스크랩 일본생물과학연구소

[가포선생]

Japan Bio Science LaboratoryのNSK-SD(Nattokinase)

낫도균배양엑기스 NSK-SD

낫도키나제로 불리는 효소는, 일본의 전통적 발효식품인 낫도에서 발견되었습니다.

낫도키나제는 낫도균이 대두를 발효 하는 과정에서 세균이 고분자물질을 생합성되어서, 275개의 아미노산으로부터 분자량 약 27700의 프로테아제(단백질분해효소)입니다.

1998년, 당사는 낫도키나제를 고함유 하는 「낫도균배양엑기스」의 제조 방법을 세계에 앞서 확립해, 판매를 개시 했습니다. 이래 낫도키나제의 탑 메이커로서 일본은물론, 미국·한국·대만·중국에 많은 실적을 거듭하고 있습니다.

그리고, 현재 「비타민 K₂를 제거한 낫도키나제 원료」의 특허를 취득하고 있습니다. 「비타민 K₂를 실질적으로 포함하지 않는 낫도키나제함유 식품」을 제공할 수 있는 것은 당사뿐입니다.

많은실적

기능성 소재를 제공한다고 하는 말은 「안심·안전」은 물론, 기술·판매의 모두를 통해 손님의 좋은 어드바이저가 아니면 않된다고 생각합니다. 당사는 낫토키나제의 개척자로서 과거의 실적을 살려, 소프트(기술), 하드(원료)의 양면에서 여러분의 기대에 응합니다.

납두균배양엑기스의 발자취

1996년 낫도균 배양 엑기스의 개발 착수

1998년 낫도키나제를 고함유 하는 낫도균 배양 엑기스 제조 방법을 확립

1998년 낫도균 배양 농축 엑기스(9,800FU/g)및 낫도균 배양 엑기스「NSK-FD」(13,000FU/g)의

           제조 판매를 개시

2001년 낫도냄새를 제거한 「NSK-SD」(20,000FU/g)을 개발. 제조 판매를 개시

2006년 비타민 K₂제거의 제법특허 및 물질특허를 취득

왜 비타민K₂제거인가?

「와파린」을 복용하고 있는 분은「비타민 K₂의 대항 작용」에 의해, 와파린의 효과가 감소 약화되어 비타민K를 많이 포함한 식품(낫도, 녹황색 야채, 클로렐라등)의 섭취를 의사의해 제한됩니다. 당사에서는, 그렇게 지시받은 분도 낫도키나제를 섭취할 수 있도록 비타민K₂의 제거 기술을 개발해, 낫도균 배양 엑기스NSK의 제조에 채용했습니다.

특허개요

<낫도균 배양 엑기스 NSK의 비타민K₂제거에 관한 특허 제 3881494호 제3834048호(일본)>

낫도키나제를 함유한, 한편 거의 비타민K₂를 포함하지 않는 낫도균 배양액의, 농축물을 포함한, 페이스트, 분말, 과립, 캅셀, 드링크 또는 정제의 형태의 식품과 공정을 포함합니다

“ FU ”이란?

「FU」란, 낫도키나제의 활성을 나타내는 단위입니다. (「피브린 분해 유니트」의 약어)

당사는, 피브린(혈전)을 기질로 한 낫도키나제 활성도 측정법(피브린분해법)을 제안·계몽 해왔습니다.

재단법인 일본 건강·영양 식품협회, 일본 낫도키나제 협회의 규격 기준 판정에는 본법이 채용되어 낫도키나제의 활성을 나타내는 단위로서 「FU」가 넓게 인지되고 있습니다.

NSK-SD 의 제품규격

성질과 상태                  백색으로부터 유백색의 미분말

낫도키나제 활성              20,000 FU/g이상

비타민 K₂함량               0.1ppm 이하

주된 용도                    소프트캅셀, 하드캅셀, 타정품, 기호식품

性?	白色から乳白色の微粉末で、僅かに納豆臭を有す
ナットウキナ?ゼ活性	20,000 FU/g以上
ビタミンK2含量	0.1 ppm以下
主な用途	ソフトカプセル	ハ?ドカプセル	打錠品	健康嗜好食品
				フライ納豆

NSK-SD의 안정성과 생화학적제성질

ph안정성 : ph 5.5~10

지적 ph : ph 10.5

열안정성 : 50℃이하

보존 안정성 : 실온에서 42개월, 40℃에서 18개월 안정

NSK-SD와 각종 소재와의궁합

NSK-SD의 각종 소재(식품 및 건강식품 원료)와의 궁합 평가에 대해 데이터 쉬트를 준비하고 있습니다.

NSK-SD의 낫도키나제 활성이 저해되지 않는 소재예

아시타바(신선초)카루콘파우다

은행나무잎엑기스

코엔자임Q10 등

※ 천연물 유래 원료라는 평가에 대해서는, 메이커나 산지, 수학 시기(Lot)등에 의해 차이가 생기기 때문에, 각 원료 개별의 확인 시험의 실시를 추천 하고 있습니다.

섭취기준량

당사는, 낫도키나제의 1일 섭취 기준량 2,000FU이상을 추천 하고 있습니다.

낫도키나제 활성 2,000FU를 NSK-SD로 환산하면 100mg에 상당합니다.

※1···재단법인 일본 건강·영양 식품 협회(JHFA)규격 기준

JHFA는 「낫도균배양 엑기스 식품」의 1일의 섭취 기준량에 대해 이하와 같은 기준을 설정해 놓았습니다.

「낫도균배양 엑기스 가공 식품」··· 낫도키나제로서 2,000FU 이상

「낫도균배양 엑기스 함유 식품」··· 낫도키나제로서 1,000FU 이상 ~ 2,000FU 미만

                      http://www.jhnfa.org/                         

 재단법인 일본 건강 영양 식품 협회의 홈페이지

※2···일본 낫도키나제 협회(JNKA)규격 기준

이하의 4항목에 적합한 상품은, JNKA의 규격 기준을 적합 판단 되어 JNKA 마크(증표)의 기재가 허가됩니다.

1. 납두균의 생성물을 함유

2. 낫고키나제 2,000FU/日 이상 함유

3. 낫도키나제의 함유량을 FU표시

4. 안전성의 증명

http://j-nattokinase.org/jnka_nattou_01.html#nattou01topmenu03

일본 낫도키나제 협회의 홈페이지

NSK-SD의 안전성

낫도는 일본에서의 오랜 세월의 역사 있는 식품입니다만, 당사에서는

그 식경험만 의지하지 않는 안전성의 확보에 노력하고 있습니다.

안전성 실험

1. 단회경구투여 독성 시험                 

2. 13주간 반복 경구투여 독성 험                     

3. 염색체 이상 시험

4. 복귀 돌연변이 시험

5. 생산균의 병원성 시험

(이상, 동물 및 미생물 시험)

6. 완제품 섭취시의 안전성 검토 시험

(사람 임상시험)

이상의 시험에 있어 안전성이 확인되고 있다

안전성 관리

NSK에 사용하고 있는 원료는 모두 non-GMO, nonAnimal인 것을 확인하고 있습니다.

※이러한 안전성은 당사 NSK-SD에 의하는 것입니다.타사 낫도키나제 원료에는 해당되지 않습니다

NSK-SD의 기능성 시험

◆ 완제품(NSK-SD) 섭취시의 피유동태변화에의 영향

◆ NSK에 의한 고혈압 환자에게로의 영향조사

◆ NSK에 의한 선용활성 및 응고억제노우에게주는 영향 조사

◆ NSK에 의한 혈액 점성 저하에의 영향

◆ NSK에 의한 혈소판 응집억제노우에의 영향

◆ 와파린 복용 환자에 대한 안전성과 효과의 연구

이상으로 각각 기능성의 평가 및 유효성을 확인할 수 있는 자세한 데이터를 준비하고 있습니다.

타사제품과의 차이(가짜제품의비교)

낫도키나제와는 단일의 효소의 명칭입니다만, 근년, 낫도키나제를 표방하는 가짜 효소가 많이 판매되고 있습니다. 일본내에서는 고초균이 세균이 고분자물질을 생합성하는 펩타이드분해효소, 대만·중국에서는 고초균이 세균이 고분자물질을 생합성하는 프로테아제, 한국에서는 고초균의 친척균이 세균이 고분자물질을 생합성하는 청국키나제, 미국에서는 코우지카비가 세균이 고분자물질을 생합성하는 ??균효소도 있습니다만, 모두 일반효소입니다. 이러한 효소도 시험관내 혹은 살레상의 피브린(인공혈전)을 크게 작게 분해합니다. 그렇지만, 이것이 생체내에서의 반응이라고는 할 수 없지 않고, 안전성에 대해서도 의문시되고 있습니다.

당사에서는, 산화 인슐린 B쇠사슬의 분해 양식을HPLC분석에 의해 확인하는, 낫도키나제 간이 감별법(IBOX법)을 확립해,,이 방법을 이용하면, 낫도키나제가 진짜 가짜인지를 간단하게 감별할 수가 있습니다.

***해석이 미숙한점 양해바랍니다 일본어 능숙하신 분이라면저희 홈페이지에서 다시확인해보셔요^^

NSK-SD(Nattokinase)

Biozyme NSK  Q/A

문> 비오자임NSK는 어떻게 만들어집니까 ?

답> 비오자임은 일본생물과학연구소가 약 25년 전에 개발한 것으로, 흡수성이 대단히 좋은 納豆菌 배양액입니다.

비오자임NSK는 이 기술을 구사하여, 혈전을 녹이는 효소와 비타민K₂를 고농도로 추출하는데 성공한 최고품질의 나토균 배양 엑기스입니다.

비오자임NSK 캡슐은 일본생물과학연구소의 독자적인 제조법으로 효소의 효능을 그대로 캡슐화한 것입니다. 3알에 나토 50g에 상당하는 나토키나제가 함유되어 있습니다.

문> 비오자임NSK는 어떤 효과를 기대할 수 있습니까 ?

답> 나토키나제는 혈전을 용해 시키고 그 원인물질을 체외로 배출하기 때문에 고혈압과 혈전이 원인이 되는 노인성치매를 포함한 혈전증(심근경색, 외경색)예방 등의 효과를 기대할 수 있습니다.

또한, 배양 엑기스는 비타민E의 6-7배 이상의 항산화 작용이 있어서, 생활 습관 병의 개선등에도 효과를 기대할 수 있습니다.

문> 어느 정도 계속 복용해야 합니까 ?

답> 혈전증의 전문가이기도한 나토박사(수미교수)는, 소량일지라도 매일 나토(Nattokinase)를 먹을 것을 권장하고 있습니다. 오랫동안 계속 먹게 되면, 혈전증의 원인이 되는 피브린이 체외로 배출되어 고혈압이나 혈전증이 예방된다고 할 수 있습니다.

문> 언제 어떻게 먹는 것이 좋습니까 ?

답> 의약품은 아니기 때문에 명확하지는 않습니다만, 위가 활발하게 작용하여 흡수가 용이한 식후가 좋다고 생각됩니다. 또, 통계적으로 혈전은 밤중부터 새벽녘에 걸쳐 나타나기 쉽기 때문에 나토키나제가 체내에서 약 8시간 효과가 지속된다는 것을 고려하면, 매일 잠자기 전에 드실 것을 권장합니다.

문> 어린이나 노인들도 복용합니까 ?

답> 영양보조식품이기 때문에 연령은 관계가 없습니다만, 몸에 좋다고 해서 상식 밖으로 많은 양을 섭취하는 것은 바람직하지 않습니다.

1일 2-3알 정도를 물로 드시는 것이 좋습니다.

일본생물과학연구소 한국지점

경기도 부천시 원미구 역곡동 80-4 백강빌딩 705호

전화 : 032)341-2531  Fax : 032)341-2530

HP : 010-9187-7499

Natto2000,NattoAce,Natural Super kinase II

http://www.jbsl-net.com/index.shtml  일본본사

http://j-nattokinase.org/index.html  낫도키나제협회  JNKA

NSK II, Natto2000 

Natural Super Kinase II -Japan Natto2000 - Korea 90Capsule type

 **일본 오사카에 위치한 일본생물과학연구소는 일본 낫도키나제 시장점유율90%

이상을차지하고있으며한국의 낫도키나제제품을 선보이고있습니다 아울러

일본 낫도키나제협회(JNKA)에서 인정한제품으로서 유일한 제품.**

JNKA (일본낫도키나제협회)마크를 꼭 확인해주세요

NSK-SD 나토키나아제

나토키나아제에 관한 종합적 연구

by Japan Bio Science Laboratories Company Limited

I. 개요

본 논문에서는 나토키나아제 (nattokinase)라고 불리는 섬유소분해효소의 생물학적 활성 및 안전성에 대한 연구를 다루고 있다. 본 논문에서는 특히, 일본의 Japan Bio Science Laboratories Co. Ltd. (JBSL)가 특허를 가지고 있는 물질인 NSK-SD (Natural Super Kinase-Sprayed Dried)를 중점적으로 다루고 있다. NSK-SD의 활성 및 안전성은 임상시험을 통해서 증명되었다. NSK-SD는 섬유소분해 활성을 보이는 효소인 나토키나아제의 정제된 형태의 공급원이다. 야채 치즈 낫토는 심혈관계 질환을 예방하기 위한 민속치료제로써 사용되어 온 음식인데, 이곳으로부터 나토키나아제를 분리한다.

활성

정제된 나토키나아제는 직-간접적으로 피브린 응고체를 분해하는 기능이 있는 것으로 알려져 있다. 혈전 용해 분석법 (clot lysis assay)을 통해 나토키나아제가 피브린을 직접적으로 분해한다는 사실을 알게 되었고, 그 활성은 플라스민과 비슷했다. 나토키나아제는 조직형 플라스미노겐 촉진제 (tissue-type plasminogen activator)의 주요 저해제인 플라스미노겐 활성인자 억제자 1 (PAI-1)에 영향을 주면서 간접적으로 피브린을 분해하기도 한다. 여기서 중요한 사실은, 나토키나아제가 피브리노겐으로부터 피브린이 형성되는 과정을 저해하는 것, 즉, 혈전 (blood clot)이 형성되는 과정을 저해하는 것이 아니라는 점이다. 이것은 다른 섬유소분해 물질들 (예를 들어, 스트렙토키나아제와 유로키나아제)과는 대비되는 성질이다. 추가적으로, 많은 물질들은 혈관주사를 통해서 투여해야하는 반면에, 나토키나아제는 경구투여가 가능하다 점에서 차별화된 모습을 보인다.

임상실험결과, 구강을 통해 약 6,000 피브린 분해 단위 (FU, fibrin degradation units)의 낫토를 최초로 투여한 시점으로부터 8시간 후까지 유글로빈 분해 시간 (ELT, euglobin lysis time)을 감소시키는 능력이 있는 것으로 나타났다. 추가적으로, 투여 12시간 후까지 유글로불린 섬유소분해 활성 (EFA, euglobulin fibrinolytic activity, 피브린 판의 분해 면적)을 증진시키는 것으로 나타났다.

나토키나아제는 섬유소분해 활성 이외에도, 고혈압이 있는 실험참가자들의 혈압을 낮춰주는 능력도 있는 것으로 나타났다. 또한, 나타키나아제는 혈소판 응집 방지, 혈액세포 내의 룰로 (rouleaux) 형성 감소, 그리고 혈액 점도 감소 등의 능력이 있는 것으로 나타났다.

안전성

NSK-SD의 안전성은 동물실험 및 임상실험을 통해 증명되었다. NSK-SD는 다섯 종류의 박테리아를 이용한 에임스 실험 (Ames assay)과 염색체 변형 (chromosomal aberration) 연구의 결과, 돌연변이를 일으키지 않는 것으로 나타났다. 또한 설치류를 대상으로 단회투여 및 반복투여 (28일 그리고 90일)를 진행한 실험들을 통해 독성이 없는 것으로 밝혀졌다. LD50은 체중의 20,000 FU/kg 이상인 것으로 나타났다. JBSI에 의해서 생산되는 부드러운 젤 캡슐인 NSK II (이 속에 NSK-SD가 100mg 포함되어 있음)를 이용하여 31명의 건강한 남녀에게 매일 3개의 캡슐 (2,000 FU/day)을 총 4주간 먹게 하면서 무작위로 이중맹점 (double-blind) 임상실험을 진행했다. 그 결과, 별다른 유해한 영향이 없는 것으로 나타났다. 나토키나아제는 급성 뇌졸중 피해자의 헤파린과 조합을 이뤘을 때에도 안전한 것으로 나타났다. 또한 예방약을 먹고 있는 사람들을 대상으로 진행한 실험을 통해, 와파린 (warfarin)과 조합을 이룰 때에도 안전성이 있는 것으로 입증되었다. 낫토를 만드는데 이용되는 박테리아인 JBSL 균주를 쥐 (mice)에 투여했을 때에도 감염성, 병원성, 그리고 독성이 관찰되지 않았다. 하지만 대두 (soybean)에 대한 알레르기를 가진 사람들에게서는 알레르기 반응을 일으킬 가능성이 있다. 또한, 다른 섬유소분해 물질을 투여하고 있거나 출혈성 장애를 앓고 있는 사람들은 나토키나아제를 사용하기 전에 담당 의사와 상담하는 것이 좋다.

상세설명

NSK-SD는 냄새가 없는 흰색(우유빛)의 가루이다. 또한 20,000 FU/g의 나토키나아제 활성을 보인다. 권장된 투여량은 2,000 FU/day이다. 모든 비타민 K2는 제거되었다 (혈액 응고를 증가시킬 수 있기 때문에). NSK-SD는 유전자 변형이 일어나지 않은 대두와 특허를 받은 균주인 Bacillus subtilis natto로부터 만들어졌다. NSK-SD는 pH 5.5-10, 섭씨 25도의 조건에서 24시간 간 안정한 형태로 존재한다. NSK-SD가 포함된 부드러운 젤 캡슐 (NSK-II)을 pH 2.0의 위산 (gastric fluid) 환경에 30분간 노출시켰을 경우 약 75-80%의 활성을 유지했다. NSK-SD는 섭씨 50도에서 한 시간 가량 안정하다. 최적의 섬유소분해 활성은 섭씨 65도, pH 10.5 조건에서 나타난다. NSK-SD는 2000kg/cm2까지의 압력 조건에서도 안정하기 때문에, 알약(tablet) 형태로도 압축될 수 있다.

용도

NSK-II는 경구투여가 가능하고, 심혈관계 질환을 예방하기 위한 캡슐형태의 식이 보조제로 판매된다. NSK-II는 섬유소분해 및 혈압강하 효과가 있는 것으로 나타났다. NSK-II는 또한 혈소판 응고의 방지, 혈액세포 내의 룰로 형성의 감소, 그리고 혈액 점도의 감소 효과가 있는 것으로 나타났다. 권장된 투여량은 2,000 FU/day 이다. NSK의 안전성은 임상 및 동물실험을 통해서 입증되었다. 생체 밖 실험결과, 돌연변이를 일으키지 않는 것으로 나타났다. 출혈성 질환을 앓고 있거나, 다른 섬유소분해 물질을 투여하고 있는 사람들은 담당 의사와 먼저 상담한 후에 나토키나아제를 투여할 것을 권고한다. 또한, 심혈관계 질환을 앓고 있는 환자는 의사의 철저한 관리 하에 사용할 것을 권장한다.

II. NSK_SD의 개발

나토키나아제는 대두로부터 발효되고, 야채 치즈라고도 불리는 일본 음식인 낫토로부터 추출된다. 낫토는 1,000년이 넘도록 음식으로써 섭취되어왔다.

1980년에 미국 시카고대학 (University of Chicago)의 한 연구자가 173개의 서로 다른 음식을 이용하여, 각각의 음식들이 심장마비 및 뇌졸중과 연관된 혈전 (thrombi)들을 얼마나 효과적으로 분해하는가에 대한 실험을 진행하면서 낫토의 섬유소분해 능력을 발견하게 되었다. (Sumi, 1987)

낫토는 익힌 대두를 발효하면서 만들어지는데, 이때 Bacillus subtilits natto라는 특정한 박테리아를 이용한다. 대두들은 표면에 끈적끈적한 실 모양의 물질로 덮일 때 까지 섭씨 40도 (화씨 104도)의 온도에서 14-18시간 동안 발효된다. 낫토는 특징적인 냄새를 풍기며 약한 곰팡이 맛이 난다.

낫토의 한 서빙으로 보통 50g이 나오며, 이 정도의 양이 나타내는 섬유소분해 활성은 2,000 CU 이다. (Bacillus subtilis natto의 균종이 여러 개 존재하고, 이들이 각기 다른 효소활성을 나타내고 있기 때문에 앞의 측정값은 대략적인 것이다.) CU는 내생적 섬유소분해 효소인 플라스민 (plasmin)과 활성을 비교하여 나타낸 단위이다. 이곳에서는 CU 단위와 FU 단위를 1.33 비율로 대체하여 쓰고 있다. 즉 50g의 낫토는 약 1500 FU의 활성을 보인다.

나토키나아제는 275개의 아미노산 구성되어 있고 분자량이 27,728 돌턴인 세린 프로테아제 (serine protease)이다. 나토키나아제는 서브틸리신 (subtilisin) 효소와 매우 높은 상동성 (homology)을 보이며, 특히 서브틸리신 E 및 아밀로사카리티쿠스 (amylosacchariticus) 의 DNA와 비교했을 때, 각각 99.6% 및 99.3%의 상동성을 보인다. (Nakamura et al. 1992).

JBSL에서는 특허 받은 균주인 Bacillus subtilis natto를 이용하여 물질을 만들어내고 있다. NSK-SD는 NSK-II라고 불리는 부드러운 젤 캡슐형태로 판매되고 있다. 이 캡슐에는 100mg의 NSK-SD가 포함되어 있으며, 2,000 FU의 최소 활성을 보인다. 기존의 출시되었던 제품으로써, 덜 정제된 형태이고 13,000 FU/g의 활성을 보였던 제품인 NSK-FD (freeze-dried, 냉동건조)는 NSK-SD에 의해서 대체되었다.

III. 혈액응고의 생화학적 & 약리학적 정보

응고 기작

혈액응고 현상이란, 혈액이 고체 젤 형태의 덩어리 (다른 말로는, 혈전)로 변화하는 현상을 말한다. 혈액 응고체에는 고분자 단백질인 피브린과 활성화된 혈소판이 함께 섞여 있다. 혈액응고 현상은 혈관이 손상당했을 때 나타나는 반응이다.

혈액응고는 복잡한 생화학적 연쇄반응의 결과이다. 연쇄반응의 각 단계마다 하나의 비활성 혈장단백질이 활성화된 형태의 효소 혹은 조효소로 전환된다. 그리고 이렇게 해서 생성된 효소 혹은 조효소들은 또다시 새로운 효소의 형성을 유도하면서 연쇄반응을 이어나간다. 혈장단백질인 프로트롬빈이 활성화된 효소인 트롬빈으로 전환되면서 전체 연쇄반응은 끝난다. 트롬빈은 피브리노겐으로부터 여러 개의 폴리펩티드가 분리되도록 유도한다. 이후 피브리노겐 잔여물들이 서로 결합하여 피브린을 형성한다. 이후 인자 XIIIa (factor XIIIa) 라는 효소에 의해서 피브린의 결합들이 다시 한 번 강화된다.

피브린은 두 가지 경로에 의해 활성화될 수 있다: 모든 필요요소들이 혈액 속에 있을 경우에는 내재적 경로 (intrinsic pathway)라고 부르고, 세포구성물 (트롬보플라스틴, 조직인자 라고도 부름)을 필요로 하는 경우에는 외재적 경로 (extrinsic pathway)라고 부른다.

내재적 경로의 경우에는, 인자 XII가 관여를 하게 된다. 이 인자가 손상당한 내피와 접촉을 하게 되면 인자 XIIa로 활성화된다. 인자 XIIa는 다시 XI를 인자 XIa로 활성화시킨다. XIa는 다시 IX를 인자 IXa로 활성화시키고 인자 X를 인자 Xa로도 활성화시킨다. 인자 Xa는 프로트롬빈을 트롬빈으로 전환시켜주는 효소이다.

외재적 경로의 경우에는, 혈장에 존재하는 단백질이 아닌 조직인자 (tissue factor)로부터 모든 반응이 시작된다. 이 조직인자는 섬유아세포 (fibroblast) 등과 같이 내피 아래에 존재하는 다양한 조직세포들의 세포막 외부표면에 위치해 있다. 조직인자는 혈장 단백질인 인자 VII와 결합하며, 이 과정을 통해서 인자 VIIa로 활성화된다. 인자 VIIa는 다시 인자 X를 Xa로 활성화시키고, 이어서 인자 IX가 활성화된다.

우리의 간은 다양한 혈장 응고 인자 (plasma clotting factor)들을 생산하면서 혈액응고과정에 중요한 역할을 담당하고 있다. 간은 또한 소장 내에서의 비타민 K 흡수에 중요한 영향을 미치는 담즙염 (bile salt)을 만든다. 간에서는 섬유소분해 단백질들과 다양한 응고 인자 (인자 II, VII, IX, 그리고 X)들을 만들 때에 비타민을 필요로 한다.

항-응고 기작

혈전의 형성을 제한하는 인자들과, 이미 생성된 응고체를 분해하는 섬유소분해 시스템들이 항-응고 기작 내에 포함되어 있다.

혈전의 형성을 제한하는 기작들로는, 조직인자 경로저해제 (TFPI, tissue factor pathway inhibitor), 단백질 C, 단백질 S, 그리고 안티트롬빈 III 등과 같은 혈장 단백질들이 있다.

TFPI는 주로 내피세포에 의해서 분비되고, 혈액응고 과정의 개시단계 (ignition phase) 때에 작용을 한다. TFPI는 조직인자와 인자 VIIa 사이의 복합체에 결합하면서 이들에 의해서 Xa가 형성되는 것을 저해한다.

내피세포 수용체의 한 종류인 트롬보모듈린 (thrombomodulin)은 트롬빈과 결합할 수 있는데, 이를 통해서 트롬빈의 응고체 형성능력을 저해할 수 있다. 결합된 트롬빈은 단백질 C라는 특별한 혈장 단백질과 결합한다. 이 결합을 통해서 단백질 C는 활성화되고, 다른 혈장 단백질과 함께 인자 VIIIa 및 Va의 활성이 없어지도록 유도한다. (트롬빈은 인자 VIII 및 V를 직접적으로 활성화시키고, 단백질 C를 통해서 이들을 간접적으로 비활성화 시킨다.)

안티트롬빈은 헤파린과 결합한 이후에 트롬빈을 비활성화 시킬 수 있다. 내피세포의 표면에는 내생적인 헤파린이 존재하고 있다.

섬유소분해 (혈전용해) 시스템에는 플라스미노겐 (plasminogen)이라는 혈장 효소원이 포함되어 있으며, 이것은 플라스미노겐 활성제들에 의해서 활성화된다. 플라스미노겐의 활성화된 형태는 플라스민 (plasmin)이라는 효소이다. 생성된 플라스민은 피브린을 분해 시키면서 혈전을 녹인다.

플라스미노겐 활성제의 한 예로는 조직 플라스미노겐 활성제 (t-PA, tissue plasminogen activator)가 있으며, 이것은 내피세포에 의해 분비된다. 응고과정 중에는, 플라스미노겐과 t-PA 모두가 피브린과 결합하여 응고체 내로 합쳐진다. t-PA는 약한 효소의 한 종류로써, 피브린이 존재하고 있는 상태에서만 플라스미노겐으로부터 플라스민을 형성할 수 있다.

항-응고 약품

아스피린은 사이클로옥시지나제 (cyclooxygenase)라는 효소를 저해하며, 이를 통해 프로스타글란딘 및 트롬복산 (thromboxane)의 형성을 막는다. 이것은 매우 중요한 현상인데, 혈소판에 의해서 생성되는 트롬복산 A2가 혈소판활성 및 혈소판응고를 유도하기 때문이다. 낮은 농도의 아스피린은 정상상태 (steady-state)의 혈소판 사이클로옥시지나제 활성을 저해한다.

간이 응고인자들을 생성하기 위해서는 비타민 K를 필요로 한다. 비타민 K의 이와 같은 역할을 방해하는 약품들을 혈액응고방지제 (anti-coagulant)라고 부른다. 가장 잘 알려진 혈액응고방지제는 와파린 (쿠마딘, Coumadin)이다.

내피세포에서 자연적으로 발견되고 안티트롬빈 III의 보조인자인 헤파린은, 내피세포와 결합하는 약품으로도 쓰일 수 있다. 헤파린은 안티트롬빈 III의 효과를 촉진시키고 트롬빈 작용제 (thrombin agonist)의 저해를 통해 혈소판의 기능을 감소시킬 수 있다.

플라스미노겐 활성제들은 형성된 혈전을 분해한다. (혈전용해치료라고도 알려져 있다). 심장마비 혹은 폐쇄성 뇌졸중이 발생한 시점으로부터 3시간 이내에 t-PA 혹은 스트렙토키나제 (streptokinase)라는 단백질분해성 약품을 혈관 속으로 주입할 경우, 조직손상을 감소시킬 수 있다.

IV. NSK-SD (나토키나아제)의 효능

- 혈압의 감소

- 단백질분해 활성

- 혈소판 응고과정의 저해

- 적혈구 룰로 형성의 감소

- 혈액점도의 감소

- 경구투여 가능

혈압의 감소

혈압은 레닌-앤지오텐신 (renin-angiotensin) 호르몬 복합체에 의해서 조절된다. 간에서 만들어지는 단백질인 앤지오텐시노겐 (angiotensinogen)은 혈액 내에서 효소 레닌에 의해 앤지오텐신 I으로 전환된다. 앤지오텐신 I은 다시 앤지오텐신-전환효소 (ACE, angiotensin converting enzyme)에 의해 앤지오텐신 II로 전환된다. 앤지오텐신 II는 혈관의 수축을 유도해 혈압을 상승시킨다. 따라서 이 시스템을 조절하는 두 가지 효소는 레닌과 앤지오텐신-전환 효소 (ACE)이다. ACE를 저해하는 기작은 고혈압 환자에 대한 처방으로 흔히 사용된다. 하지만 신장에서 분비되는 효소인 레닌이, 레닌-앤지오텐신 시스템의 속도-제한 인자 (rate-limiting factor)인 것으로 생각되고 있다.

전통적으로 낫토를 섭취하면 혈압을 낮출 수 있는 것으로 알려져 있다. 그리고 이러한 효능은 ACE를 저해하는 기작을 통해 일어날 것이라고 생각되었다 (Maruyama & Sumi, 1998). 하지만 최근에 진행된 임상연구의 결과, 나토키나아제 치료 후 혈액 내의 ACE 수치에는 변화가 없는 것으로 나타났다. 오히려 레닌활성이 소폭으로 감소하는 것이 관찰되었다 (Kim et al, 보도자료). 후자의 경우, 나토키나아제가 레닌 활성을 저해함으로써 혈압을 감소시킬 것이라고 제안하고 있다.

NSK-SD를 8주간 복용하게 한 고혈압 환자들을 대상으로 무작위적인 위약-대조군 임상연구 (placebo-controlled human clinical study)를 진행한 결과, 나토키나아제가 혈압을 감소시킨다는 증거들을 확인할 수 있었다. 다양한 질병 상태를 보이는 환자들을 대상으로 진행한 무작위적인 위약-대조군 교차연구 (placebo-controlled crossover study)와 고혈압을 가진 환자들을 대상으로 진행한 공개연구 (open-label study)를 통해서도 위와 같은 사실을 확인할 수 있었다. 추가적으로, 설치류 (rat)를 대상으로 진행한 연구에서도 혈압의 감소를 관찰할 수 있었다.

혈압의 감소: 동물연구

위스타 쥐 (Wistar Rat)에게 나토키나아제를 투여했을 때에도 혈압이 감소하는 관찰할 수 있었다. 복막을 통해 감압 건조된 추출물 (80% 에탄올; 낫토 25mg 당량 - 대략적으로 총0.8 FU 혹은 2 FU/kg 체중) 0.5ml를 동물들 (400-450g, 수컷)에게 투여했고, 꼬리 동맥에서 혈압을 측정했다. 6마리의 쥐에서는 낫토 추출물을 투여한지 2시간 및 3시간 만에 평균 수축기 혈압이 가각 12.6% 및 13.2%로 크게 감소했다 (p<0.05). 수축기 혈압은 166±14mmHg에서 시작해서 3시간 후에 144±27mmHg로 감소했다 (Maruyama & Sumi, 1998).

혈압의 감소: 임상연구

공개 임상연구에서 감압 건조된 추출물 (80% 에탄올; 낫토 200g 당량, 대략적으로 6,400 FU) 30g을 고혈압 환자들에게 4일간 경구 투여했다. 환자 5명중 4명의 꼴로 수축기 혈압은 물론이고 확장기 혈압까지도 감소했다 (혈압은 누운 자세에서 측정되었다). 수축기 혈압의 평균값은 173.8±20.5에서 154.8±12.6mmHg로 10.9% 감소했다. 확장기 혈압은 101.0±11.4에서 91.2±6.6mmHg로 9.9% 감소했다 (Maruyama & Sumi, 1998).

다양한 질병상태 (본태성 고혈압, 과응고 상태, 자가-면역성 질환, 그리고 당뇨)를 보이는 20명의 남여 (18-75세)를 대상으로 무작위적인 위약-대조군 교차연구를 진행했다. 이들 중 절반에게는 4,000 FU (하루에 NSK-II를 2,000 FU씩 2회)를, 나머지 절반에게는 위약을 투여했다. 4주가 지난 후에, 두 그룹을 교차해서 각각 반대의 약을 투여했다. NSK-II를 먼저 투여한 그룹 (p=0.039)에서는 베이스라인과 비교했을 때 수축기 혈압이 크게 감소했고, 확장기 혈압에는 별다른 변화가 없었다. 위약 치료는 수축기 및 확장기 혈압에 아무런 영향을 미치지 않았다 (Krishnan Med Assoc. 2003).

수축기 혈압이 130-159mmHg 사이로 나타난 73명의 고혈압 환자들 (20-80세)을 대상으로 무작위적인 이중맹점 위약-대조군 연구라는 또 하나의 결정적인 연구가 진행되었다. 참가자들은 매일 NSK-II 한 캡슐 (2,000 FU/캡슐) 혹은 위약을 8주간 투여했다. 8주간 지난 후, 위약과 비교했을 때 캡슐을 투여한 그룹에서 수축기 혈압과 확장기 혈압이 크게 감소했다 (p<0.05). 캡슐을 투여한 집단과 위약을 투여한 집단에서 모두 혈압의 감소가 관찰되었으며, 캡슐을 투여한 집단에서는 수축기 혈압은 5.5mmHg, 그리고 확장기 혈압은 2.8mmHg로 순 감소했다. 또한 대조군과 비교했을 때 캡슐 투여 집단에서 혈장 레닌 활성 (1.17ng/ml/hr)의 순 감소가 관찰되었다 (p<0.05). 두 그룹 모두에서 ACE 수치에는 큰 변화가 없었다 (Kim et al, 보도자료).

섬유소분해 활성

나토키나아제는 직-간접적으로 피브린 혈전을 분해하는 것으로 나타났다. 나토키나아제는 혈전용해 분석실험에서 피브린을 직접적으로 용해하는 것으로 나타났고, 이 때의 활성을 플라스민과 비교할 수 있을 정도였다. 동역학적 분석결과, 나토키나아제가 피브린을 분해하는 일에 있어서 플라스민에 비해 활성이 6배나 더 강한 것으로 나타났다. 나토키나아제는 플라스미노겐 활성제의 활성을 직접적으로 자극하지 않는다. 오히려 조직형 플라스미노겐 활성제 (t-PA)의 주요 저해제인 플라스미노겐 활성 저해제 1 (PAI-1)을 분해하는 것으로 생각되고 있다. 중요한 것은, 나토키나아제가 피브리노겐으로부터 피브린이 형성되는 과정을 저해하는 것이 아니라는 점이다. 즉, 정상적인 조직손상으로 인한 혈전 형성과정은 저해하지 않는다는 것이다.

인간을 대상으로 진행한 임상연구를 통해, 약 6,000 FU 농도의 나토키나아제를 경구 투여했을 때, 8시간 후까지 유글로빈 분해시간 (ELT, euglobin lysis time)을 감소시킬 수 있는 것으로 나타났다. 추가적으로, 경구투여 12시간 후에는 유글로블린 섬유소분해 활성 (EFA, euglobulin fibrinolytic activity: 피브린 플레이트의 용해면적)이 크게 증가했다. 개와 쥐를 이용한 동물실험에서 인공적으로 투여된 트롬비 (thrombi)도 나토키나아제에 의해 용해되는 것으로 나타났다. 추가적으로, 쥐 모델에서 나토키나아제는 혈관 내막 (vascular intima)이 두꺼워지는 것을 막는 것으로 나타났다. 실험결과에 대한 자세한 내용들은 아래에 제시되어있다.

생체 밖에서의 섬유소분해 활성

야채 치즈 낫토를 피브린과 직접적으로 접촉시키면서 섬유소분해 활성을 처음으로 발견했다. 이때 나타난 섬유소분해 활성은 약 40 CU (혈장 단위)/g 습시료 중량이었으며, 분리된 프로테아제는 나토키나아제로 명명되었다 (Sumi et al, 1987). (40 CU의 섬유소분해 활성은 30 FU와 같다: 피브린 분해 단위). 혈전용해 분석법을 이용한 실험을 통해, 순수 분리된 나토키나아제가 플라스민의 4-5배에 달하는 섬유소분해 활성이 있는 것으로 나타났다. 나토키나아제는 피브리노겐과 피브린을 절단했으며, 플라스민의 분해산물들과 비슷한 산물들을 생성했다. 나토키나아제와 플라스민의 효소활성을 비교했을 때, 나토키나아제가 플라스민에 비해 피브리노겐 절단 활성이 3배 정도 낮은 것으로 나타났다 (Kcat.Km). 하지만 교차 결합된 피브린의 절단은 나토키나아제가 플라스민에 비해 6배나 효율적인 것으로 나타났다 (Fujita et al, 1995).

순수한 나토키나아제 및 NSK-SD와 인간의 혈장을 이용하여 생체 밖 실험을 진행했다. 평균 5리터 부피의 혈액 속에서 생체이용률 (bioavailability)을 100%라고 가정하여, 최대 권장농도 (4,000 FU)의 두 배만큼 실험 농도 (0.2-1.6 FU/ml)를 계산하여 설정했다. (현재 JBSL에서는 인간 생체이용률에 관한 연구를 진행하고 있는 중이다). 이 시스템에서 0.2-0.8 FU/ml 농도의 나토키나아제에 대해, 트롬빈에 반응하여 피브리노겐으로부터 피브린을 형성되는 현상이 영향을 받지 않았다. 나토키나아제의 최대 농도가 0.8-1.6 FU/ml일 때에만 피브리노겐의 양이 감소했다. 이와 같은 결과는 나토키나아제를 정상적인 양만큼 투여했을 경우, 조직손상에 대해 우리 몸이 반응하는 능력에 아무런 영향이 없을 것이라는 사실을 암시해준다 (Ero and Lewis, 2008).

유로키나아제와는 달리, 나토키나아제는 직접적으로 플라스미노겐 활성제의 활성을 자극하는 방법으로 섬유소분해를 촉진시키지 않는다(Fujita et al, 1995). 오히려, 플라스미노겐 활성제의 중요한 저해제를 분해 시키는 것으로 생각되고 있다. 플라스미노겐 활성 저해제 1 (PAI-1)은 조직-형 플라스미노겐 활성제 (t-PA)의 주요 저해제이다. 나토키나아제는 0.02-1.0nM의 농도 (0.1nM에서 최대 활성의 절반)에서 재조합된 PAI-1을 작은 분자량의 조각들로 절단했다. 나토키나아제는 저해제의 활성을 감소시킴으로써, t-PA에 의해 유도된 피브린 혈전의 분해를 촉진시켰다 (Urano et al, 2001). 위의 연구결과와는 대비되게, 인간 혈장을 이용하여 생체 밖 실험을 진행한 또 다른 그룹에서는 나토키나아제 (0.8 및 1.6 FU/ml)가 PAI-1의 양을 소폭으로 증가시켰다고 보고했다 (Ero and Lewis, 2008).

섬유소분해 활성: 동물연구

나토키나아제의 섬유소분해 활성은 개를 이용한 혈전증 (thrombosis) 모델 실험을 통해서도 검사되었는데, 소 (bovine)의 피브리노겐과 트롬빈을 개에게 주입했다. 세 마리의 개에게는 나토키나아제를 주입했고, 대조군의 목적으로 여섯 마리의 개에게는 위약을 주입했다. 4 캡슐의 나토키나아제 (250mg/캡슐; 2.13 CU/mg; 약 1,600 FU로 계산됨) 혹은 위약을 구강을 통해 주입했다. 혈전이 유도되기 전의 시점과, 유도된 후 2.4시간부터 24시간까지의 시점 때 혈관 촬영도 (angiogram)를 얻었다. 대조군에서는 혈전증이 유도된 지 18시간 이후까지도 아무런 용해현상이 관찰되지 않았다. 반면, 나토키나아제가 투여된 개들에게서는 5시간이 지난 후에 혈액순환이 완벽하게 회복되었다 (Sumi et al, 1990).

나토키나아제의 섬유소분해 활성은 쥐를 이용한 실험에서도 확인되었다. 실험에 이용된 쥐들은 아세트산으로 주경동맥 (common carotid artery)에 있는 혈관 벽의 내피세포에 손상을 입히면서 혈전을 형성했다. 이 모델에서는, 유로키나아제와 t-PA가 60분에 걸쳐서 혈액흐름 (45%)을 회복시켰다. 식염수 (saline)을 이용했을 때에는 혈액흐름의 회복현상을 관찰할 수 없었다. 나토키나아제는 각각 0.02, 0.04, 그리고 0.12 mcmol/kg (IV)의 농도로 처리되었고, 활성은 플라스민과 엘라스타아제 (elastase)와 비교되었다. 나토키나아제는 60분 이후에 농도-의존적으로 혈액의 흐름 (각각 18%, 42%, 그리고 62%)을 회복시켰다. 나토키나아제와 플라스민의 활성을 몰 질량 단위로 비교했을 때, 나토키나아제가 플라스민에 비해 4배 더 효과적인 것으로 나타났다. 엘라스타아제를 이용한 경우에는 혈액흐름이 회복되지 않았다. 혈장 속에 존재하는 D-이량체 감마-감마-사슬 잔여물들을 통해 교차된 피브린의 분해정도를 측정했다. 나토키나아제는 물론이고, 유로키나아제 및 t-PA를 주입한 이후의 D-이량체 잔여물 농도를 확인했다. 피브리노겐을 파괴하지 않으면서 피브린을 분해할 수 있는 능력을 측정함으로써, 나토키나아제가 치료학적인 섬유소분해 약물로 사용될 수 있는지에 대한 타당성 검사를 진행했다. 0.12 mcmol/kg의 플라스민, 엘라스타아제, 그리고 나토키나아제를 투여한 이후에 측정된 잔여 혈장 피브리노겐 비율은 각각 33, 42, 그리고 29%였다. 나토키나아제의 투여 농도를 플라스민 활성수준의 1/3 만큼 줄였을 때, 잔여 피브리노겐 수치가 53%로 나타났다. 플라스민과 비교했을 때 이 잔여 피브리노겐 수치는 더 큰 값이다. 이와 같은 결과를 통해, 적정 농도 수준에서는 나토키나아제가 플라스민보다 더 안전하다는 사실을 알 수 있다 (Fugita et al, 1995).

혈관 내막의 두께가 증가하는 현상은 동맥경화성 플라크에 의한 것으로 생각되고 있으며, 이는 심장마비 및 뇌졸중으로 이어질 수 있다. 나토키나아제가 혈과 내막의 두께 증가현상을 막을 수 있는지 여부에 대한 실험을 쥐 모델에서 진행했다. 이 모델에서는, 혈관 내로 로즈벵갈 (rose-bengal)을 주입한 후 녹색광 (transluminal green light)을 조사함으로써 대퇴동맥 (femoral artery) 내피에 손상을 입혔다. 내피에 손상을 입힌 지 21일째에 눈에 띄는 혈관 두께 증가현상이 관찰되었다. 나토키나아제의 투여 (50 혹은 100 CU/동물, 38 및 75 FU/동물로 계산됨)는 내피 손상을 가하기 3주전부터 진행되었으며, 손상을 입힌 후에도 3주간 진행되었다. 나토키나아제는 대조군에서 1.28±1.14mm2, 저-농도 및 고-농도의 실험군에서는 각각 0.79±0.60mm2와 0.71±0.27mm2의 면적만큼 내막의 두께 증가현상을 감소시켰다. 대조군과 고-농도 실험군 사이의 혈관 내막두께의 증가량 차이는 매우 크게 나타났다 (p<0.05). 세 그룹간의 내막/중막 비율을 비교했을 때, 두 실험군과 대조군 사이에는 차이가 있었다(p,0.05). 실험군과 대조군 사이에서 조직이 손상된 이후에 혈관폐색 (occlusion)이 생길 때까지 걸리는 시간에는 차이가 없었다. 하지만, 벽재성 혈전 (mural thrombi)에서는 형태학적인 차이가 발견되었다. 대조군에서는, 벽재성 혈전이 혈관 벽에 붙어있는 상태로 혈관의 중심부가 다시 열렸다. 반면, 나토키나아제로 처리한 실험군에서는 혈관 벽 근처의 혈전이 용해되었고, 대부분의 혈전은 혈관 벽 표면으로부터 떨어져 나왔다. 대조군에서 조직손상으로부터 8시간 후의 시점에 혈관 벽에 붙어있는 혈전의 길이가 858±430mm이었다. 나토키나아제를 처리한 실험군에서는 혈전의 길이가 농도-의존적으로 감소했는데, 고농도로 처리한 군에서는 혈전의 길이가 173±105mm로 측정되었다. 이는 대조군과 큰 차이를 보이는 수치이다 (p<0.05). 세 그룹 간의 출혈시간에는 차이가 없었다 (Suzuki et al, 2003).

섬유소분해 활성: 임상연구

나토키나아제가 인간에게도 효과를 발휘할 것이라는 예비증거는 1990년에 Sumi 박사 및 조수들에 의해 처음 보고 되었다. 12명의 건강한 지원자들 (21-55세)에게 2주 간격으로 200g의 낫토 (약 6,000 FU) 혹은 삶은 대두 (대조군)를 투여하는 교차 단일용량 연구 (cross-over single-dose study)를 진행했다. 투여 시점으로부터 2-24시간 사이에 혈액을 채취했다. 대두 대조군과 비교했을 때, 낫토를 투여한 실험군에서 투여 시점으로부터 2, 4, 및 8시간 후에 유글로빈 분해 시간 (ETL)이 크게 감소하는 것을 관찰할 수 있었다. 유글로빈 섬유소분해 활성 (EFA)는 피브린 플레이트의 용해 면적을 측정함으로써 결정했다. 대두 대조군과 비교했을 때, 낫토를 투여한 실험군에서 투여 시점으로부터 2, 4, 8, 및 12시간 후에 EFA가 크게 감소했다. 또 다른 실험에서는, 지원자들에게 나토키나아제가 포함된 2개의 장용성 코팅 (enteric-coated) 캡슐을 식사 후 마다 하루에 3회 (하루에 총 3,000 FU), 총 8일간 투여했다. 혈액은 매일 채취했다. 이 기간동안 EFA는 서서히 증가했다. 혈액 내의 피브린 및 피브리노겐 분해산물 (FDP)들도 측정했다. FDP 수치는 첫날에 크게 치솟았다가 8일에 걸쳐 서서히 감소했다. FDP의 수치는 1-4일 때에 베이스라인과 큰 차이를 보였다 (Sumi et al, 1990).

또 다른 연구에서는, 5명의 지원자 (51-86세)에게 감압 건조된 낫토 30g (본래의 습시료 중량은 200g; 약 6,000 FU)을 구강을 통해 단일 투여했다. 혈액은 2-24시간 사이에 채취했다. 경구투여 후 4-8시간 사이 때 섬유소분해 활성이 관찰되었다. EFA는 투여 후 4시간째에 크게 증가했으며, FDP 수치는 투여 후 6시간 및 8시간 지난 시점에서 크게 증가했다. EFA는 베이스라인 값인 1.9±2.7mm2에서 2시간 후에는 4.5±3.3mm2로, 4시간 후에는 13.3±7.2mm2로, 그리고 8시간 후에는 8.7±7.4mm2로 증가했다. 베이스라인, 6시간, 그리고 8시간 때의 FDP 수치는 각각 0.75±0.52, 5.50±2.74, 그리고 2.75±1.37mcg/ml로 나타났다. 2일차 및 4일차에 낫토를 추가적으로 투여했을 때, FDP는 더욱 감소했다 (Sumi et al, 1996; Sumi & Maruyama, 1998).

성인 30명 (남녀; 평균 나이 59세)을 대상으로 진행한 이중맹점 위약-대조군 연구를 통해, 유지약 (maintenance drug)으로 와파린을 섭취하고 있던 환자들을 대상으로 나토키나아제의 효과를 살펴봤다. 와파린과 나토키나아제의 조합에 대한 이론적 배경은, 나토키나아제가 와파린의 섬유소분해 능력을 안정화시킬 수도 있을 것이라는 가정이다. 실험군에 속한 지원자들은 매일 아침식사 후 2개의 나토키나아제 캡슐 (NSK-II, 1,700 FU)을 총 26주간 섭취했다. 그 결과, 위약을 섭취한 대조군과 비교했을 때 실험군에서의 프로트롬빈 및 프로트롬빈-INR 변화비율 (rate-of-change)이 크게 감소했다 (p<0.05). 이와 같은 치료방법은 60세 이상의 사람들에게 특히 더 효과적이었다. 4개월째가 되는 시점에서 위약 집단과 비교했을 때, 나토키나아제 투여군에서 활성화된 부분트롬보플라스틴 시간 (partial thromboplastin time) 및 프로트롬빈 시간 (prothrombin time)은 참조 값과 더 가깝게 나타났다 (p<0.05). 추가적으로, 활성화된 부분트롬보플라스틴 시간, 프로트롬빈 시간, 그리고 프로트롬빈-INR 시간에서 더 낮은 변화비율이 관찰되었다 (Ninokiya, 2006).

혈소판 응집의 감소, 룰로 형성 및 혈액 점도

생체 밖 실험들과 인간을 대상으로 한 임상연구의 결과, 나토키나아제가 혈액흐름을 개선시키는 일뿐만 아니라, 혈액 점도를 낮춰주고, 적혈구의 점성을 감소시켜주며, 혈소판 응집을 저해하는 것으로 나타났다.

적혈구 응집 및 혈액 점도: 생체 밖

나토키나아제가 적혈구 응집 및 혈액 점도에 미치는 영향을 생체 밖 실험을 통해 측정했다. 혈액 샘플들은 나토키나아제와 함께 배양되었고, 15.6, 31.3, 62.5 그리고 125 활성 단위/ml의 농도에서 대조군과 비교했을 때, 적혈구 응집현상이 각각 21.9%, 25.9%, 49.7%, 그리고 62.0% 만큼 저해되는 것으로 나타났다. 나토키나아제는 낮은 전단속도 (shear rate)에서 혈액의 점도를 감소시켰지만, 높은 전단속도에서는 점도의 변화가 없었다 (Pais et al, 2006).

혈소판 및 적혈구 응집: 케이스-연구

혈액 응집에 대한 NSK-SD의 효과는 네 명의 지원자에게 4,000 FU의 농도를 투여하면서 측정했다. 혈액을 채취한 이후에 나토키나아제를 투여하기 전후의 혈소판 응집 정도를 생체외 (ex-vivo)에서 측정했다. 혈소판이 풍부한 혈장에서 콜라겐 (1ug/ml) 혹은 ADP (2uM)에 의해 응집현상이 유도되었다. 나이가 각각 31, 34, 그리고 59세인 세 명의 남성들에게서 채취한 혈액에서 나토키나아제를 투여한지 6시간 후의 시점에서 ADP-유도 혈소판 응집현상이 50% 저해되었다. 그리고 이들의 혈액에서 콜라겐-유도 혈소판 응집현상의 변화는 관찰되지 않았다. 또 다른 지원자였던 39세의 남성에게서 채취한 혈액에서는 나토키나아제를 투여한지 12시간이 지난 시전에서 콜라겐-유도 혈소판 응집현상이 50% 저해되었으며, ADP-유도 혈소판 응집현상도 적게나마 영향을 받았다 (Takaoka 프레젠테이션, 2005).

적혈구에서 룰로 형성 (적혈구 스태킹 현상)이 활발히 일어나는 것으로 알려진 두 명의 지원자들에게 2,000 FU/일의 농도로 NSK-II를 총 7일간 투여했다. 약물 투여 전, 1주일 후, 그리고 3주일 후의 시점에서 적혈구들을 검사했다. 한 명의 지원자는 35세의 남성 흡연자였고, 다른 한 명의 지원자는 42세의 여성 비흡연자였다. NSK-II를 투여한지 1주일이 경과했을 때, 적혈구들이 정상상태로 돌아왔다. 치료를 3주간 멈추었더니 적혈구들이 다시 룰로 상태로 돌아가는 징조들이 나타났다. 하지만, 이들이 완전히 베이스라인 상태로 돌아간 것은 아니었다.

혈액 점도의 감소: 임상연구

혈액 흐름에 대한 나토키나아제의 효과는, 30-49세 사이의 건강한 지원자 15명(7명의 남성 및 8명의 여성)을 대상으로 실시한 위약-대조군 교차 임상연구를 통해 검사했다. 실험 참가자들은 단일용량으로 3캡슐 (한 캡슐 당 2,000 FU, 총 6,000 FU)의 NSK II (그룹A) 혹은 위약 (그룹P)을 섭취했다. 치료방법을 교차하기 이전에 2주간의 워시아웃 (wash-out) 기간을 가졌다. 혈액의 흐름은 PeriScan PIM II 기법을 이용하여 측정되었다. 그룹A에서는 나토키나아제 투여 80, 120, 및 180분 후, 좌우 중지 (middle finger)에서의 혈액 흐름이 크게 증가했다 (p<0.01). 그룹P와 비교했을 때, 투여 180분 시점에서 효과가 눈에 띄게 증가했다 (그룹P 0.10±0.11V, 그룹A 0.42±0.08V; p=0.034). 베이스라인과 비교했을 때, 그룹A에서는 40, 80, 120 및 180분 시점에서 좌우측 손등의 혈액 흐름 역시도 증가했다. 참가자들을 BMI에 따라 분류했을 때, BMI가 23이상인 참가자들에게 나토키나아제를 투여한 경우에 혈액의 흐름이 증가했다 (p=0.046) (Food Style, 2006).

생체이용률

나토키나아제의 생체이용률은 쥐를 대상으로 장 (intestinal tract)을 통과하는 나토키나아제의 양을 측정하는 연구를 통해 검사되었다. 80mg 농도의 순수한 나토키나아제/kg를 십이지장을 통해 투여 (intraduodenally)했으며, 일정한 간격으로 혈액을 채취했다. 투여 3시간 및 5시간 후에 혈장에서 나토키나아제가 검출되었다. 추가적으로, 나토키나아제를 투여한지 30분이 지난 시점에서 혈장 속의 피브리노겐 분해산물들을 측정했다. 나토키나아제 투여 3시간 및 5시간 이후에, 응고 시간, 혹은 칼슘재첨가 시간 (plasma recalcificaton time)이 베이스라인과 비교했을 때 연장되는 것을 관찰할 수 있었다 (Fujita et al, 1995).

V. 안전성

개요

나토키나아제는 일본의 음식인 낫토 속에 존재하는 효소이다. 즉, 나토키나아제는 1,000년이 넘는 시간동안 유해한 영향 없이 섭취되어온 것이다. JBSL에 의해서 생산되는 NSK는 아래에 나와 있는 여러 연구들을 통해 안전성이 입증된 정제 제품이다. 5종류의 박테리아를 이용한 에임스 연구와 CHL/IU 세포들을 이용한 염색체 변형 연구를 통해 NSK-SD가 돌연변이를 일으키지 않는다는 사실이 증명되었다. 또한 설치류를 대상으로 진행한 단일투여 실험과, 20,000FU/kg의 농도로 28일 및 90일 동안 반복투여 실험을 통해 NSK-FD와 NSK-SD가 독성이 없다는 사실을 증명할 수 있었다. LD50은 20,000 FU/kg (1,000 mg/kg)이상인 것으로 나타났다.

NSK-II의 안전성은, 31명의 건강한 남녀를 대상으로 총 4주간 매일 3 캡슐 (2,000 FU/day)을 섭취하는 무작위적인 이중맹점 임상연구를 통해 검사되었다. 급성 뇌졸중 환자들에서 헤파린과 조합했을 때와, 유지-예방약으로 와파린을 섭취하고 있는 환자들에서 와파린과 조합했을 때의 나토키나아제 안전성에 대한 검사를 진행했다. 두 연구에서 모두, 다른 섬유소분해 약물과 함께 나토키나아제를 안전하게 투여할 수 있었다. 한 명의 여성에게서 나토키나아제와 연관되어 있을 가능성이 있는 소뇌출혈 (cerebellar hemorrhage)이 발생하기도 했지만, 이 환자 같은 경우에는 복잡한 가족내력과 고혈압, 그리고 동시에 저농도의 아스피린을 섭취하고 있었던 등의 변수들이 존재했다. 추가적으로, 그녀가 섭취한 나토키나아제의 강도 및 농도에 대해 자세히 알려진 것이 없었다.

낫토를 만드는데 사용되는 박테리아를 쥐에게 투여했을 때에도, 그 어떠한 감염성, 병원성, 혹은 독성도 발견되지 않았다.

요약을 하자면, 나토키나아제를 권장량만큼 섭취했을 경우에는 안전한 것으로 보인다. 다만 대두에 대한 알레르기를 가진 사람들에게서는 알레르기 반응이 일어날 가능성이 있다. 다른 섬유소분해 약물을 섭취하고 있는 중이거나, 출혈성 질환을 앓고 있는 사람들은 나토키나아제를 투여하기 이전에 담당 의사와 상담할 것을 권장합니다.

전통적 사용

나토키나아제는 일본의 음식인 낫토에 속에 존재하는 효소이다. 즉, 나토키나아제는 1,000년이 넘는 시간동안 유해한 영향 없이 섭취되어온 것이다 (Sumi, 1987).

변이원성 프로필

5종류의 박테리아를 이용한 에임스 실험과 CHL/IU 세포들을 대상으로 진행한 염색체 변형 연구의 결과, 나토키나아제가 돌연변이를 일으키지 않는다는 것을 증명할 수 있었다.

다섯 종류의 박테리아 (Salmonella typhimurium TA98, TA1537, TA100, TA1535, 그리고 Escherichia coli WP2uvrA)를 이용하여 나토키나아제에 의한 돌연변이 유발 가능성을 검사했다. 여섯 개의 농도에서 나토키나아제를 검사했으며, 최대 검사농도는 5,000mcg/plate였다. 음성 및 양성 조절도 포함되었다. 양성 조절에는 AF-2 (2-(2-furyl)-3-(5-nitro-2-fyryl)acrylamide, 9-aminoacridine, 그리고 아지드화 나트륨(sodium azide)과 같이 대사성 활성화 (metabolic activation)가 존재하는 경우와 2-aminoanthracene과 같이 대사성 활성화가 존재하는 경우 (S9 간 호모제네이트 효소)가 포함되어있다. 5,000mcg/plate에서부터 15.5mcg/plate까지의 농도범위 연구를 통해 돌연변이 유발능력이나 성장 저해능력이 발견되지 않았다. 5,000ug에서부터 156ug/plate까지의 농도를 이용한 실험들에서 음성 조절의 2배를 넘어서는 균락수 (colony count)는 발견되지 않았다 (Kobuchisawa Labs, 2003).

암컷 중국 햄스터 (Chinese hamster)의 폐로부터 얻은 CHL/IU 세포들을 이용하여 세포성장 저해 및 염색체 변형에 대한 실험을 진행했다. 나토키나아제 SD (20,000 FU/g)는 0.156mg/ml 이상의 농도에서 세포성장을 저해하는 것으로 나타났다. 염색체 변형 검사는 앞에 나와 있는 것보다는 낮은 농도에서 진행되었다. 나토키나아제 SD는 대사성 활성화가 있거나 없는 상태에서 세포들과 함께 6시간 (단기간) 및 25시간 (장기간) 동안 배양되었다. 25시간이라는 시점이 선택된 것은, CHL/IU 세포주기 (cell cycle)의 1.5배에 달하는 시간이기 때문이다. 대사성 활성화가 없는 상태의 세 가지 농도 (0.156, 0.110, 그리고 0.078 mg/ml)에서 단기간의 염색체 변형 검사를 진행했다. 또한 대사성 활성화가 있는 상태에서는, 이 보다 살짝 낮은 농도 (0.110, 0.078, 그리고 0.055mg/ml)에서 검사가 진행되었다. 장기간의 검사에서는 후자의 농도를 이용하여 실험이 진행했다. 이때 음성적 및 양성적 조절 모두 포함되었다. 이와 같은 실험을 진행한 결과, 모든 농도를 통틀어 5%의 경우에서만 염색체 변형이 관찰되었으며, 농도-의존적인 경향은 나타나지 않았다. 연구자들은 나토키나아제가 CHL/IU 세포들에서는 염색체 변형을 일으키지 않는다는 결론을 내렸다 (Kobuchisawa Labs, 2003).

동물연구

급성 단일투여 연구

냉동 건조된 NSK-FD 가루 (약 10,000 FU/g)응 이용하여, 스프래그-돌리 쥐 (Sprague-Dawley rat)에서 NSK-FD를 구강으로 단일투여 했을 때의 독성 검사를 진행했다. 10마리의 쥐 (수컷 및 암컷 각각 5마리씩)로 이루어진 그룹에게 2,000mg (20,000 FU)/kg 체질량 만큼 NSK-FD를 투여했으며, 같은 수의 쥐로 이루어진 다른 그룹에게는 위약을 투여했다. 모든 동물들은 14일간 관찰되었으며, 마지막에 병리학적 육안검사를 실시했다. 이 연구는 일본 보건복지부에서 제시한 기본 가이드라인 (1997)에 따랐다. 실험을 진행하는 동안에 사망한 동물은 없었다. 투여 하루 후, 두 마리의 수컷 쥐들에게서 설사 증상이 관찰되었으며, 세 마리의 수컷과 모든 암컷에게서 묽은 변이 관찰되었다. 이러한 증상을 제외하고는 14일 동안의 관찰기간동안 아무런 이상 징후가 관찰되지 않았다. 관찰기간동안에 정상적인 체질량 증가 현상이 나타났다. 부검의 과정 중에서도 아무런 이상 양상이 관찰되지 않았다 (BILIS,1999).

28일간의 반복투여 연구

스프래그-돌리 쥐 (Sprague-Dawley rat)를 이용하여, 28일간의 반복투여 연구가 진행되었다. 167mg/kg/day의 농도 (나토키나아제 20,000 FU/g: 3.340 FU/kg/bw)로 수컷과 암컷 각각 6마리에게 나토키나아제가 투여되었다. 같은 수의 쥐로 이루어진 다른 집단에게는 위약이 투여되었다. 쥐들에게 투여된 나토키나아제의 농도는 60kg의 정상인이 한 번에 섭취하는 낫토의 양 (50g)의 100배에 달하는 당량으로 계산되었다. 쥐들의 임상적 징후, 체질량, 음식섭취, 소변검사, 그리고 시력건강 등의 사항들에 대한 관찰이 이루어졌다. 모든 연구 방법은 일본 보건복지부에서 제시한 가이드라인 (1997)에 따른 것이다. 28일이 지난 후에, 혈액학적 및 혈액 생화학적 검사를 위해서 쥐들에게서 혈액을 채취했다. 또한 쥐들을 안락사 시킨 후에, 부검 및 조직 병리학적 검사를 진행했다. 이와 같은 실험 결과, 나토키나아제에 의한 독성은 없는 것으로 결론이 내려졌다 (Kobuchisawa Labs, 2002).

90일간의 반복투여 연구

스프래그-돌리 쥐 (Sprague-Dawley rat)를 이용하여, 90일간의 반복투여 연구도 진행되었다. 이 연구에서는 100, 300, 그리고 1,000mg/kg/day 등 세 가지의 나토키나아제 농도 (21,900 FU/g)에서 실험을 진행했으며, 대조군도 포함되었다. 24마리의 쥐 (암컷 및 수컷이 각각 12마리씩)로 구성된 네 개의 그룹을 대상으로 실험을 진행했다. 모든 연구 방법은 일본 보건복지부에서 제시한 가이드라인 (1997)에 따른 것이다. 연구가 진행되는 동안에 사망, 나토키나아제-관련 임상적 이상 징후, 체질량, 음식섭취, 시력건강, 소변검사 (물 섭취 포함), 혈액 화학적 혹은 병리학적 변화가 관찰되지 않았다 (Bozo Res Ctr, 2004).

임상연구

NSK-II의 안전성은 31명의 건강한 남녀 (20-64세; BMI 18-28사이)를 대상으로 진행한 무작위적인 이중맹점 임상연구를 통해 검사되었다 (Kazuya et al, 2006). 9명의 참가자들 (남성 5명, 여성 4명)에게는 위약이 투여되었으며, 22명의 참가자들 (남성 10명, 여성 12명)에게는 NSK가 투여되었다. 하루 3 캡슐 (2,000 FU)씩 총 4주간 NSK 약물을 투여했으며, 2주간의 관찰기간을 두었다. 실험 참가자들은 연구가 시작하는 시점, 4주간의 치료 후, 그리고 치료 종료 시점으로부터 2주후에 병원을 방문했다. 병원을 방문하는 동안에는 건강과 관련된 인터뷰와 함께, 혈압과 맥박 등의 측정이 이루어졌다. 추가적으로, 혈액 및 소변 샘플을 채취했다. 주관적인 증상들은 매일 일기장에 기록되었다. 두 그룹 모두에서 눈에 띄는 유해영향이 관찰되지 않았다. 위약 그룹에서 보고 된 미약한 유해영향으로는 설사 (4명)와 허리 통증 (1명)이었다. NSK 투여 그룹에서 보고 된 유해영향으로는 설사 (3명), 감기 (2명), 변비 (1명), 여드름 (1명), 위 통증 (1명), 생리통 (1명), 그리고 두통 (1명)이었다. 위약 및 NSK 투여 그룹에서 모두 체질량이 소폭으로 증가하는 현상이 관찰되었지만, 의학적으로 중요한 현상으로 판단될 정도는 아니었다. 두 그룹 모두의 혈액학적 프로필에도 미세한 변화가 있었지만, 이 현상 역시도 의학적으로 중요한 것으로 판단될 정도는 아니었다. 혈압과 맥박, 그리고 소변검사에서 별다른 영향이 관찰되지 않았다. 이 연구의 연구자들은 NSK-II를 매일 3 캡슐 (630mg)씩 총 4주간 섭취하는 것은 안전하다는 결론을 내렸다.

뇌졸중 환자들을 대상으로 나토키나아제가 구강투여 가능한 섬유소분해 약물로써 안전한지에 대한 공개연구가 진행되었다. 이 연구에는 비-심장 근원의 허혈성 뇌졸중으로 인해 의식이 있는 상태로 병원에 입원한 12명의 성인 (남녀: 평균 나이 53.3세)이 포함되어 있었다. 모든 환자들에게는 헤파린 s.c. (7,600 IU/day)와 항-혈소판 약물 (wjshdehdml 아스피린 150mg-325mg 혹은 클로피도그렐)이 투여되었다. 이들은 또한 7일간 나토키나아제를 투여(6,000 FU/day; 2,000FU씩 3회)했다. 이후 실험 참가자들을 3달 (90일)간 모니터링 했다. 연구가 진행되는 동안에 사망이 일어나지 않았다. CT 스캔을 통해 경색부의 출혈성 전환 (hemorrhagic transformation) 현상이 일어나지 않았다는 것을 확인할 수 있었다. 환자들의 상태는 세 개의 국제적 스케일을 통해 분석되었다: National Institute of Health Stroke 스케일, Modified Rankin 스케일, 그리고 Barthel 인덱스. 이 스케일들에 의하면, 5명의 환자들에게서 유익한 반응이 나타났다. 1, 2, 그리고 7일차에 혈액응고 및 섬유소분해에 관한 분석이 진행되었다. 1일차와 비교했을 때 눈에 띄게 변한 요소들은 다음과 같다: 7일차에는 출혈시간이 증가했다, 응고시간은 2일차 및 7일차에 증가했다, 프로트롬빈 시간은 7일차에 감소했다, 활성화된 부분트롬보플라스틴 시간은 2일차에 감소했다, 그리고 D-이량체 수치는 2일차 및 7일차에 감소했다. 나토키나아제의 영향으로 인해 일어난 것으로 보이는 세 가지 현상들이 있었다: 1) 활성화된 부분트롬보플라스틴 시간의 연장, 2) 중간정도의 토혈 (hematemesis), 그리고 3) 비정상적인 간 기능검사. 이 모든 현상들은 일시적인 것이었다. 이 연구의 저자들은 의학적 보조제로써 나토키나아제가 뇌졸중 환자들에게서도 안전하게 투여될 수 있다고 선언했다 (JBSL Study Report, 2004).

더 나아간 연구에서는, 예방적 차원으로 와파린을 섭취하고 있던 환자들에게 나토키나아제를 투여했을 때의 안전성에 대한 검사를 진행했다. 이 연구는 30명의 성인 (남녀: 평균 나이 59세)를 대상으로 진행한 이중맹점 위약-대조군 연구였다. 실험군에 속한 사람들에게는 매일 아침식사 후에 2 캡슐 (1,700 FU)의 나토키나아제 (NSK-II)가 총 26주간 투여되었다. 와파린과 나토키나아제의 조합으로 인한 유해한 영향은 관찰되지 않았으며, 저자들은 이 두 약물을 병행하여 투여하는 것이 가능하다고 제안하고 있다 (Ninokiya, 2006).

케이스 리포트

타이완에 거주하고 있는 52세의 여성이 나토키나아제 400mg을 7일 연속으로 섭취하면서 급성 소뇌출혈을 경험한 사건에 대한 케이스 리포트가 최근에 발표되었다 (Chang et al, 2008). 하지만 이 리포트 속의 환자는 저농도의 아스피린과 항-고혈압 약물을 복용하고 있었다는 사실 때문에 문제가 보다 복잡해진다. 그녀는 또한 고혈압 및 소뇌출혈의 가족내력이 있었다. 또한, 발표된 논문에는 그녀의 예후나 나토키나아제의 복용을 중단한 이후의 상황에 대한 그 어떠한 언급도 없다. 나토키나아제의 브랜드명 및 활성에 대한 정보도 누락되어있었다.

Bacillus subtilis natto의 안전성

낫토를 만들 때 사용하는 박테리아인 Bacillus subtilis에 대한 안전성 검사가 생쥐 (ICR-종: 생후 5주)를 대상으로 진행되었다. 각각 10마리 (각 그룹에 수컷 및 암컷이 각각 5마리씩)의 쥐로 이루어진 두 그룹에 위약 혹은 7.55x10^8의 CFU를 투여했다. 생쥐들은 감염 후 14일간 관찰되었다. 실험 결과, 사망이 발생하지 않았고, 건강에 대한 이상 징후, 체질량 변화, 조직 병리학적 이상 징후 등이 관찰되지 않았다. 또한 부검을 해본 결과, 조직 내에서 박테리아가 발견되지도 않았다. 연구자들은 NSK-SD의 생산에 이용되는 박테리아가 감염성, 병원성, 그리고 독성이 전혀 없다는 결론을 내렸다 (Gifu Research Labs, 2003).

알레르기 리포트

NSK-SD에 첨가된 물질에는 대두가 포함되어있는데, 이것은 알레르기를 유발할 가능성이 있다. 따라서 제품의 상표에는 이와 같은 사실이 정확히 기재되어야 한다 (Japan Bio Science Ingredient Report).

MSDS

NSK-SD에 대한 물질 안전성 데이터 시트가 제공되고 있으며, NSK-SD가 위험요인으로 분류된 물질을 포함하고 있지 않다.

VI. NSK-SD가 타 경쟁사의 단백질과 다른 점

사용한 박테리아의 종류와 대두의 특징에 의해 나토키나아제의 성질이 좌우되고, 산업적 가공 테크닉의 영향도 받는다. JBSL에서는 Bacillus subtilis natto라는 균종을 발견하여 특허를 받아냈으며, 이를 바탕으로 양과 기능성의 측면에서 최고의 나토키나아제를 생산할 수 있다. 또한 회사에서는 자체적인 생산과정 및 대두 재배 테크닉을 이용한다.

단백질, 단백질의 활성, 그리고 비타민 K2 함유량 등의 물리적인 특성을 통해 나토키나아제의 차별성을 확인할 수 있다. 다양한 실험들을 토해 타 경쟁사의 단백질들과 NSK-SD를 비교하여, 그 성질이 다르다는 것을 밝힐 수 있었다.

나토키나아제와 같은 단백질들은 전기영동을 통해 질량, 전하, 그리고 순도에 따라 분리할 수 있다. 이 곳에서는 다양한 전기영동 테크닉 (SDS-PAGE, IEF, 그리고 2-DIGE)을 이용하여 Nu Science Trading, LLC에 의해 생산되는 NattoGold라는 나토키나아제와 Vesta Ingredients, Inc.에 의해 생산되는 NSP-2 및 Ultra NSP-2라는 나토키나아제를 NSK-SD와 비교했다. SDS-PAGE의 결과로 분자량이 서로 다르다는 것을 알 수 있었고, IEF를 통해 전하 (pI)에 차이가 있다는 것을 알 수 있었다. 또한 같은 형광 염색약을 사용한 2-DIGE를 통해 각 단백질들을 비교하기도 했다. 이와 같은 실험들의 결과, NSK-SD와 비교했을 때 타 경쟁사들의 제품들은 서로 다른 분자량과 pI값을 나타낸다는 것을 알 수 있었다. 이 결과들은 NSK-SD가 타 경쟁사들의 단백질들과는 엄연히 다른 물질이라는 것을 알려준다. 이와 같은 물리적 차이들은 결국 기능적 차이로 연결된다.

NSK-SD에 포함된 나토키나아제의 기능적 프로필을 DNP International Co. Inc 및 Vesta Ingredients, Inc에 의해 판매되고 있는 약물들과 비교했다. 이 실험에서는 산화된 인슐린 B-사슬 단백질과 함께 나토키나아제를 섭씨 37도에서 배양했을 때에 생성되는 분해산물들을 비교했다. 분해된 산물들은 HPLC를 통해 분류되었다. 실험 결과, 산화된 인슐린 B-사슬의 분해 패턴이 단백질마다 다르게 나타났다.

타 경쟁사들의 제품들과 NSK-SD의 섬유소분해 활성도 비교했으며, 그 결과는 아래의 도표에 제시되어 있다. 일본의Daiwa Pharmaceutical Co. Ltd.에 의해서 생산되는 나토키나아제인 Nk-CP는 647 FU/g의 활성을 보이는 것으로 나타났다. 이에 비해 NSK-SD의 활성은 20,000 FU/g 이나 된다 (JBSL Analysis Report, 2004년 3월 4일). Nu Science Trading, LLC에 의해 생산되고 있는 NattoGold의 나토키나아제 활성은 15,600 FU/g으로 나타났으며, Vesta Ingredients, Inc에 의해 생산되고 있는 NSP-2 및 Ultra NSP-2는 각각 11,400 FU/g 및 19,000 FU/g의 효소 활성을 보였다.

비타민 K2의 함유량을 측정했을 때, NattoGold, NSP-2, 그리고 Ultra NSP-2의 나토키나아제 모두에서 상당 수준의 비타민 K2가 발견된 반면, NSK-SD에서는 하나도 발견되지 않았다.

제품	활성 (FU/g)	비타민 K2 (ug/g)
NkCP	647	-
NattoGold	15,600	0.49
Nattokinase NSP-2	11,400	1.93
Ultra Nattokinase NSP-2	19,000	2.64
NSK-SD	24,900	없음

VII. 참고 자료

- BILIS (Environmental Biological Life Science research Center, Inc). Final report: Single-oral dose toxicity study of biozyme NSK-FP powder in rats. 1999년 2월 26일

- Bozo Research Center Inc. Report: 13-week oral toxicity study of Nattokinase DS (NSK-SD) in rats. B-5170: 2004년 6월 16일

- Chang YY. Liu JS, Lai SL, Wu HS, Lan MY. Cerebellar hemorrhage provoked by combined use of nattokinase and aspirin in a patient with cerebral microbleeds. Intern Med. 2008: 47(5):467-9

- Ero MP, Lewis BH. Coagulation profile of nattokinase. A study report by Machaon Diagnostics, Inc. 2008년 2월 20일

- Food Style. Improvement of blood flow increase by ingestion of NSK-II. Food Style. 21 2006 Vol.8,,,,

* 본 내용은  일본의 Japan Bio Science Laboratory.,Ltd 보고자료임.

http://www.jbsl-net.com/index.shtml 

낫도키나제(Nattokinase)란?

낫도(納豆)의 효용과 낫도키나제

● 낫도와 낫도키나제

일본의 전통 식품인 「낫도」는, 낫도균이 대두(大豆)에 작용해 발효 해 할 수 있는 식품으로, 1200년전 정도부터 먹게 되어 왔습니다.

이 낫도균이 발효 해 세균이 고분자물질을 생합성하는 효소에는, 프로테아제(단백 분해 효소)가 있어 1925년 홋카이도 제국대학의 오오시마 선생님에 의해 그 정제 및 성질에 대해 보고가 이루어지고 있습니다.

그 후, 낫도균 단백 분해 효소(세린프로테아제)로서 연구 보고가 되어 왔습니다만, 1980년대에 피브린 단백질(혈전의 원인이 되는 단백질)을 분해(용해)하는 효소를 「낫도키나제」로서 명명되었습니다. 낫도키나제는, 낫도의 끈적끈적한 부분에 존재하고 있습니다.

● 낫도키나제의 기능

낫도키나제에는, 혈전의 주성분인 피브린에 직접 움직임 분해(용해)하는 작용, 신체안의 혈전 용해 효소인 우로키나아제의 선구체 프로 우로키나아제를 활성화 하는 작용, 한층 더 혈전 용해 효소 프라스민을 만들어 내는 조직 프라스미노겐아크치베이타(t-PA) 량을 증대시키는 작용이 있습니다.

한층 더 최근의 연구로, 낫도키나제에는 혈전을 녹기 어렵게 하는 혈전 용해 저해 물질 PAI-1 를 분해하는 작용, 오이그로브린 용해 시간의 단축 작용이 있어, 혈전 용해 활성의 증강 작용이 있는 것을 알 수 있어 왔습니다. 게다가 혈압 강하 작용이 있는 일도 확인되어 왔습니다.

혈전(血栓)을 녹이는 낫도키나제

● 혈전의 역할과 공포

혈전이란, 혈관안으로 할 수 있는 혈액의 덩어리로 피브린이라고 하는 단백질이 주성분으로 되어 있어, 깨진 혈관을 수복해 지혈하기 위해서 불가결한 것입니다.

지혈이 완료해, 다친 부분이 수복되면 혈전은 녹여집니다. 이 현상을 선용작용이라고 말합니다. 그렇지만, 혈전을 만드는 기능(응고 작용)과 녹이는 기능(선용작용)과의 밸런스가 무너지거나 가령, 스트레스등에 의해, 혈전이 녹기 어려운 상태가 되면, 혈관안에 혈전이 축적합니다.

이 혈전이 심장의 혈관을 막으면 심근경색, 뇌의 혈관을 막으면 뇌경색등의 혈전증을 일으킵니다.

인공적으로 만든 혈전을 녹이는 낫도키나제

? 1은, 샬레안에 만든 인공 혈전(흰 부분) 위에, 낫도를 두어, 경시 변화를 본 것입니다. 낫도의 주위의 혈전이 시간과 함께 녹아 검게 빠져 보이는 것을 알 수 있습니다.

이것은, 낫도의 끈적끈적한 부분에 존재하고 있는 낫도키나제에 의해, 이 용해 현상(작용)이 일어납니다.

 ● 낫도 섭취와 혈전 분해산물(FDP)

정상인 5명의 자원봉사에게 대해, 기능 성분이 많이 포함되는 낫토를 섭취한 후의 혈액중의 혈전 분해 산물(FDP)을 라텍스 응집법으로 측정해, FDP의 변화를 그래프로 한 것입니다. (그림 2)

Control는, 낫토를 1회 섭취한 것입니다.　2 days는, 2일 후 2번째를 섭취시킨 것, 4 days는, 4일 후 게다가 3번째를 섭취시킨 것입니다. 그 값은, 1회의 낫토 섭취로 4시간 후 급격하게 증가해, 그 후 6시간 후, 8시간 후와 감소하는 것이 알 수 있습니다.

게다가, 그 낫토 섭취에 의한 피크치는 1회먹었을 때에 비교해 2회, 3회로 계속 먹고 있으면(자) 감소해 갈 것입니다. 즉 계속적인 섭취에 의해 혈전(피브린)이 서서히 녹아 가는 것을 알 수 있습니다.

◆ 토픽 《동물 실험에 의한 낫도키나제의 장관 흡수에 대해》

래트에 의한 실험에 의해, 낫도키나제가 장관으로부터 흡수되어 흡수된 낫도키나제가 혈장 피브리노겐을 분해했던 것이 확인되고 있습니다.

＜참고 문헌＞

Fujita M , Hong K, Ito Y, Misawa S, Takeuchi N, Kariya K, et al. 　

Transport of nattokinase across the rat intestinal tract.

Biol. Pharm. Bull. 1995;18(9):1194-6.

( 발초한 기록 일역예 )

정상 래트의 십이지장에 낫도키나제(이하 NK라고 생략한다) 80 mg/kg를 투여한 결과, 장관내 이후를 시사하는 혈장내 피브리노겐의 분해가 확인되었다.

효소를 십이지장에 투여 후, 일정시간 후에 채혈해, 얻을 수 있던 혈장중의 NK작용에 의한 피브리노겐의 분해를 전기 영동(SDS-PAGE)과 항피브리노겐γ쇠사슬 항체에 의해 웨스턴 블롯 분석으로 조사했다.

항피브리노겐γ쇠사슬 항체가 결합하는 항원성 부위인 270 kDa 단편은, 30분 이내에 출현해, 그리고 200 kDa 단편화가 되어, 105 kDa까지 분해되었다.

이것은, 피브리노겐이(270, 200 kDa등의) 몇개의 중간 단편을 형성하면서, 105 kDa 단편까지 분해되었다고 하는 것을 시사하고 있다. 분해 과정에 평행 해, 혈장재응고 시간이 현저하게 연장했다.

효소 투여 후, 3및 5시간 후에 채혈한 혈액보다 얻을 수 있던 혈장중으로부터, SDS-PAGE(전기 영동)와 항NK항체에 의한 웨스턴 블롯 분석으로 NK도 검출되었다. 따라서 십이지장에 투여한 NK가 래트 장관으로부터 흡수되어 혈장중의 피브리노겐을 분해했다고 결론 붙일 수 있다.

● 용해 저해 물질과 낫도키나제

혈전을 용해하는 기능의 저하도 혈전증의 위험 인자가 됩니다.

혈전의 녹기 쉬움은, 용해 촉진 물질인 「t-PA」라고, 용해를 저해하는 「PAI－1」(이)라고 하는 물질의 밸런스에 의해 정해집니다.

PAI-1은, 비만이나 고콜레스테롤 및 고중성 지방혈증, 인슐린 저항성(혈당치가 높다) 등, 또 스트레스나 염증에 의해 증가합니다.

즉, 혈전이 녹기 어려운 상태가 됩니다. 낫도키나제는, 이 용해 저해 물질 「PAI-1」을 분해(불활성화)시키는 작용이 있습니다.

● PAI-1의 日??動-히나이변동-(새벽녘에 많은 혈전증)

뇌경색이나 심근경색의 발증은, 새벽녘에 많이 발병한다고 말해집니다만, 이것은 PAI-1의 서커디안리듬이 관여하고 있다고 생각되고 있습니다. 그림 5는, PAI-1의 피중농도의 히나이 변동을 나타내고 있습니다.

아침 고가를 나타내, 낮부터 저녁에 걸쳐 낮아지고 있는 것으로부터, 새벽녘은 혈전이 생기기 쉬운 것을 압니다.

● 낫도키나제 섭취에 의한 오이그로브린 용해 시간의 단축도

그림6 에서는, 동물 실험(래트)으로 3주간 낫도키나제를 섭취한 것과 컨트롤로 ECLT(오이그로브린 용해 시간)에 관해서 검토한 것으로 유의차를 나와 있는 것으로 압니다.

즉, 선용상태가 우위이며, 혈액 졸졸 상태가 되는 것을 나타내고 있습니다.

낫도키나제로 생활 습관병 대책

● 낫토 VS　부록 [supplement]

시판의 낫토에 포함되는 낫도키나제 활성은 불균일이 있습니다.

또, 조리의 방법에 따라서는 활성이 없어지는 일도 있습니다.

[supplement] 부록은, 성분이 안정되어 있으므로 안심입니다.

낫도키나제는 저녁식사 후나 취침전에 섭취하는 것이 좋다고 생각됩니다.

[supplement] 부록은, 시간을 신경쓰지 않고, 취침전이라도 간편하게 섭취할 수 있습니다.

낫도 특유의, 신경이 쓰이는 수상한 끈적끈적함을 제로로 했다

[supplement] 부록은, 섭취하기 쉽게 휴대하기 편리해서, 언제라도 섭취할 수 있습니다.

낫도는 영양가가 높고, 칼로리도 푸딩체의 함유량도 신경이 쓰입니다만···

[supplement] 부록은 칼로리도, 컷 되고 있어, 신경이 쓰이지 않습니다.

● 낫도키나제의 섭취에 대해

낫도키나제의 추천 섭취량은, 2000FU/일 이상입니다.

시판의 낫토에 포함되는 낫도키나제 활성은, 불균일은 있습니다만 1 팩 50 g의 것으로 평균 1400FU/팩 정도, 높은 것으로, 2000FU/팩 포함됩니다. (그림 7)

낫도키나제가 혈전 성분 피브린을 분해하는 힘은, 「FU」(피브린 분해 유니트)이라고 하는 단위로 나타납니다.

낫도키나제 활성 측정법에는 여러 가지 있습니다만, 재현성이 있어, 한편 정확하게 수치화할 수 있는 피브린 분해 방법(FU단위)이 이용됩니다. (그림 8)

섭취하는 시간대는, 혈전은 심야부터 아침 일찍에 걸쳐 할 수 있기 쉽기 때문에, 저녁식사 후나 자기 전에 섭취하는 것이 좋다고 생각됩니다.

40대 이상인 분, 스트레스가 많은 분, 혈압이 높으신 분, 고지혈증이나 당뇨병등의 혈액 점성의 높은 대승의 가르침에는, 정기적인 섭취를 추천합니다.  

분해법플로우 

※1. 순품의 낫도키나제의 경우는 가능하지만, 피브린에 비해 친화성이 낮기 때문에 외형의 힘값이 낮아진다

※2. 프라스민 활성을 측정했을 때 마셔 IU와 표기할 수 있다

※3. H-D-Val-Leu-Lys-pNA

※4. 우로키나아제 활성을 측정했을 때 마셔 IU와 표기할 수 있다

※5. pyro-Glu-Gly-Arg-pNA

※6. 용해 면적으로부터 기존의 피브린 분해 효소 활성으로 환산해, U표기하는 일도 있다

●낫도키나제 vs 가짜 낫도키나제 감별법

가짜 낫도키나제의 동향

근년 낫도키나제가 아닌 효소가 낫도키나제를 표방해 판매되고 있어 이것들에 의한 건강 피해가 위구심 되고 있습니다. 이것들 가짜가 프로테아제이면, 시험관내 혹은 샬레상의 피브린을 대든지 소든지 분해 가능합니다. 그렇지만, 이것이 즉 생체내에서의 반응이라고는 할 수 없지 못하고, 또, 안전성에 대해서도 의문시되고 있습니다. 해당 효소가 낫도키나제인가 아닌가는 활성 측정에서는 감별 불가능하고, 감별법의 병용이 필요합니다.

낫도키나제 간이 감별법

낫도키나제 간이 판별법이란, 30개의 아미노산으로부터 완성되는 산화 인슐린 B쇠사슬을 검사대상 물체의 효소로 분해해, 그 만큼해양식을 HPLC로 확인하는 방법입니다. 사용하고 있는 효소에 의해, 분해 양식이 다르므로, 낫도키나제 혹은 다른 효소가 혼입하고 있지 않는가 한눈에 판별할 수 있습니다.

정제 낫도키나제, JNKA 심사제증표 상품 및 낫도키나제를 표방하는 가짜 낫도키나제 상품의 산화 인슐린 B쇠사슬 분해 양식을 그림 9에 나타냅니다. 비교하면, 가짜 낫도키나제 상품의 분해 양식이 낫도키나제의 분해 양식과 다르고 있습니다. 그 때문에 낫도키나제가 아닌 것을 압니다.

낫도키나제 간이 감별법에 대해 자세하게 아시고 싶은 분은, 협회 사무국에서 문의해 주세요

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낫도균(納豆菌)이란?

● 낫도균

낫도균(그림 1, 그림 2)은, 1906년에 사와무라진농학 박사에 의해 발견되어【Bacillus natto Sawamura】와 이름 붙여졌습니다. 그 후, 1968년에 의약품 제조 승인, 1990년 동물용 의약품 승인, 1996년 사료첨가물 허가가 취득되어 근년 건강식품으로서 이용되게 되어 주목받고 있습니다.

낫도균은, 일본 고래의 실같은 낫도, 네팔의 시네마(Kinema), 타이의 트우아나오(Thuanao) 등 무염 발효 대두 식품을 만들어 내는 균입니다. 엄밀한 의미에서의 장내 상주균은 아니고, 이른바 고초균의 일종으로, 내생 포자(아포)를 가지는, 자연계에서 가장 안정된 균종입니다.

낫도균은 장내에서 활성화 해, 여러 가지의 생리 작용을 나타내 각 동물이 본래 보유하고 있는 유익균총(유산균, 비피더스균등)을 증강, 안정화 합니다. 그 결과, 당연히 병원균이나 부패균등의 유해균은 배제됩니다. 또, 항균 작용이 강하고, Bacilipin나 Subtilin등의 항생 물질을 세균이 고분자물질을 생합성하는 하는 일도 알려져 있습니다. 그 외 근년 낫도균의 항암 작용이나 면역 기능 증강 작용도 보고되고 있습니다.

● 낫도균의 기능

1. 유산균 등 유용균의 증식

2. 장내 유해균의 억제

3. 상기 2항목에 의해, 장내 세균총의 밸런스를 정돈한다.

4. 강력한 단백 분해 효소와 전분 분해 효소를 세균이 고분자물질을 생합성하는 한다.

5. 비타민 B군을 풍부하게 합성한다.

● 낫도균의 섭취에 대해

낫도균(B.subtilis BN)의 추천 섭취량은, 7.5×108개/일 입니다.

이것은, 혼합 배양에 의한 유산균의 증식 촉진, 장내 유해균 및 병원균 증식 억제의 효과, 래트에 있어서의 반복 경구투여 독성 시험에 의해 안전성을 확인해, 경제성 및 사용 실적을 근거로 해 설정되었습니다.

● 낫도균에 의한 실험 보고

● 동물 유래 병원균에 대한 낫도균(B.subtilis BN)의 발육 저해 작용

● 낫도균(B.subtilis BN)의 항균 활성 작용

● 연속 유동 배양에 의한 낫도균(B.subtilis BN)과 칸지다균(C.albicans)의 혼합 배양 실험

비타민K2란?

● 비타민 K

비타민 K는 혈액 응고를 촉진하는 인자와 혈액 응고를 억제하는 인자의 양쪽 모두를 활성화 하는, 정상적인 혈액 응고에 불가결한 영양소로, 많이 섭취해도 혈액이 굳어지기 쉬워질 것은 없습니다.

더욱 최근의 연구에서는, 뼈를 형성하는 단백질 「오스테오카르신」의 활성화나, 동맥에의 칼슘의 침착을 저해해 동맥 경화나 심장병을 예방하는 단백질 「매트릭스 Gla 단백」의 활성화 등, 매우 중요한 기능을 하고 있는 것이 분명해져, 건강한 생활을 보내는데 있어서 불가결의 영양소입니다.

비타민 K에는 크게 나누어, 야채나 해초에 포함되어 있는 비타민 K1와 미생물이 세균이 고분자물질을 생합성하는 하는 비타민 K2가 있습니다. 비타민 K1는 일종류 뿐입니다만, 비타민 K2에는 측쇄의 길이가 다른 종류가 존재해, 메나키논으로 불리고 있습니다. 낫토에 포함되어 있는 비타민 K2는 메나키논 7(MK-7)으로, 낫도는 온 세상에서 가장 많은 비타민 K2가 포함되어 있는 식품입니다.

최근의 연구에 의해, 낫토에 포함되어 있는 비타민 K2=MK-7은, 비타민 K 중(안)에서 가장 영양가가 높은 일 분명해졌습니다.

Ⅰ     

● 비타민 K2의 주된 기능

Ⅰ     I ※. 비타민 K를 섭취하면(자) 먼저 간장에 받아들여져 정상적인 혈액 응고를 재촉합니다.　

Ⅱ※. 그 다음에 혈액중을 이동하면서 매트릭스 Gla 단백질을 활성화 해 동맥 경화의 원인

이 되는 칼슘의 혈관에의 침착을 막습니다.

Ⅲ※. 마지막에 골수로 오스테오카르신을 활성화 해, 뼈의 형성을 재촉합니다.　

퇴행기 골다공증 환자의 (분)편의 혈액중의 VK농도는 정상인과 비교해 낮은 것이 밝혀져 있습니다.

 또, 낫토 소비 금액(양)과 대퇴골 경부 골절에는 부의 상관이 있어, 낫토를 많이 먹는 지역만큼 골절율이 낮은 것이 밝혀졌습니다. 한편, 대두 가공 식품의 섭취량과의 상관은 없었습니다.

◆ 토픽　《당신은 자신의 동맥의 칼슘량을 알고 계십니까? 》

타임　2005년 9 월호

시게아츠인 무증상 대동맥혹의 병진행은, 대동맥판의 석회화만이 지표가 되는 것을 알고 있어 연령, 성별, 심장 혈관병의 유무, 고혈압, 당뇨병, 고콜레스테롤가혈증은 발증의 지표는 되지 않는 것이 밝혀져 있습니다.

From the Magazine | Health

The Newest Risk Factor

By ALICE PARK

Posted Sunday, Aug. 28, 2005

● 칼슘 부록(1 g) 섭취하면(자) 동맥 질환이 증가하는 경향이 있다.

~5년간의 사람 투여 시험의 결과~

● 비타민 K2(MK-7)는 심장병의 리스크를 내린다

네델란드 실시된, 약 5,000명을 대상으로 한 10년간의 조사에서, 비타민 K2(MK-7)를 많이 섭취한 그룹(하루 평균 45μg)은, 적은 그룹(하루 평균 18μg)에 비해 심장병의 발증율로 심장에 의한 사망률이 반감했던 것(적)이 밝혀졌습니다.

한편, 야채나 해초에 포함되어 있는 비타민 K1에는 상관이 인정되지 않았습니다.

● MK-4와 MK-7의 흡수 효율의 차이

한 번에 420μg의 비타민 K2를 섭취하면(자), MK-7은 혈액중의 양이 증가하는 것이 확인할 수 있었습니다만, MK-4를 섭취한 그룹에서는, 혈액중에 MK-4를 검출할 수 없었습니다.

MK-4는 흡수율이 낮은가 매우 망가지기 쉽기 위해(때문에), 장관으로부터 흡수되어 간장에 이르기까지 망가져 버릴 가능성이 있습니다.

JNKA마크

● JNKA 마크(심사제증표)

JNKA 마크는 당협회가 정한 규격 기준 적합품의 증표이며, JNKA 마크를 표시 짊어진다고 하는 경우에는, 해당 제품을 협회에 제출해, 당협회의 검사에 대해 규격 기준에 합격을 하지 않으면 안됩니다. 합격한 제품에는 증표와 그것을 설명하는 문언을 기재할 수가 있습니다.

낫도키나제(Nattokinase) 규격 기준

   

 1. 낫도균(Bacillus Natto)의 생성물을 함유 한다

 2. 규격 성분 낫도키나제 2000 FU/day 이상

 3. 해당 제품에 기재되는 낫도키나제의

    함유량은, FU표시를 이용한다

 4. 함유 하는 낫도키나제의 안전성의 증명을 가진다

납두균(Bacillus natto) 규격 기준

 

 1. 일본식품·의약품에 이용되고 있다

　 납두균(Bacillus Natto)을 함유 한다

2. 규격 성분 납두균수 7.5×108개 /day

3. 함유 하는 납두균의 안전성의 증명을 가진다

표시와 표현에 대해

● 낫도키나제 JNKA 마크의 기본 사이즈는 엔의 직경을 20 mm로 한다.

● 납두균의 JNKA 마크의 기본 사이즈는 높이가 20 mm로 한다.

● JNKA와는 JAPAN NATTOKINASE ASSOCIATION의 약호이다.

● 협회 마크의 인쇄에 대해서는, 협회가 작성한 청쇄(로고 마크)를 사용한다.

● 협회 마크에 대한 설명은 다음의 통일한 문장으로 표현하는 것.

「일본 낫도키나제 협회 마크는 협회의 엄정한 심사를 패스했다

제품만 그 사용이 허가된 것입니다」

신청서류

·시험 검사 의뢰서·검사대상 물체(상품 내용량 100 g이상)

※신청은, 협회 회원인 것이 조건입니다.

신청료

1 제품에 대해 130,000엔 (검사료·협회 마크 표시료등 함)

신청 기간

약 2개월간　※긴급의 경우에는 사전에 상담해 주세요.

표시 유효기간

1년간(1년 경과 이전에 계속 신청이 필요합니다)

신청처

(우)101-0021토쿄도 치요다구 소토칸다 6쵸메 16번 9호

일본 낫도키나제 협회 사무국

Tel 03-3836-3136　Fax 03-3836-3126

http://j-nattokinase.org/index.html  site

ご??

?長?ご??

日本ナットウキナ?ゼ協? ?長

目?昭彦（めぐろ あきひこ）

日本ナットウキナ?ゼ協?は2003年1月に日本の?統的食品の一種である納豆由?成分を含有する機能性健康食品の??外製造業者と販?業者により設立されました。

本協?は近年ナットウキナ?ゼ、ビタミンK2（メナキノン-７）、納豆菌（Bacillus subtilis natto）などの納豆由?成分が??外で非常に注目される?況にあります。 特に最近は食の安全と品質が?しく要求されております。?って安全および高品質な製品を安定供給する目的を達成するためにも、 また、消費者に納豆由?成分の健康機能を認知されるよう啓蒙活動や高品質を守るため規格基準の啓蒙等の活動をしています。

本協?はその社?的責任と信?のもと、一層の品質向上を目指し努力する所存でございます。 またそのことが消費者の健康と安心?安全なサプリメントの供給につながることを自?し、 今後も活動して?りたいと思います。本協?の活動に更なるご協力とご理解を何卒宜しくお願い申し上げます。

일본 낫도키나제 협회 회장

메구로 아키히코

일본 낫도키나제 협회는 2003년 1월에 일본의 전통적 식품의 일종인 낫토 유래 성분을 함유 하는 기능성 건강식품의 국내(일본)외 제조업자와 판매업자에 의해 설립되었습니다. 

본협회는 근년 낫도키나제, 비타민 K2(메나키논 7), 납두균(Bacillus subtilis natto)등의 낫토 유래 성분이 국내(일본)외에서 매우 주목받는 상황에 있습니다.  특히 최근에는 식품의 안전과 품질이 어렵게 요구되고 있습니다. 따라서 안전 및 고품질인 제품을 안정공급 하는 목적을 달성하기 위해서도, 또, 소비자에게 낫토 유래 성분의 건강 기능이 인지되도록(듯이) 계몽 활동이나 고품질을 지키기 위해 규격 기준의 계몽등의 활동을 하고 있습니다. 

본협회는 그 사회적 책임과 신뢰의 아래, 한층 더 품질 향상을 목표로 해 노력할 생각입니다.  또 그것이 소비자의 건강과 안심·안전한 부록의 공급으로 연결되는 것을 자각해, 향후도 활동해 오고 싶다고 생각합니다. 본협회의 활동에 한층 더 협력과 이해를 제발 잘 부탁 말씀드립니다. 

名?顧問?ご??

ＪＮＫＡ名?顧問　　納豆博士

小泉 武夫（こいずみ たけお）

?門は?造???酵?。
1943年、福島?生まれ。?家は代?酒造業を?む。
東京農業大??造?科卒業。東京農業大??授。農?博士。

日本ナットウキナ?ゼ協?名?顧問に就任しました、小泉武夫です。

私の?門は“?酵”なのですが、?酵というのは、目に見えない微生物が食材に?きかけ、有益な物質を作り出していく現象を言います。 たとえば納豆は、納豆菌という生命?によって、大豆がさまざまな滋養成分をもった別の食品になっているのです。

納豆菌は大豆のタンパク質を分解して、アミノ酸をつくり出したり、ビタミン類を生成します。また、納豆菌が作り出すナットウキナ?ゼという酵素があり、 これは血栓を溶解する?きを持っています。
このように、?酵食品には微生物によってつくりだされた有益物質が含まれており、健康を維持する力を持っています。
美味しいだけでない、納豆のすばらしい機能性をぜひ知っていただきたいと思います。
このようなことを踏まえ、協?活動を側面から?援していきたいと考えています。

JNKA 명예 고문 낫도 박사

 코이즈미 타케오(小泉 武夫（こいずみ たけお）)

 전문은 양조학·발효학.

1943년, 후쿠시마현 태생. 친가는 대 들주조업을 영위한다.

토쿄 농업대학 양조 학과 졸업. 토쿄 농업대학 교수. 농학 박사. 

일본 낫도키나제 협회 명예 고문으로 취임했습니다, 코이즈미 타케오입니다. 

 나의 전문은“발효”입니다만, 발효라고 하는 것은, 눈에 보이지 않는 미생물이 식품 재료에 제의해 유익한 물질을 만들어 내 가는 현상을 말합니다.  예를 들어 낫도는, 납두균이라고 하는 생명체에 의해, 대두가 다양한 자양 성분을 가진 다른 식품이 되어 있습니다. 

납두균은 대두의 단백질을 분해해, 아미노산을 만들어 내거나 비타민류를 생성합니다. 또, 납두균이 만들어 내는 낫도키나제라고 하는 효소가 있어, 이것은 혈전을 용해하는 기능을 가지고 있습니다.

이와 같이, 발효식품에는 미생물에 의해 만들어 내진 유익 물질이 포함되어 있어 건강을 유지하는 힘을 가지고 있습니다.

맛있는 것뿐이 아닌, 낫도의 훌륭한 기능성을 꼭 알아 주셨으면 하고 생각합니다.

이러한 것을 근거로 해 협회 활동을 측면으로부터 응원해 나가고 싶다고 생각하고 있습니다.

일본생물과학연구소 한국지점

경기도 부천시 원미구 역곡동 80-4 백강빌딩 705호

전화 : 032)341-2531  Fax : 032)341-2530

HP : 010-3719-4094

낫도에이스, 코마미네랄, 비오자임, 아시타바,NSK-SD

http://www.jbsl-net.com/index.shtml  일본본사

http://j-nattokinase.org/index.html  낫도키나제협회  JNKA

NSK II, Natto2000

Natural Super Kinase II -Japan

Natto2000 - Korea

90Capsule type

**일본 오사카에 위치한 일본생물과학연구소는 일본 낫도키나제 시장점유율90% 이상을차지하고있으며한국의낫도키나제제품을 선보이고있습니다 아울러 일본 낫도키나제협회(JNKA)에서 인정한제품**

JNKA (일본낫도키나제협회)마크를 꼭 확인해주세요
 

■ JNKA 마크 취득 상품·등록 회원

당협회에서 JNKA 마크 사용 허가한 상품·등록 회원은 아래와 같습니다。

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<商品名>	<登??員名>	<登?期間>
?ナットウキナ?ゼEX	日本ネイチャ?ズサンシャインプロダクツ?	2008/12/10～2009/12/9
?ス?パ?キナ?ゼDX	日本ケフィア?	2009/2/1～2010/1/31
?生命の粒	?ウイルコ	2009/2/1～2010/1/31
?萌?仙　SaRaEx	?ピュア	2009/3/9～2010/3/31
?久??　SUPER　Q10	?フェニックスコスモ	2009/3/9～2010/3/31
?久??　GOLD	?フェニックスコスモ	2009/3/23～2010/3/31
?NSK-E	マルサンヘルスサ?ビス?	2009/3/23～2010/3/31
?ナットウキナ?ゼ	?アミュレット	2009/4/8～2010/4/30
??豆心	?エルシ?コ?ポレ?ション	2009/4/17～2010/5/31
?ナチュラルス?パ?キナ?ゼⅡ	?日本生物.科??究所	2009/7/1～2010/6/30
?ナチュラルプラスEX	サンビアン?	2009/7/17～2010/7/31
?PS.ナットウキナ?ゼ	?コンテック	2009/11/9～2010/11/30

海外

<商品名>	<登??員名>	<登?期間>
?統一 納豆、紅?	生達化學製藥股?有限公司	2009/3/23～2010/3/31
?納豆?海豹油	生達化學製藥股?有限公司	2009/3/23～2010/3/31
?納豆?紅?	生達化學製藥股?有限公司	2009/3/31～2010/3/31
?納豆の元	拜爾汀生技營養有限公司	2009/4/17～2010/5/31
?雅芳　康采?新納豆膠?	生達化學製藥股?有限公司	2009/4/17～2010/5/31
?農好納豆紅?カプセル	生展生物科技股?有限公司	2009/5/19～2010/5/31
?納豆精　NATTOKIN	?外化學工業股?有限公司	2009/6/5～2010/6/30
?活納多　納豆紅?膠?	生達化學製藥股?有限公司	2009/7/13～2010/7/31
?ナットウエ?ス　長方型	?日本生物.科??究所	2009/7/13～2010/7/31
?Natto Plasmin?	Dr. Hittich Gesundheitsprodukte	2009/7/28～2010/7/31
?ナットウエ?ス（Gold型）	?日本生物.科??究所	2009/12/10～2010/12/31

2009年12月現在

http://j-nattokinase.org/jnka_goods.html

＜警告＞ 

下記の??のJNKAマ?ク?載商品は?協?が許可した商品ではありません。デザイン、側面記載は、?協?登??員の?日本生物.科??究所の製品を?似たものになっておりますが、一切?係ないとの事です。類似品にご注意ください。

아래와 같은 사진의 JNKA 마크 게재 상품은 당협회가 허가한 상품이 아닙니다.디자인, 측면 기재는, 당협회 등록 회원의 일본 생물.과학 연구소의 제품을 흉내낸 것이 되어 있습니다만, 모두 관계없다는 것입니다.유사품에 주의해 주십시오.

側面記載

下記??のJNKAマ?クを封印シ?ルに使用している商品は、?協?が許可した商品ではありません。裏面記載に、原料供給元に日本生物.科??究所と記載されていますが、?協?登??員の?日本生物.科??究所とは一切?係ないとの事です。類似品にご注意ください。

아래와 같은 사진의 JNKA 마크를 봉인 씰에 사용하고 있는 상품은, 당협회가 허가한 상품이 아닙니다.이면 기재에, 원료 공급 바탕으로 일본 생물.과학 연구소라고 기재되어 있습니다만, 당협회 등록 회원의 일본 생물.과학 연구소와는 모두 관계없다는 것입니다.유사품에 주의해 주십시오.

裏面記載

　

[가포선생]

3(쓰리)골드낫도입니다. 맛있습니다.기억해주세요.감사합니다.꾸벅쉿 ! 일본음식이라 오해를 받을수도 있습니다.