|
선인장 생시료 (g) | |
수분 (g/100 g) |
95.76 ± 0.56 |
조섬유 (건물량, g/100 g) |
0.81(16.2) |
비타민 C (mg/100 g) |
2.28 ± 0.14 |
무기질 |
0.3 ~ 2.0 |
총 페놀 |
2.32 ± 0.01 |
폴라보노이드 |
0.03 ± 0.05 |
계 |
100 |
선인장의 무기질 함량
선인장 (mg/100g) |
중량% 비율 | |
K |
214.8 |
24.54% |
Ca |
262.9 |
30.04% |
Mg |
65.9 |
7.53% |
Na |
272.7 |
31.16% |
F |
17.4 |
1.99% |
Fe |
26.3 |
3.00% |
Mn |
0.7 |
0.08% |
Se |
- |
- |
Al |
15.5 |
1.77% |
계 |
875.3 |
100.00% |
2. 총 페놀 및 폴라보노이드 정량
총 페놀 함량은 Folin-Denis법에 따라 추출물 1mL에 Folin-Ciocalteau 시약 및 10% Na2CO3 용액을 1mL씩 차례로 가하여 혼합한 다음, 실온의 암실에서 1시간 반응시킨 후 700nm에서 분광 광도계 (Spectrophotometer)를 이용하여 흡광도(Absorbance)를 측정하였다. 표준품으로 gallic acid (Sigma Co., USA)를 사용하여 시료와 동일한 방법으로 분석하여 얻은 정량선으로부터 총 페놀 함량으로 계산하였다. 폴라보노이드 함량은 Moreno 등의 방법에 따라 정량하였으며, quercetin (Sigma Co., USA)을 표준 물질로 하여 얻은 표준 정량선으로부터 총 폴라보노이드 함량으로 계산하였다,
선인장의 총 페놀 및 폴라보노이드 함량
선인장 생시료(mg/100 g) | |
총 페놀 |
2.32 ± 0.01 |
폴라보노이드 |
0.03 ± 0.05 |
Extract 25 g by 50 mL with 70% methanol
선인장 추출물의 총 페놀 및 폴라보노이드 함량은 표 3과 같다 총 페놀 함량은 2.22 ± 0.01 mg/100g 이었고, 폴라보노이드 함량은 0.03 ± 0.05 mg/100 g으로 상당히 낮은 함량이었다. 이러한 결과로 선인장 추출물의 항산화 활성은 매우 낮을 것으로 추정된다.
3. DPPH 라디칼 소거활성 측정
DPPH 라디칼 소거능은 Blois 방법에 따라 일정 농도의 시료 추출물과 DPPH 용액(5mg/100 mL methanol)을 동량으로 혼합한 다음, 실온에서 20분간 반응시킨 후 525 nm에서 흡광도를 측정하였다. 소거능은 시료 첨가구와 무첨가구의 흡광도 비(%)로 나타내었다.
선인장 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성 (%)
Extract by 50 mL with 70% methanol | |||
|
5 g |
10 g |
25 g |
50 % 희석액 |
9.63 ± 0.91 |
14.20 ± 0.88 |
56.50 ± 0.92 |
원액 |
15.68 ± 0.51 |
24.14 ± 0.51 |
79.39 ± 0.31 |
선인장 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성 (%)
12.5% |
25% |
50% |
원액 |
16.54 ± 0.22 |
27.74 ± 0.47 |
51.43 ± 0.28 |
79.85 ± 0.32 |
25 g 선인장 메탄올 추출물의 DPPH 라디칼 소거활성을 12.5 ~ 100% 범위의 농도 조건에서 측정한 결과는 표 4 및 표 5와 같다. 선인장 시료의 첨가 농도가 높아질수록 항산화능은 증가하는 경향을 보였으며 특히 50% 추출물과 원액의 경우 각각 51.44% 및 79.85%로 50% 이상의 소거능을 나타내었다, 한편, 후술하는 바와 같이, 동결 건조된 본 발명 선인장인 하은초의 메탄올 추출물이 83%의 소거능력을 보였으므로, 본 실험과 유사한 결과를 보였다.
알로에 추출물이 알로에 껍질을 제외한 겔만을 이용한 다당체에 비해 상대적으로 높은 억제율을 보였으며 이는 생리활성 물질이 껍질에서 발견되는 것과 상관관계가 있는 것으로 보고된 바 있는데 본 실험에서 껍질을 제거한 후 추출한 것을 감안하다면 선인장의 항산화능은 더 높을 것으로 기대된다
4. ABTS 라디칼 소거활성 측정
ABTS 라디칼 소거능은 Ro 등의 방법을 따랐으며, 7 mM ABTS 용액에 potassium persulfate를 2.4 mM이 되도록 용해시킨 다음, 암실에서 12 ~ 16 시간 동안 반응시킨 후 415 nm에서 흡광도 값이 약 1.5가 되도록 증류수로 조정하여 사용하였다. 농도 조정된 ABTS 용액 100 µL 에 추출물 50 µL를 가하여 실온에서 20분간 반응시켜 415 nm에서 흡광도를 측정하여 시료 첨가구와 무첨가구의 흡광도 비(%)로 나타내었다.
선인장 추출물의 ABTS 라디칼 소거 활성 (%)
Extract by 50 mL with 70% methanol | |||
|
5 g |
10 g |
25 g |
50 % 희석액 |
9.33 ± 0.13 |
19.40 ± 0.79 |
47.51 ± 0.1,0.3 |
원액 |
17.55 ± 0.43 |
27.31 ± 0.14 |
75.51 ± 0.14 |
5, 10g 선인장 추출물에 비해 25g 추출물이 월등히 높은 항산화능을 보였으며 25% 메탄올 추출물의 경우 시료의 첨가 농도가 증가함에 따라 ABTS 라디칼 소거능은 증가하는 경향을 보였다, 특히 원액의 경우 표 7과 같이, 약 75%의 항산화능을 보여 DPPH와 유사한 결과를 나타내었다,
5. 환산력 측정
환산력 측정은 Oyaizu의 방법에 따라 선인장 추출물 1 mL에 200 mM의 인산 완충액(pH 6.6) 및 potassium ferricyanide 1 mL를 차례로 가하며 50℃의 수욕상에서 20분간 반응시킨 후 10% TCA 용액 1 mL를 가하여 반응을 정지시키고, 5,000 rpm에서 5분간 원심분리하였다. 상징액을 1 mL 취하여 증류수 및 0.1% ferric chloride 용액을 동량으로 혼합한 후 700nm에서 흡광도를 측정하였으며, 서로의 환원력은 흡광도의 값으로 나타내었다.
선인장의 이화학적 성분을 분석한 결과는 표 1 및 표 2와 같다. 수분 함량은 95.76%, 조섬유의 함량은 0.81g/100g(dry base: 16.2g/100g)로 Han 등1)이 보고한 선인장 줄기 동결 전조 분말(8.49%)보다 2배 이상 높았다. 비타민 C는 2.28 mg/100g이었고, 선인장의 무기질 함량은 Na, Ca, k, Mg 순으로 많았다.
여기서, 환산력은 환원력과 같은 의미이다.
선인장 추출물의 항산화능 측정
12.5% |
25% |
50% |
원액 |
14.30 ± 0.07 |
25.70 ± 0.52 |
45.76 ± 0.48 |
74.17 ± 0.14 |
선인장 추출물의 흡광도(absorbance in 700nm)
12.5% |
25% |
50% |
원액 |
0.12 ± 0.00 |
0.18 ± 0.00 |
0.26 ± 0.00 |
0.40 ± 0.00 |
선인장 메탄올 추출물 12.5, 25, 50 및 100 중량%의 농도로 조절하여 환원력을 측정한 결과 추출물의 농도가 증가함에 따라 0.12 ~ 0.4의 범위로 증가하는 경향을 보였는데, 이는 환원력이 시료 중의 페놀성 화합물의 함량에 의존적이므로, 본 실험에서도 이들 물질이 환원력에 기여한 영향이다.
【하은초의 생리 활성】
하은초의 생리 활성을 알아보고자 동결 건조된 선인장 분말을 사용하여 70% methanol로 추출하여 항산화 활성, 항암 활성 및 항균 활성에 대해 측정하였다. 항균 활성은 Echerichia coli(대장균), Bacillus subtillus (식중독 유발 세균), Staphylococcus aureus(식중독 유발 세균) 등 3종의 균주에 대해 측정하였으나, 500 mg/mL 의 농도에서도 항균활성은 보이지 않았다.
1. 항산화 활성 측정
선인장 methanol 추출물의 항산화 활성은 ABTS 라디칼, DPPH 라디칼 소거활성 및 환원력으로 측정하였다.
ABTS 라디칼 소거활성은 415 nm에서 흡광도를 1.5가 되도록 조정한 ABTS 기질 용액 100 µL을 첨가하여 잘 혼합한 후 5분간 반응시킨 다음 흡광도를 측정하였다.
DPPH 라디칼 소거활성은 DPPH 용액 (5mg/100mL, methanol) 100 µL에 시료액 100 µL를 잘 혼합한 후 실온에서 10분간 반응시킨 다음 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 라디칼 소거 활성은 서로 무첨가구에 대한 시료액 첨가구의 흡광도 차이로 계산하였다.
환원력은 농도별 시료액 1 mL 200 mM의 인산 완충액 (pH 6.6)과 1%의 potassium ferricyanide를 각각 1 mL씩 차례로 가하고 50 ℃의 수욕상에서 20분간 반응시킨 후 10% TCA 용액 1 mL를 가하여 반응을 정지시켰다. 이를 5,000 rpm에서 5분간 원심분리한 후 상징액을 1mL 취하고, 여기서 증류수 및 0.1% ferric chlroride 용액을 동량으로 혼합한 후 700 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 시료의 환원력은 흡광도의 값으로 나타내었으며, 흡광도 수치가 높을수록 환원력이 높은 것으로 평가하였다.
선인장 동결건조분말을 70% 메탄올로 추출한 다음 시료액의 농도를 500, 1000, 2500 및 5000 µg/mL의 농도로 조정하여 항산화 활성을 측정한 결과는 표 9에서와 같다.
시료액의 농도가 높아질수록 항산화 활성은 증가되었다. 5000 µg/mL 농도에서 ABTS 소거활성은 44.80%, DPPH 라디칼 소거 활성은 20.56%, 환원력은 0.29로, 5000 µg/mL농도에서 50% 미만의 활성이었다.
선인장의 메탄올 추출에서의 항산화 활성 (Antioxiant activity in methanol extract of 선인장)
농도(Concentration) (µg/mL) | ||||
500 |
1000 |
2500 |
5000 | |
ABTS radical scavenging ABTS radical scavenging |
4.93 ± 0.45a |
10.79 ± 0.46b |
25.33 ± 0.44c |
44.81 ± 0.45d |
DPPH radical scavenging |
8.97 ± 1.25a |
12.52 ± 0.59b |
16.07 ± 1.29c |
20.56 ± 1.27d |
Reducing Power |
0.10 ± 0a |
0.14 ± 0.002b |
0.20 ± 0.002c |
0.29 ± 0.001d |
a-d다른 첨자는 다중 범위 분석(ANOVA, Duncan's mutiple range test)에서 p < 0.05 내에서 서로 다른 값을 갖는 것을 의미함
2. 항암 활성
실험에 이용한 인간 암세포주는 위암세포인 AGS 세포와 자궁경부 상피암 세포인 Hela 세포로 한국세포주은행(KCLB, Korea Cell Line Bank, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. 10% FBS, penicillin (100 units/mL), streptomycine (50 µg/mL)을 첨가한 RPMI-1640) 배지를 사용하여 37 ℃, 5% CO2 의 조건에서 배양하였다. 암세포에 대한 시료 추출물의 증식억제활성은 MTT [3-(4,5-dimethylthyazol)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide] 방법을 이용하였으며, 세포배양용 96 well plate에 세포수를 5 x 104 cells/mL로 100 µL씩 분주하여 37 ℃, 5% CO2, incubator에서 24시간 동안 배양한 후, 시료액을 배지에 5, 10, 20 및 50 mg/mL 농도로 조절하여 100 µL씩 접종하였다. 이를 24시간 배양한 다음 5 mg/mL의 MTT 용액을 10 µL씩 첨가하여 4시간 동안 37 ℃에서 배양하였다. 이 때 생존하는 세포와 MTT와의 반응으로 생성된 formazan 결정을 demethyl sulfoxide (DMSO) 100 µL에 녹여 plate shaker(MX2, FINEPCR, Seoul, Korea)에서 30분간 반응시킨 후 ELISA reader로 540 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 시료 무첨가구에 대한 시료 첨가구의 흡광도(%)로 계산하였다,
선인장 동결건조분말의 메탄올 추출물에서 항암 활성은 표 10과 같다. 시료액의 농도를 5, 10, 20 및 50 mg/mL로 하였을 때 인체 위암 세포인 AGC세포에 대해서는 24.24 ~ 79.01%, 유방암세포인 HeLa 세포에 대해서는 19.43 ~ 85.56%의 암세포 생육 저해 활성이 있었다. 표 11과 같은, 대조구로 사용한 아스코르빈산(ascorbic acid)보다는 훨씬 낮은 활성이었으나 황산화 활성에 비해서는 항암활성이 다소 우수한 것으로 생각된다.
선인장의 메탄올 추출물에서 암세포에 대한 항암 효과 (Inhibitory effect of cancer cell in methanol extract of 선인장)
농도 (µg/mL) | ||||
5 |
10 |
20 |
50 | |
AGS cell |
24.24 ± 4.49 |
50.60 ± 1.19 |
74.97 ± 1.16 |
79.01 ± 1.24 |
Hela cell |
19.43 ± 1.40 |
43.97 ± 1.38 |
79.35 ± 0.83 |
85.56 ± 0.74 |
AGS cell : 인체 위암 세포
Hela cell : 인체 자궁경부암 세포
비교 예(대조구)로서의 아스코르빈 산의 농도에 대한 항암 효과
농도 (µg/mL) | ||||
31.25 |
62.5 |
125 |
250 | |
AGS cell |
66.10 ± 1.06 |
10.79 ± 0.46b |
25.33 ± 0.44c |
44.81 ± 0.45d |
Hela cell |
37.20 ± 4.96 |
50.54 ± 5.58 |
67.06 ± 2.25 |
73.27 ± 1.54 |
|
첫댓글 나로서는 내용상 물질의 역활 잘모릅니다 중요한것은 놀라운 효과가 다방면에서 빠르게 나타 나고있습니다
학술적으로 검정되였고 연구결과가 나왔고 무엇이 어디에 좋다는 막연한 풍문이 아니라 물질의 검정이
이루워진것이 중요합니다 말하자면 믿을수 있는 물질이란것입니다~~
위의 논문은 ~~성낙주 박사님의 연구결과 입니다~~
성낙주 교수님 수고비도 받지 않고 분석하고 실험을하여 학술상 좋은 물질으로 학인 시켜주시고
서민들에게 부담이 가지 않게 공급하라고 부탁하신것을 잊지않고 실천하도록 노력하겠습니다
많은분들이 하은초로 인하여 건강을 누리고 박사님께 감사를돌리도록 노력하겠습니다~~
이렇게 중요한 것을 왜 숨겨 놓듯 구석에 놓았습니까
공지사항 큰 글자로 올려 놓는 게 좋을 듯 합니다.
이진규님 충고 감사하게 받아드려 전체 공지로 올렸습니다
내가 그내용을 절반 밖에 이해를 못해서요 모르는게 약이 아니라 병입니다
제 실력으로는 아무리 읽어 봐야 장 운동에 관한 성분을 찾지 못하겠습니다.
이렇게 부작용 없는 장운동 식물은 어디에 가도 찾지 못할 것입니다
병원 약 제가 먹어 보았는 데 부작용 있어서 한 봉지 먹고 내 버렸습니다
일본에서 말입니다. 악값 안 돌려 주데요. ㅎㅎㅎㅎㅎㅎㅎㅎㅎㅎㅎ
댓글을 늣게 보았습니다 몇번을 보아도 배움이 없어 아는글자 반 모르는글자반 입니다
전혀 인체에 해가 없다는것 많이 먹을수록 효과가 분명 하다는것 그외는 경험에 의존 했습니다
세상에 내놓은 기간이 2년남짓 되였지만 몇천명 정도가 효과를 입증했기때문에 결코 작은것은 아니란
생각입니다 하나님의 목적에 준비된 각본대로 갈줄 믿습니다
딱한것은 자랑하지 않는 병이고 완치되여 버리기때문에 다시 찿지 않는것입니다
적은량으로 장기복용을 권하지만 그렇게는 마음이 허용하지 않으니 그것도 하나님 뜻인가 합니다~~ㅎ
이 분석 자료를 인쇄를 해서
어떤 약사님께 보이려고 하는데
인쇄가 안되고 도표가 제대로 나오지가 않습니다.
이것을 워드나 한글로 첨부를 했으면 합니다.
약사님이 나이 먹어서
좀 의미 있는 일을 하고 싶다고 하니까
소개를 해 보려고 합니다.
아쉽습니다 낮에는 일하느라 2층의 컴을 확인 하지 않습니다
지금막 탁배 부송하고 오는길인데~~
007작전을 했습니다댓글 확인하고 인쇄해서 탁배 차에 가니까 큰차에 상차 했어요
차위에 올라가 상자 찿아서 서류 넣고 왔습니다 재포장 했으니까 자른흔적이 있습니다
생것을 좀 보냈거던요 ~~
성낙주 교수님 감사합니다..
늘 건강 하세요..
등소평은 이런말을 했다지요 "검은고양이나 흰고양이나 쥐를 잘 잡는 놈이 진짜 고양이다"라고요
그리고 의학사전에 "약식동원(藥食同原)"이라는 말이 있읍니다 우리나라의 암환자뿐만아니라 모든 질병환자들이
너무 많다 합니다 그래서 외국에서는 질병공화국이라고도 한다지요 이렇게 된 이유는 기업과 병원들이 眼赤之貨 즉 돈에 눈이 빨갱이가 되어서 맛을 위한답시고 치료한답시고 화학독을 넣은 음식이나 약 때문에 그렇다는 말을 그 분야전문가들이 알려주고 있읍니다
이제 그 잘못된 것을 하은초가 바로 잡아 주시는 일조를 해야 되겠읍니다 아직 먹어보지는 않았지만
느낌으로 아주 좋은 약식이 될 것으로 생각됩니다
좋은 댓글 너무 고맙습니다 평생 집만짓고살았습니다 물질에대해 관심도 없었습니다
도저히 의도하지 않은 삶속에서 생소한 분야의 중심에 있게 된였습니다
의사도 제약 회사도 문제가 있지만 우리 국민 에게도 문제가 있는것같습니다
조금만 불편하면 병원을찾게 됩니다 진통제 항생제에 길들려졌기 때문입니다
나도 종합 병원이였으니까 병원 고객이였는데 할말은 아닙니다
하은초의 은혜로 6년간 병원, 약품 ,도움받지않고 매우 건강을 누리고 있습니다
건강검진도 병원출입도 없이 병도 없습니다
소화기관이 완벽하니까 종합 병원이 이민을 했나 봅니다
모두가 건강해서 화확 약품에 병들지 않고 살았어면 좋겠습니다~~
하은초 성분 분석 내용은 알지 못하겠지만
성낙주교수님 하은초님 존경합니다
저역시 경험이지 잘 모릅니다
더욱 가방끈이 짧아서 영어로된 기호는 아주 모르고요 전혀 독성이 없다는것
많이 먹어면 더빠르다는것 체험에의한 경험인데 체험자들이 대부분 컴을 못합니다~~ㅎㅎ