2024 하계 면역혈청 파트 (이승민, 이예원, 장민경)

[면역혈청= 박재준 파트장님, 김재균 선생님, 김승현 선생님, 유민수 선생님] 면역혈청파트는 총 두 분류로 나누어집니다. 이틀 당 한 파트씩 돌아가며 업무를 배우게 됩니다. 한 분은 김재균 선생님, 다른 두 분은 유민수 선생님, 김승현 선생님께 배웁니다. [김재균 선생님] 1. Allostation Advansure alloview2.0 ⁃ 검사 항목= mast test (알러지 108종 검사) ⁃ 3시간40분~4시간 소요 -정성검사/ 모듈타입으로 많은 양 처리, 러닝타임 짧음 ⁃질문 Q1. 혈청이 혼탁한 이유? A1. TG(중성지방)가 높을 때, 식후 채혈했을때 Q2. 빌리루빈 수치가 높으면 혈청이 어떻게 변하는지? A2. 노랗게 변함 2. Naivos : BECKAN COULTER ⁃ 유세포 분석기 ⁃ 검사종류 1) hematopoietic stem cell(CD34+) -조혈모세포 검사 2) lymphocyte subset -NK, T, B cell/ T4,T8 검사 3) Leukemia Immunophenotyping 3. Phadia 200 ⁃ 알레르기 및 자가면역질환 진단 -정량검사 4. Mutas WAKO i30 ⁃ 검사종류= AFP, AFP-L3, PIVKA II 등 -원발성 간암 *종양표지자 알고 가면 이해하기 쉽습니다. *전체적으로 기계와 검사 설명을 들었습니다. [김승현, 유민수 선생님] *요일 별 검사 항목 - 월: ANA / myco 화: TB 수: HSV 목: ANA / myco 금: TB 1. VIDAS-BIOMERIEUX ⁃ 검사종류=EBNA, CMV IgM, CMV IgG, VZV IgG 등 * 선생님들께서 VIDAS 기계 설정을 마치신 후에 기계가 배치해준 화면을 보여주며 시약과 기기에 꽂을 strip과 SPR을 냉장고에서 꺼내주십니다. SPR을 해당하는 칸에 꽂으신 후, 해당 검사를 진행할 검체를 피펫을 사용해 검체를 분주하는 곳에 분주하시면 됩니다. 2. NOVA view system- QUANTA-Lyser240 ⁃ ANA (Anti-nuclear antibody) -Hep-2 -간접면역형광법 *컴퓨터로 사진보여주시고 그에 대한 자가시험을 보게해주셨습니다.(5세트×15문제) 틀려도 자기자신만 알기 때문에 걱정하지 않으셔도 됩니다. 3. Thunder Blot ⁃ 검사종류= Mycoplasma, HSV(Herpes simplex virus) 검사 ⁃ 검사 소요 시간: 2시간 ~ 2시간 30분 정도 ① SST tube 내 분리된 serum양을 확인한 후, 1mL 이상이면 따로 tube에 옮기지 않았고, 그 이하일 경우에는 serum만 따로 3ml tube에 담아 SST tube에 꽂아 넣었습니다. ② SST tube 내 fibrin이 육안으로 확인되면, 옆에 있던 얇은 나무 막대를 사용해 살살 저어주며 제거해주었습니다. ③ 검체를 다시 내려둘 때는 최대한 살살 내려두어 검체가 튀는 일이 없도록 주의하라고 말씀해주셨습니다. ④ Tunder/Blot과 연결된 모니터에서 “ADD” button을 누른 후, 검체 바코드를 찍어 환자의 일련번호가 동일한지 확인후 검정 rack에 꽂았습니다. ⑤ 모니터에 검체 인식이 잘 되었는지 확인 후에 ‘Done’ 버튼을 누르고, 검체를 다 넣었으면 모니터에 표시된 control, 대조군을 확인하여 정해진 위치에 넣어준 후 검사 작동하였습니다. *기계에 환자검체 바코드 찍어보게 하셨습니다. 4. BIO-FLASH ⁃ 검사종류= Cardiolipin G,M , CCA, MPO, PR3 등 자가면역질환 검사 *기계 설명 들었습니다. 5. Manual 1) Cold Agglutinin Test ⁃ 검사 과정 (1) 5mL green tube 9개를 세우고, 제 1관에는 1.5mL, 나머지 관 (2-9 tube)에는 saline 1mL 씩 분주한다. (2) 제 1관에 혈청 0.5mL를 넣고 잘 섞은 후 1.0mL를 제 2관으로 옮긴다. (3) 차례로 제 9관까지 옮긴 후 (=시리얼 희석), 제 9관에서는 1.0mL를 버린다. - 희석된 혈청에 2% 혈구 부유액을 100μL씩 떨어트린다. (4) 잘 mix 하여 냉장고에서 24시간 반응시킨다. (5) 24시간 후 꺼내 즉시 (실온화 되기 전) agglutinin 측정 (6) 역가는 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024까지 측정된다. * 1:4부터 1:1024까지 단계적으로 희석한 검체의 응집을 확인합니다. 희석하기 위해 saline을 파이펫팅 하여 분주하는 것을 실습생이 직접 하게끔 해주십니다. 선생님께서 시간에 제한을 두지 않으시니 조급하게 하지 마시고, 천천히 잘 확인하며 진행하시면 됩니다. 2) Cryoglobulin Test ⁃ 검사 과정 한 환자 당 3개의 모세관에 각각 검체를 넣어 실링왁스로 막은 후 냉장보관 한 뒤, 다음날부터 3일간 하루에 모세관 1개씩 검사를 진행합니다. 모세관를 부러뜨렸을 때 실처럼 이어지는 응집물이 생기면 양성, 아니면 음성입니다. 양성이 나오는 경우는 매우 드물다고 합니다. * 모세관에 검체를 넣어 실링왁스로 막아 왁스에 세워두는 것과 다음날 모세관을 부러뜨리는 걸 실습생에게 해보도록 합니다. 3) Widal Test -열병인 장티푸스와 파라티푸스 진단에 이용되는 검사로 응집반응을 보는 검사입니다. RPR card 위 3cm diameter circles 4개에 환자의 serum을 한 방울씩 떨어뜨립니다. 나무막대기로 펴준 후 salmonella O, H antigen , salmonella group A,B 총 4가지 시약을 한 방울씩 떨어뜨린 후 Rotate에 놓아둡니다. 시약을 떨어뜨린 후 정확히 딱 1분 후 응집여부를 판독합니다. *시약을 떨어뜨릴 때 sample과 닿지않게 거리를 두고 drop 하셔야 정량을 떨어뜨릴 수 있습니다. 4) FUO study(hantann, 쯔쯔가무시, leptospira) -코로나 키트처럼 검사용 디바이스에 환자검체 분주한 후, 희석액 3방울을 떨어뜨립니다. 15분 경과 후 결과를 판독합니다. 두줄이면 양성, 한줄이면 음성이며 hantann, 쯔쯔가무시, leptospira 세가지를 합쳐 FUO라고 부릅니다. 5) Calprotectin(Stool 검사) 혈변, 염증성 장질환 증상을 보이는 환자들을 대상으로 하는 위 장관 질환 선별검사입니다. Stool 검체를 채취하여 tube에 넣은 후, vortex mixer로 30초~1분 mix합니다. 그 후 BIO- FLASH에 넣어 검사합니다. * 출근시간은 8시 10분~8시 20분 출근하시면 라텍스 장갑을 착용 하신 후 유민수,김승현 선생님 책장 위에 ED wipe로 책상,기기 등 먼지 쌓인 부분을 닦아놓으면 좋을 것 같습니다. 닦을 땐 모니터가 있는 책상을 먼저 닦고, 실험 테이블을 제일 마지막에 닦아야 합니다.(실험 테이블이기 때문에 오염물이 가장 많음) 장갑과 티슈는 의료폐기물에 버리시면 됩니다. *전체적으로 기계와 검사 설명을 듣는게 대부분이고 검사 관련된 지침서 주셔서 지침서를 참고하시면 됩니다. *앉아서 공부할 시간이 많고 궁금한 점은 편하게 물어보시면 됩니다.