<div><p>1. 2권p264, 형질전환법에서, 목적dna는 플라스미드로 실험하는데,</p><p>그림엔 선형dna로 나와있어서요. 편의상 이렇게 그린것이죠?</p><p>선형dna를 써도 그림13.42처럼 짝수번 재조합되면 형질전환이 가능한데,</p><p>굳이 플라스미드로 하는 이유는 무엇인가요? 굳이 재조합이 안되더라도 형질이 바뀔수 있으니까 그런것인가요? <br></p></div><p><br></p><p>2. 진핵의 경우는 플라스미드를 넣어주면 재조합이 되어야만 형질전환이 될거같은데,, 이 재조합될 확률이 우연히 서열이 유사하지 않은 이상 너무 적지 않나요?</p><p><br></p><p>3. 형질도입의 경우는 세균의 유전자를 일부 가지고 나가는 거니까 서열이 유사해서 내성유전자를 안넣어줘도 다른 대장균에 감염이 될거같은데, 형질전환이나 접합(F플라스미드)은 굳이 필요없는 플라스미드는 갖지 않고 버리니까 내성유전자를 꼭 선택마커로 넣어줘야 하는건가요? 혹은 대사플라스미드라서 필요성이 있어도 되구요..!</p><p><br></p><p>4. p264에 형질전환시 짝수번 재조합되어야 한다고 했는데, 원형 플라스미드를 넣어주면 한번만 재조합돼도 큰 원형dna로 재조합이 가능한거 아닌가요?</p><p><br></p><p>5. p267 예제에서, A-B-C 순인데</p><p>AB 동시형질전환율은 0.33, AC는 0.31입니다.</p><p>따라서 AB와 AC가 거의 차이가 안나니까 자연스럽게 BC는 AB거리보다 가깝게 그려주면 될거같은데 왜 이 두 거리는 따지기가 애매하다고 하신건가요?</p><p><br></p><p>6. p273 예제에서, 유도물질을 안넣어준 경우는 IPTG뿐만 아니라 알로락토오스도 없다고 가정하는건가요? 젖당이 있는 환경이면 자연스럽게 알로락토오스는 있을수밖에 없지않나요?ㅜ</p><p><br></p><p>감사합니다.<br></p>
<!-- -->
첫댓글2.형질전환은 박테리아의 유전정보 교환 방법 중 하나로, 진핵에서 고려하지 않습니다. 3.네 4.삽입되려면 목적 유전자 양끝에서 한번씩 재조합 되어야하므로 짝수번으로 최소는 2번이죠. 5.A를 기준으로 한 상대적인 거리만 계산한 것이므로 B와 C사이 거리는 예측할 수 없습니다. 6.이 예제에서는 유도물질로 IPTG만 고려하고 있습니다.
답변 잘 해 주셨습니다. 1. 네. 원래 실험실에서 DNA는 벡터에 넣어서 모든 조작을 합니다. 2. 네. 그래서 일부러 knock out 실험에서는 neoR kt 두 유전자를 넣어서 제네티신과 젠시클로비어 환경에서 키우는 겁니다. 4. 한 번 재조합으로는 상동재조합이 되지 않습니다.
감사합니다! 3. 그렇다면 p145 플라스미드 분류에서 내성/대사/성 플라스미드가 있는데 여기서 성 플라스미드는 다른 세균에 접합하여 전달한후 이걸 버리지 않게 하기 위해선 꼭 내성/대성 플라스미드중 하나엔 속하는 것이죠? 4. 둘다 원형이라면, p247 재조합 그림처럼 한번만 재조합돼도 두 핵산이 이어지지 않나요? 7.그림 13.42처럼 형질전환은 꼭 내성/대사유전자 등 필요한게 아니더라도 서열만 비슷하면 재조합되어 형질전환 될 수 있는것인가요?
첫댓글 2.형질전환은 박테리아의 유전정보 교환 방법 중 하나로, 진핵에서 고려하지 않습니다.
3.네
4.삽입되려면 목적 유전자 양끝에서 한번씩 재조합 되어야하므로 짝수번으로 최소는 2번이죠.
5.A를 기준으로 한 상대적인 거리만 계산한 것이므로 B와 C사이 거리는 예측할 수 없습니다.
6.이 예제에서는 유도물질로 IPTG만 고려하고 있습니다.
답변 잘 해 주셨습니다. 1. 네. 원래 실험실에서 DNA는 벡터에 넣어서 모든 조작을 합니다. 2. 네. 그래서 일부러 knock out 실험에서는 neoR kt 두 유전자를 넣어서 제네티신과 젠시클로비어 환경에서 키우는 겁니다. 4. 한 번 재조합으로는 상동재조합이 되지 않습니다.
감사합니다! 3. 그렇다면 p145 플라스미드 분류에서 내성/대사/성 플라스미드가 있는데 여기서 성 플라스미드는 다른 세균에 접합하여 전달한후 이걸 버리지 않게 하기 위해선 꼭 내성/대성 플라스미드중 하나엔 속하는 것이죠?
4. 둘다 원형이라면, p247 재조합 그림처럼 한번만 재조합돼도 두 핵산이 이어지지 않나요?
7.그림 13.42처럼 형질전환은 꼭 내성/대사유전자 등 필요한게 아니더라도 서열만 비슷하면 재조합되어 형질전환 될 수 있는것인가요?
@희동2 3. 11장 플라스미드 부분을 다시 확인하기 바랍니다. 성플라스미드는 독약-해독제 시스템을 사용하는 별개의 플라스미드입니다. 4. 이어지는게 아니라 상동 재조합을 시킬려는 겁니다. 목적을 잘 확인하기 바랍니다.
@천우신조 감사합니다. 4. 상동재조합이란게 서열이 비슷해서 무작위로 교차되는 것인데, 플라스미드를 형질전환시켰을때 한번만 교차(재조합)되어도 두 핵산이 이어지면서 플라스미드의 유전자가 세균dna 서열에 들어오게 되면 목적을 달성하게 된거 아닌가요?
@희동2 목적이 상동 재조합이지 두 DNA가 융합된걸 얻고 싶은게 아니죠. 실험 목적을 잘 확인하고 질문하기 바랍니다.