MICROBIOLOGY
)
제목
: 미생물(S.aureus, E.coli) 동정
차례
1. 동정할 검체 설명
2.
동정과정 및 결과
3.
항생제 감수성 검사
4.
s.aureus, e.coli 임상적 의의 설명
1.
검체 : s.aureus, e.coli
왜S.aureus
, E.coli를선택하였는가?
#
S.aureus
Staphylococcus.aureus
(포도상 황색구균)
대표적인
G(+)균으로서, 포도구균은 도처에 흔히 있고 임상적으로 가장 자주 마주치는 세균의 하나이다.
중요한 원내감염과 일반생활 감염의 주요 원인균이며 그 다음 원내 기회감염의 원인균으로는
대장균이 있다.
#
E.coli
Escherica.coli
(대장균)
대표적인
G(-)균으로서, 요로계감염, 창상감염, 폐렴, 뇌막염, 패혈증을 일으키는 인체 병원균
중에서 가장 흔히 분리되는 균이다.
2.
동정
*
일반적인 동정방법 : ⓐ 검체채취 ⓑ 접종 ⓒ 배양 ⓓ 생화학적 검사
1)
s.aures 의 동정
■
1 단계
: 검체를배지에접종한다
불에
달군 백금이로 검체를 채취하여 각 배지에 지그재그로 묻혀준다.
배지:
blood agar, Mac agar
*
blood agar : 혈액이 든 배지로서 G(+), G(-)균 모두 잘 자란다.
균
배양시 '용혈성 여부' 가 균 감별에 도움이 되며
일부
균(Streptococcus)에서는
필수 영양소가 된다
Mac
agar : G(-) 선택배지이다
crystal
violet, bile salt 가 들어있어 G(+)균 배양을 억제한다.
Lactose
가 들어있어 E.coli
균 감별을 할 수 있다.
■2단계
: 배양관찰
⇒관찰
결과 : blood agar 에서만 배양되었으므로 검체는 G(+) 균 임을 알 수 있다.
■
3단계
: 균감별
배양된
균으로 화학검사를 한다.
*
실시한 검사 : Catalase test
Coagulase
test
Dnase
test
MSA
test
ⓐ
Catalase test
:
H2O2를 떨어뜨려
burble 이 일어나면 (+)이다
이
때 burble 이 생기면 Stapylococuus 임을 추정할 수 있다.
⇒결과-burble
관찰됨
-Stapylococcus
이다.
ⓑ
Coagulase test
:
혈장응고검사
S.aureus
에 특이성이 있는 검사로 S.aureus 와 CNS(Coaulase
Negative
Stapylococcus)를
감별할 수 있다. 혈장의 응고가 일어나면
aureus 이다.
⇒
결과 : 응고
S.aureus
이다.
ⓒ
Dnase test
:
배양된 균에 'Toulidine blue'를 떨어뜨려 보라색으로 변하면 (+)이다.
⇒
결과 : (+) 이다.
ⓓ
MSA test
:
manitol 함유배지에 접종시켜 배양했을 때 배양된 균 주위에서 옅은 분홍색 배지가 노르
스름하게 변하면 (+)이다.
⇒결과
: (+) 이다.
▶
최종결과 S. aureus임을
판명!
2)
E.coli 의 동정
■
1 단계
: 검체를배지에접종한다
불에
달군 백금이로 검체를 채취하여 각 배지에 지그재그로 묻혀준다.
배지:
blood agar, maconchy agar
■
2단계
: 배양관찰
⇒
결과 : blood agar 와 맥콘키 배지 모두에서 배양되었으므로
검체는
G(-) 균 임을 알 수 있다.
이
때 Mac agar에서 배양된 균 주위가 연한 분홍색에서 짙은 분홍색으로 변하 면 균이 agar
속에 포함된 lactose를 분해했음을 알 수 있는데, E.coli는 lactose 분해를
하므로 배양된 균 주위가 짙은 분홍색으로 변해야 한다.
균
주위 배지가 짙은 분홍색으로 변했으므로 E.coli 임을 추정할 수 있다.
■
3 단계
: 화학검사
-IMViC성상을
확인한다.
*
실시한 검사 : TSI test
motility
test
MIO
test
CiTrate
test
MR-VP
test
ⓐ
TSI test
:
당분해 여부로 인한 시약 색깔 변화로 알 수 있다.
시험관에
담긴 시약에 균을 넣었을 때 붉은색깔(알칼리성)이 노란색깔(산성)로 변하면
당분해로
인한 산성물질이 발생했음을 알 수 있다. 이 때 시약이 대각선으로 시험관에 담겨 있는데
시험관 위, 아래가 다 노란색으로 변했을 경우 A/A , 변하지 않았을 경우 K/K, 공기와
접한 윗부분만 변하지 않았을 경우(시약에 상대적으로 적게 함유된<1/10> glucose만
분해되었을 경우) K/A로 표기한다. (A; Acid, K; alkaly)
⇒
결과 : A/A 이다.
ⓑ
motility test
:
시험관에 균을 넣었을 때 균 주위가 뿌옇게 되면 motility가 있다고 판정한다.
⇒
결과 : motility(+) 이다
ⓒ
MIO test
:
Indole, Orinichin test.
보라색
시약이 균을 첨가했을 때도 색깔이 변하지 않으면 Indole test(+)이다.
Phenol
red를 첨가시 붉은색으로 변하면 Orinichin test(+) 이다.
⇒
결과 : MIO (+)
ⓓ
Citrate test
:
녹색시약이 푸른색으로 변하면 (+)이다.
⇒
결과 : Citrate (-)
ⓔ
MR-VP test
:
MR과 VP는 반대의 결과가 나오므로 두가지중 하나만 하여도 결과를 알 수 있다.
MR
tests는 시약에 첨가된 균이 혼합산을 생성하면 붉은색으로 변하며,
VR
tests는 시약에 첨가된 균이 아세트산을 생성하면 색깔이 변한다.
⇒
결과 : MR(+), VP(-)
쭬
▶
최종결과 : E.coli
임을 판정.
3.
항생제 감수성 검사.
두께가
고른 배지에 검사할 균을 고르게 배양한후 규격항생제종이를 올려놓는다.
항생제에
감수성이 있을수록 항생제 주위에 clear한 원이 크게 생긴다.(균이 죽으므로)
각
항생제주위에 생긴 원의 반경크기에 따라
R(resistant),
I(intermediate), S(sensitive)로 나눈다.
4.
S.aureus, E.coli 의 임상적 의의 설명
*
S.aureus
#통성
혐기성 그람양성구균
#carriage
site : ant.nasopharynx의 mucous membrane (m/c), axillae, vagina, perineum, Gi tract
#포도구균의
일차적인 자연서식지는 피부이며
외상이나
수술에 의해 표면의 방어력이 약화되었을 때 우리 몸에 피부를 통해 침범한다.
#
2type of syndrome : intoxications, infection
1.
Staphylococcus intoxication
1)
Toxic shock syndrome (TSS)
2)
Staphylococcus Scalded Skin Syndrome(SSSS)
3)
Staphylococcal Food Poisoning
2.
Staphylococcus infection
1)
Skin and soft tissue infection
2)
Respiratory tract infiction
3)
Infections of the central nervous system
4)
Urinary tract infections
5)
Endovasculat infection
6)
Musculoskeletal infection
#
대표적 Coagulase Negative Staphylococcus : S.epidermidis, S.saprophyticus
*
E.coli
#
통성 호기균 G(-) Enteric Bacilli
#
요로계감염, 창상감염, 폐렴, 뇌막염, 패혈증을 일으키는 인체 병원균 중에서
가장
흔히 분리되는 균이다.
#
human colon에 상재
#
Clinical Manifestations
1)
Enteric infections
-
ETEC, EPEC, EIEC, EHEC
2)
UTI
3)
Intraabdominal infections
4)
Bacteremia
5)
abscess, septic arthritis, endophthalmitis... etc
#
대표적 G(-) Enteric Bacilli : Krebsiella, EnteroBacter, Serratia, Proteus, Morganella,
Providencia,
Acinetobacter
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