우로
역상크로마토그래피(reversed-phase)로 분류됩니다.
극성분자는 물에 잘녹으며 전자가 고르게 분포되어 있지 않아 극(N극,
S극)을 띱니다. 반면 비극성분자는 물에 잘않녹으며 전자가 고르게 분포되어 있어 극이 상쇄되어 극을 띠지 않습니다. 따라서 분자들은 결합할때
전자의 상태에 따라 극성을 띠거나 비극성을 띱니다. 극성이란 자성(자석)을 갖는다는 의미입니다.
<그림출처
: chemwiki>
분자들은 보통
단독적이 아니라 서로 결합되어 있습니다. (a)는
전자배치(전기음성도)가 방향성이 없어서 비극성이고, (b)는 전자배치가 한쪽으로
쏠려 방향성을 갖아 극성(자성)입니다. (a)와 (b)는 각각 비극성공유결합,
극성공유결합입니다. 반면에 (c)는 이온결합인데, 금속인 +이온과 비금속인 -이온의 결합입니다. 이온결합은 물에 잘녹아 (b)처럼
극성을 띠지만 전하(전자)의 편차가 크지않아(기본적으로 나트륨은 수소보다 전자수가
많음) 강한 극성은 아닙니다. 따라서 이온결합은 (a)와 (b)의 중간적인 특성을 갖습니다.
이온교환형이나
분배형, 흡착형이나 크로마토그래피의 기본원리는 고정상매질과
이동상용매의 다양한 종류와 역할의 차이일뿐
근본원리는 크게 다르지
않습니다.
<그림출처 :
water.com>
이온교환크로마토그래피에서 주로 사용되는 고분자인 단백질 분자(펩타이드
결합)들은 분자의 결합방식에 따라 산과 염기 즉, +와 -의 성질을 갖게 됩니다. 컬럼에 고정된 전하 예를들면
양이온교환고정칼럼에 아미노산(단백질)용액을 부으면 가장 -가 강한 아미노산은 가장 먼저 분리되고 가장 +가 강한 아미노산은 가장 나중에 분리되는
원리입니다.
<전기음성도와 그에따른 원소들의
결합 방식>
전자에 의한
음양허실(陰陽虛實)에 의해 원자와 분자는 결합하며,
결합을 하게되더라도 음양허실(陰陽虛實)의 특성을 잃지
않습니다.
원소들 뿐만아니라 그들의 결합체인 (고분자)화합물들도 이러한 특성을
가지고 있는다는 것을 HPLC를 통해 알 수
있습니다.
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오랜만에 봄니다......
액체 크로마토그래프.
혼합물의 시료에 매질을 사용해서....
그 매질내 혼합물 이동 속도의 차이를 이용해서 그 성분을 분리하고, 분석하는 장치이다.