스크랩 전상용 교수팀의 골수유래 중간줄기세포 척수손상 2상 임상 연구 발표논문

[카피카피(김은식)]

논문 재 정리 및 번역

전상룡 교수팀의 골수유래 중간줄기세포 척수손상 2상 임상 연구 발표논문

초록:

Tissue Engineering and Regenerative Medicine, Vol. 7, No. 3, pp 316-322 (2010)

｜Original Article｜

Treatment of Spinal Cord Injury with Bone Marrow-Derived,

Cultured Autologous Mesenchymal Stem Cells

골수 유래 배양 된 자가 중간 엽 줄기 세포로 척수 손상의 치료

Sang Ryong Jeon1*, Jin Hoon Park1, Jung Hwan Lee2, Dae Yul Kim2, Hyun Soo Kim4, Inn Young Sung2,

Gyong Hyo Choi2, Min Ho Jeon2, and Guang Gook Kim3

1Department of Neurological Surgery, 2Department of Rehabilitation Medicine, 3Department of Neurology, Asan Medical Center,

University of Ulsan, College of Medicine, 4Department of Hematooncology, Wonju College of Medicine, Yonsei University

(Received: May 9th, 2010; Accepted: July 1st, 2010)

조직 공학 및 재생 의학, 권. 7, 제 3 호, PP 316-322 (2010) 기존 자료 와 척수 손상의 치료 골수 유래,배양 된자가 중간 엽 줄기 세포전상용1 *, 박 진 훈 1, 이정환 Lee2, 김대율2, 김현수 4, 성인영2 , 최경호2전민호2 김강국3 울산대학교 의과대학 서울 아산 병원의 1.신경 외과, 2.재활 의학과, 3.신경과,4. 연세대학교 원주 의과대학 혈액종양학과 (접수 : 5 월 9 일, 2010; 허용 : 7 월 1 일, 2010)

Abstract :

초록

A number of animal studies have assessed the neurological benefits of stem cell therapy in spinal cord injury, showing that injected adult stem cells create an environment conducive for axonal regeneration.

동물 연구의 다수는 척수 손상에서 줄기세포 치료의 신경학적 장점(이익)을 평가했고, 성체줄기세포 주입은 축삭 재생을 위한 도움이 되는 것을 만든다는 것을 보여 줍니다.

These studies have also demonstrated the safety of adult stem cell injection.

이러한 연구는 성체 줄기 세포 주입의 안전성을 증명하고 있습니다.

Despite these generally positive findings, few human trials have been performed.

전반적으로 긍정적인 결과에도 불구하고, 몇 사람의 실험이 수행되어 왔습니다.

Here, we initiated a clinical pilot study to analyze the effectiveness of autologous mesenchymal stem cell therapy for spinal cord injury in humans using changes in electrophysiological studies and magnetic resonance imaging (MRI) to quantitatively eval‎uate the results.

여기서 우리는 인간 척수손상에서 중간엽줄기세포치료의 효과를 분석하기 위해 전기 생리학적 연구에서 변화 및 자기공명영상(MRI)를 사용하여 그 결과에 정량적 평가(객관적 데티터 자료를 통한 평가)를 위해 임상 시험연구를 시작했습니다.

A total of 8 x 106 autologous mesenchymal stem cells (MSCs) were injected into the intramedullary space of ten cervical cord injured patients, and 4 x 107 cells were distributed into the intradural space.

총 800만개의 자가 중간엽줄기세포를 10명의 경수환자의 척수관내 공간에 주입(주사)하고, 4000만개 세포를 경막 공간에 배포(주입)하였습니다.

During the follow-up period (4 and 8 weeks after the first operation), 5 x 107 MSCs were injected by lumbar tapping.

(첫 번째 수술 후 4에서 8주 )추적 관찰 기간 동안, 5000만개 중간엽줄기세포를 요추천자 방법으로 주입하였습니다.

Results were eval‎uated preoperatively and during the third and sixth postoperative month by assessing Frankel/ASIA motor grade, measuring electrophysiological parameters (electromyography, nerve conduction velocity, somatosensory evoked potential, motor evoked potential), and enhanced MRI.

결과는 수술전과 수술 후 3개월에서 6개월 동안 프랭클 / 아시아 운동기능의 등급을 평가하는 전기 생리학(상) 매개 변수 (Electromyography:EMG,(근전도 , 근전도 검사), Nerve conduction velocity:NCV(신경전도 검사),Somatosensory Evoked Potential:SEP (체성감각유발전위검사),Motor Evoked Potential:MEP(운동유발 전위검사)를 측정하고, MRI(자기공명영상)으로 평가하였습니다.

There were no serious complications or side effects in any of the ten patients treated using the indicated protocol.

지정된 실험 계획안을 이용하여 치료 받은 환자 10 명 중 어떤 심각한 합병증(까다로운 문제이나 부작용은 없었습니다.

One patient suffered moderate paresthesia during the first 10 months that subsided spontaneously.

한 환자가 처음 10개월 동안 약간의 감각이상을 겪었고 자연적(자발적으로)으로 진정되었습니다,

Six patients exhibited motor power changes; in three of these, performance of daily life tasks was improved.

여서명의 환자는 운동기능의 변화를 보였습니다.: 이들의 세 사람에서, 일상작업수행 검사에서 호전(향상)되었습니다.

Electrophysiological and MRI changes were observed in five and six patients, respectively.

전기 생리학 및 MRI(자기공명영상)의 변화는 각각 5와 6 환자들에서 관찰되었습니다.

Direct autologous MSC injection into the spinal cord was safe and caused no additional neurological damage.

직접 자가 중간엽줄기세포를 척수에 주입하는 것은 안전하였고 추가적인 신경학적 손상이 발생하지 않았습니다.

Furthermore, autologous MSC therapy resulted in neurological improvement, electrophysiological changes, and/or MRI changes in some cervical cord injured

patients.

뿐만 아니라, 자가(자기유래) 중간엽줄기세포 치료는 어떤 경수 손상 환자에서 신경의(신경학의) 호전, 전기생리학 변화 그리고 또 MRI 변화에 결과입니다.

Additional studies on the use of MSCs for SCI in larger patient populations are warranted to confirm‎ these results.

추가적인 연구는 큰 환자군에서 척수손상에 대한 중간엽줄기세포의 이용에 대한 이러한 근거 사실을 확인하는 것입니다.

1. Introduction

소개

A number of animal studies have assessed the efficacy of stem cell therapy in spinal cord injury (SCI) and assessed the mechanisms of neurological improvement.

동물 연구의 몇몇은 척수 손상 (SCI)에서 줄기 세포 요법의 효능을 평가하고 신경(학) 호전의 작용을 평가했습니다.

These studies have shown that injected adult stem cells create an environment conducive for axonal regeneration, and have demonstrated the safety of adult stem cell injection.

이들 연구들은 성체 줄기 세포 주입이 축삭 재생에 대한 좋은 환경을 만드는 것을 보여주며, 성체 줄기 세포 주입(주사)의 안전성을 입증하고 있습니다.

However, human trials of adult stem cells have rarely been performed in either the spinal cord or the brain.

하지만, 성체 줄기 세포의 인체 실험은 척수 또는 뇌 어느 하나에서 거의 실행되지 않았습니다(거의 드물게 실행됩니다) .

To address this understudied question, we initiated a clinical pilot study to analyze the effect of autologous mesenchymal stem cell (MSC) therapy for SCI in humans, using changes in electrophysiological parameters and magnetic resonance imaging (MRI) to eval‎uate the results.

이 대역 질문에 답하기 위해. 우리는 사람에 척수손상에 대한 자가중간엽줄세포 치료의 효과를 분석하기 위해 전기 생리 매개변수 및 자기 공명 영상 (MRI)의 변화를 이용하여 결과를 평가하기 위해서 임상실험을 시작했다.

2. Materials and Methods

재료 및 방법

Ten patients with complete motor deficits, paraplegia or quadriplegia due to traumatic cervical SCI (lasting longer than one month after injury), without muscle atrophy or psychiatric problems, and in otherwise in good general condition, were enrolled in this study.

10명의 환자들은 완전히 운동기능이 없고 , 외상성 경부척수손상(손상 후 1개월 이상 지속)으로 인한 하지마비 또는 사지하비 일 것 , 근육위축 또는 정신 문제가 없을 것, 그 외 일반적으로 좋은 건강상태의 환자 일 것을 이 연구에 대상으로 하였습니다,

Autologous MSCs were harvested from each patient’ iliac bone and expanded by culturing for 4 weeks.

자가 중간엽줄기세포는 각 환자의 장골 뼈에서 채취하여 4주간 배양으로 (세포수를) 증가 시켰습니다.

All manufacturing and product testing procedures for the generation of clinical-grade autologous MSCs were performed under good manufacturing conditions (FCB-Pharmicell Co.Ltd., Korea).

자가 중간엽 줄기세포 임상 수순의 임상을 실시할 수 있는 연구자들을(세대) 위해 모든 제조 및 제품 시험 절차는 좋은 제조 조건 하 (FCB-Pharmicell 주., 한국) 에서 수행 하였습니다.

Mononuclear cells were separated from the bone marrow (BM) by density gradient centrifugation (Histopaque-1077; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) and washed with phosphate-buffered saline (PBS).

단핵세포는 밀도 구배 원심분리(Histopaque-1077: 알드리치, 세인트루이스, MO, USA)로 골수로부터 분리시켰고 인상 완충 식염수(PBS)로 세척하였습니다.

Cells were resuspended in low-glucose Dulbecco’ modified Eagle medium (DMEM;

Gibco, Grand Island, NY, USA) containing 10% fetal bovine serum (Gibco, Australia) and 100 U/mL penicillin/100 μg/mL streptomycin (Gibco), and plated at a density of 2-3×105 cells/cm2 in 75 cm2 flasks.

세포는 10 % 소 태아 혈청 (Gibco, Australia), 및 100 U / ㎖ 페니실린, 100 ㎍ / ㎖의 스트렙토 마이신 (Gibco) 포함된 낮은 포도당 둘베코 만든 수정 이글 배지(DMEM, Gibco, Grand Island, NY, USA)서 재현탁하고, 75cm2 플라스크에서 2 ~ 3 × 105 cells/cm2의 밀도로 코팅하였습니다.

Cultures were maintained at 37℃ in a humidified 5% CO2 atmosphere.

배양은 이산화탄소 5%로 가습된 공기에서 37 ℃로 유지 하였습니다.

After 5-7 days, nonadherent cells were removed by replacing the medium, and the adherent cells were cultured for an additional 2-3 days.

5-7 일 후, 비접착성 세포는 배지를 교체하여 제거하고, 접착 세포를 추가로 2 ~ 3 일 배양 하였습니다.

When the cultures approached confluence (70%-80%), the adherent cells were detached by treating with a Trypsin/EDTA solution(Gibco) and replated at a density of 4-5×103 cells/cm2 in 175cm2 flasks.

배양물들이 융합했을 때(70%-80%), 부착성 세포들을 트립신 / EDTA(Ethylene diamine Tetra acetic acid) 용액 (Gibco)으로 처리하여 분리하고 175cm2 (넓이의) 플라스크에 4-5 × 103 cells/cm2(제콥센티미터당 세포수)의 밀도로 면을 전면적으로 다시 만들었습니다.

Cells for infusion were serially subcultured up to passage five.

주입을 위한 세포를 연속적으로 최대 5 계대 배양 (성공)하였습니다.

During culture, some passage one or two cells were harvested and cryopreserved in 10% dimethyl sulfoxide (Sigma-Aldrich) and 90% FBS for the second and third infusions.

배양 동안에, 두 번째 및 세 번째 주입을 위한 10 % 디메틸 술폭 시드 (시그마 - 알드리치)과 90 % 소 태아 혈청에서 일부 성공한(통과한) 하나 또는 두 세포들을 채취(수확)하고 동결 보존 하였습니다.

On the day of injection, MSCs were harvested using Trypsin/EDTA, washed twice with PBS and once with saline solution, and resuspended at a final concentration of 0.8×107 cells/mL((1밀리리터(㎖)=0.001리터(ℓ)1밀리리터당 세포수) in saline solution.

주입(주사) 당일, 중간 엽 줄기 세포를 트립신 / EDTA를 사용하여 채취하고 인산 완충 식염수로 두번과 한번은 식염수로 세척하고, 생리 식염수에 밀리밀터당 800만개 세포의 (0.8 × 107 세포/ mL) 최종 농도로 재현탁 하였습니다.

Criteria for release of MSCs for clinical use included viability greater than 90%, absence of microbial contamination (bacteria, fungus, virus, or mycoplasma) when tested 3-4 days before administration, expression‎ of CD73 and CD105 by more than 90% of cells, and absence of CD14, CD34, and CD45 by less than 3% of cells, as assessed by flow cytometry.

임상 사용을 위한 중간 엽 줄기 세포의 방출에 대한(평가 결정에 대한 ) 기준은 90 % 이상 생존 능력을 포함하고,

관리하기 전 3-4일 시험(테스트)때 미생물 오염(세균, 곰팡이, 바이러스 또는 마이코 플라스마)이 없었고, ,

유동세포 계측법에 의한 평가로서, 세포의 90 % 이상에 항원CD73 및 항원CD105의 발현 및 세포의 3 % 미만에 항원 CD14, CD34 및 CD45가 없었습니다.

After laminectomy and dura incision, a total of 8×106 autologous mesenchymal stem cells (MSCs) were injected into the intramedullary space of study subjects, and 4 x 107 cells were distributed into the intradural space.

척추 후궁 절제술 및 경막 절개 한 후, 총 800 백만 개 자가 중간 엽 줄기 세포 (중간 엽 줄기 세포)의 , 연구 대상자의 골수(척수내) 공간에 주입했습니다.

그리고 4000만개 세포를 세포 막내 공간으로 주입(배포)했습니다.

During the follow-up period, 5×107 MSCs were injected by lumbar tapping 4 and 8 weeks after the first operation.

추적관찰기간동안 , 처음 수술 후 4-8주 요추천자법으로 5000만개 중간엽줄기세포를 주입했습니다.

Results were eval‎uated preoperatively and during the third and sixth postoperative

month by assessment of Frankel/ASIA motor grade;

결과는 수술 전 및 수술 후 3-6개월 동안 프랭클 / 아시아 모터 등급의 평가에 의해 평가했습니다.:

measurement of electrophysiological parameters, including electromyography (EMG), nerve conduction velocity (NCV), somatosensory evoked potential (SEP), and motor evoked potential (MEP); and enhanced MRI.

전기생리학의 매개 변수 측정으로, 근전도를 (EMG) 포함한, 신경 전도 속도 (NCV)는 체성 감각유발활동 전위 (SEP) 그리고 운동유발활동 전위 (MEP)로 했고: 그리고 조영증강 자기공명 영상(MRI)로 했습니다.

3. Results

결과

Ten patients with the demographic features shown in Table 1 were treated with above protocol.

환자 10명을 표 1에서 인구학적 특성을 보여주며 상단 계획안 대해 다루고 있습니다.

Four patients were ASIA A grade and the remaining six were grade B.

4명의 환자들은 아시아 A급 그리고 나머지 6명은 아시아 B급입니다.

The post-injury duration was minimally 1 month and maximally 108 months.

손상 후 기간은 최소한 한 달에서 최대 108개월 입니다.

Although there was no change in ASIA grade, there were motor power improvements of the upper extremities in six patients (Patients 3, 4, 6, 8, 9, and 10).

비록 아시아 등급의 변화는 없었지만, 6명의 환자(환자 3,4,6,8,9,그리고 10)에서 상지(팔)의 운동기능이 호전(향상)되었습니다.

In three of these patients (Patients 4, 6, and 9), performance of daily motor tasks was improved.

이들 환자들(환자 4, 6, 9)의 세 명에서, 일상작업의 수행(실시)검사는 호전 되었습니다.

After

treatment, Patient 4 was able to prepare meals by herself with the aid of an elbow brace;

치료 후, 환자 4는 팔꿈치 버팀대의 도움으로 혼자 식사를 준비 할 수 있게 되었습니다.;

Patient 6 could rise to a sitting position from supine position without assistance;

환자 6은 도움 없이 앙와위에서 앉은 자세로 일어 날 수 있었습니다.

and Patient 9 could grasp a water glass unassisted (Table 2, 3).

그리고 환자 9는 남의 도움 없이 물 잔을 잡았습니다.(table 2,3)

Electrophysiological improvements were observed in five patients.

전기생리학 호전은 5명 환자에서 관찰되었습니다.

Initially, none of the patients had a measurable MEP, but SEPs initially were detectable in three patients (Patients 6, 9, and 10).

처음에, 운동유발전위(검사)를 할 수 있는 환자가 아무도 없었고, 하지만 SEPs(패혈증)이 처음에 체성감각 전위 검사는 세 명의 환자(환자 6,910)에서 발견할 수 있었습니다.

After treatment, five patients (Patients 6, 7, 8, 9, and 10) showed improved EP values (Table 2).

치료 후, 다섯 명의 환자(환자6.7.8.9.그리고 10) 호전 된 EP(전기생리학 측정값) 값 (표 2)을 나타냈습니다.

MRI changes were observed in seven patients by postoperative months six to ten, as shown in Figures.

자기공명영상 변화는 그림과 같이 수술 후 6-10개월에 관찰되었습니다.

In Patient 1, who showed no clinical or electrophysiological changes, there was a disappearance of low signal intensity in contusion site and appearance of high signal intensity at the distal part of contusion site.

환자 1에서, 환자1은 치료나 생리학 변화는 나타나지 않았고, 좌상(손상)부위에서 낮은 신호 강도가 사라짐과 좌상 부위 끝 부분에서 높은 신호 강도를 나타났습니다.

In Patient 2, although there were no

Figure 1. In Patient 1, T2 weighted image of the follow -up MRI showed disappearance of low signal intensity in contusion site and appearance of high signal intensity at the distal part of contusion site.

그림 1. 환자 1에서, MRI(자기공명영상) 추적의 T2(관찰하고자 부위를 하얗게 보이게 하는 것) 강조(표시) 영상은 좌상 (타박상) 부분에서 낮은 신호 강도의 사라짐과 좌상(손상) 부분의 말단에 높은 신호 강도의 나타남을 보였습니다.

Figure 2. In Patient 2, T2 weighted image of the follow -up MRI showed decrease of high signal intensity in C2 level of spinal cord.

그림 2. 환자 2에서, 추적 자기공명영사(MRI)의 T2(관찰하고자 부위를 하얗게 보이게 하는 것) 강조 영상은 척수의 경추2번 에서 높은 신호 강도의 감소를 보였습니다.

Figure 3. In Patient 4, decrease of cavity size and change of cavity

shape was shown in T2 weighted image of the follow -up MRI.

Stem Cell Treatment of Spinal Cord Injury.

그림 3. 환자 4에서, 상처(공동)의 크기의 감소와 상처(공동) 모양의 변화는 척수손상의 줄기세포 치료 추적 MRI(자기공명영상)의 T2(관찰하고자 부위를 하얗게 보이게 하는 것) 강조(설명) 영상에서 보였습니다.

Stem Cell Treatment of Spinal Cord Injury

척수손상의 줄기세포 치료

Figure 4. In Patient 5, there was a thickening of the proximal cord above the level of the injury in T2 weighted image of the follow -up MRI.

그림 4. 환자 5에서, MRI(자기공명영상) 추적의 T2 강조 영상에서 손상의 수준 위에 근위부 척수의 농축(두꺼워)이 있었습니다.

Figure 5. In Patient 6, high signal spot in proximal portion to contusion site of spinal cord was appeared and enlarged in T2 weighted image of the follow -up MRI.

그림 5. 환자 6에서, 추적 MRI(자기공명영상)의 T2 강조 영상에서 척수의 좌상 부위의 근위부 부분에서 높은 신호 자리가 나타났고 확대되었습니다.

Figure 6. In Patient 7, cavity size was decreased and dorsal side of spinal cord around the cavity was thickened in T2 weighted image of the follow -up MRI.

그림 6. 환자 7에서, MRI(자기공명영상) 추적의 T2 강조 영상에서 상처(공동)의 크기가 감소하고 척수 주위의 틍쪽에 있는 상처(공동)은 두꺼워졌습니다.

Figure 7. In Patient 9, thickening of spinal cord at proximal and distal portion to injured site was shown in T2 weighted image of the follow -up MRI.

그림 7. 환자 9에서, 추적 MRI(자기공명영상) 의 T2 강조 영상에서 근위부 척수와 손상 끝 부분 농축이 있음을 보였습니다.

Sang Ryong Jeon et al.

In Patient 2, although there were no neurological or electrophysiological changes, the high-signal intensity territory was decreased in T2-weighted MR images.

환자 2에서, 비록 신경학이나 생기생리학(상) 변화는 없지만, 높은 신호 강도 영역은 T2 강조 MRI(자기공명영상)에서 감소했습니다.

In Patient 3, despite clinical motor improvement, there were no electrophysiological or MRI changes compared to the preoperative state.

환자 3에서, 치료에서 운동기능의 호전에도 불구하고, 수술 전 상태에 비해 전기 생리학 또는 MRI 변화가 없었습니다.

In Patient 4, upper extremity power was so improved that the patient could eat by herself.

환자 4에서, 팔(상지) 운동 기능은 환자가 그녀 환자서 먹을 수 있을 만큼 호전 되었습니다.

In addition, there was slight improvement of compound muscle action potential in upper and lower extremities compared with the preoperative values and MR images showed a slight decrease in high signal volume, indicating decreased cavity size.

또한, 상지 및 하지를 수술전 값으로 비교에서 복합 근육 활동전위의 약간의 개선과 자기공명영상은 높은 신호 용량(볼륨)에서 약간의 감소를 보였고, 상처(공동)크기 감소를 나타내는, MRI 영상은 높은 신호 볼륨에서 약간의 감소를 보여 주었습니다.

In Patient 5, although there were no clinical or electrophysiological changes, there

was a thickening of the proximal cord above the level of the injury in T2-weighted MR image.

환자 5에서, 비록 치료(임상)와 전기생리학변화는 없었지만, T2 강조 자기공명영상에서 손상의 수순 위 근위부의 농축(두껍게)이 있었습니다.

In Patient 6, upper extremity motor power, especially elbow extension and flexion,

improved, as did MEP and SEP.

환자 6에서, 상지 운동기능, 특히 팔꿈치 펌과 구부림은,운동유발 전위검사 (MEP:Motor Evoked Potential)와 체성감각유발전위검사(SEP:Somatosensory Evoked Potential )가 그랬던 것 처럼 호전 되었습니다.

High signal spot in proximal portion to contusion site of spinal cord was appeared and enlarged on follow–up MRI.

척수의 좌상(손상)부분에 근위부(몸 중심부) 부분에서 높은 신호 자리가 추적관찰 자기공명영상에 나타났고 확대되었습니다.

In Patient 7, MEP and SEP were improved, although there was no clinical improvement.

환자 7에서, 운동유발 전위 검사와 체성감각유발전위 검사는, 비록 치료에서 호전은 없었지만 호전되었습니다.

Follow-up MR image showed decreased cavity size and dorsal side of spinal cord around the cavity was thickened.

추적관찰 자기공명영상은 상처(공동) 크기가 감소한 것과 척수 주위 등쪽 부위의 상처(공동)이 두꺼워진 것을 보여 주었습니다.

In Patient 8, wrist extension (both wrists) improved and SEP/MEP also

improved, but there were no MRI changes.

환자 8에서 ,손목 관절펌( 손목관절 펌근육) (두 손목) 호전되었고 그리고 체감감각유발전위검사와 역시 호전되었습니다, 그러나 자기공명영상 변화는 없었습니다.

In Patient 9, bilateral upper extremity motor power and MEP improved, and the patient could grasp a water glass without assistance.

환자 9에서 , 양측 상지( 양 팔) 운동기능 그리고 자기공명영상에서 향상되었습니다, 그리고 이 환자는 도움 없이 물 잔을 쥘 수 있었습니다.

MR image showed a thickening of spinal cord at proximal and distal portion to the injured site.

자기공명영상은 척수 근위부와 손상 부위 끝부분에 농축(두꺼움)을 보여주었습니다.

In this patient, trunk sensory responses improved to such an extent that local anesthetics were required for lumbar tapping.

이 환자에서, 신경간 감각 반응은 요추천자를 위해 극소마취제를 요구할 정도로 호전되었습니다.

Patient 10 exhibited clinical motor and SEP improvements, but MEP and MR images were unchanged.

환자 10에서, 치료(임상적)적 운동과 체감전위검사 호전을 나타냈지만, 운동유발전위검사와 자기공명상은 변화가 없었습니다.

With the exception of one patient (Patient 4), who suffered paresthesia in the trunk and lower extremities for 10 months, no patients exhibited serious complications or side effects of autologous MSC transplantation, including infection, neurological aggravation.

한 환자(환자 4)를 제외하고는, 그는 10개월간 신경간에서 무감각과 10 개월간 하지 마비를 겪었고, 환자는 심각한 까다로운 문제 또는 자가 중간엽줄기세포 이식의 역효과, 간염을 포함한, 신경학적 악화도 없었습니다.

And also, in the follow-up MRI images of all cases, there was no syrinx formation or cellular hyperplasia in the spinal cord.

또한, 모든 경우(환자)의 자기공명영상 추적에서, 척수에서 명관 형성 또는 세포증식이 없었습니다.

4. Discussion

논의

The brain and spinal cord have traditionally been considered the most difficult organs to regenerate. However, several lines of clinical research have investigated regeneration of the central nervous system in the context of neurological disorders, such as Parkinson’ disease, cerebral ischemia, and SCI.

뇌와 척수는 전통적으로 재생하는 가장 어려운 기관으로 간주되었습니다.

그러나, 치료(임상상)연구의 몇 분야는 파킨슨 병, 뇌 허혈 증 및 척수손상과 같은 신경 질환의 맥락에서 중추 신경계의 재생을 연구하였습니다.

Treatments of SCI have included biological, surgical, and pharmacological approaches.

척수손상의 치료들은 생물학적, 외과의(수술적), 그리고 약물학적 접근 방법을 포함합니다.

Treatment with megadoses of steroids has been shown to activate an endogenous response to acute primary SCI and reduce secondary tissue damage, resulting in better functional recovery.

스테로이드의 고용량으로 치료는 급성 원발 척수손상에 내인성 반응을 활성화하고 더 나은 보조 조직의 손상을 줄이고 더 나은 기능 회복에 결과를 보여줍니다.

However, the effectiveness of steroid treatment is still a topic of debate.

그러나, 스테로이드 치료의 효과는 여전히 논쟁의 주제입니다.

Biological approaches to SCI include the use of factors that stimulate neuronal regeneration using several types of stem cells.

척수손상에 생물학적 접근 방법은 줄기세포의 여러 가지 유형을 사용하여 신경 세포 재생을 촉진하는 요소의 사용을 포함합니다.

Transplantation studies have shown that these cells can differentiate and become integrated into the recipient’ neural tissue.

이식 연구는 이들 세포들이 분화 할 수 있다는 것과 (이식을)받는 사람의 신경 조직에 통합(융합) 되고 있다는 것을 보여줍니다.

In our study, we used autologous MSCs, thus avoiding problems associated with immunologic rejection and graftversus-host reactions, which frequently arise using allografts.

우리의 연구에서, 우리는 자가중간엽줄기세포를 사용했고, 따라서 면역거부반응과 중독성표피괴사증과 결부된 문제들을 피하기 위해 자주 동종이식편 사용이 생깁니다.

The use of autologous MSCs from BM has several other advantages over other cell sources.

골수에서(골수 유래) 자가 중간엽줄기세포의 사용은 다른 세포 소스 보다 몇 가지 다른 장점을 가지고 있습니다.

First, they are relatively easy to be obtained from BM under local anesthesia, grow well in tissue culture, and can readily be injected into injured tissue.

첫 번째, 자가 중간엽줄기세포들은 극소마취 하에 골수에서 비교적 쉽게 얻을 수 있고, 조직배양에서 잘 성장하고, 손상된 조직에 쉽게 주입할 수 있습니다.

Second, this type of cell therapy is not associated with carcinogenesis, which sometimes occurs with embryogenic stem cell therapy.

둘째, 이 세포치료의 유형(중간엽줄기세포)은 배아줄기세포 치료로 때때로 발생할 수 있는 발암발생에 결부되지 않습니다.

Third, MSCs can differentiate into a variety of tissue and cell types, including bone, cartilage, and neuronal progenitor cells.

셋째, 중간 엽 줄기 세포는 뼈를 포함한, 연골, 그리고 신경 전구 세포들로, 조직과 세포 유형들의 다양성으로 차별화 할 수 있습니다.

Finally, MSCs are eminently suitable for human trials because they can be readily obtained from the patient’ own BM.

마지막으로, 중간엽 줄기세포는 사람 임상(시험)에 대해 아주 적합합니다. 왜냐하면 환자의 자신의 골수로부터 쉽게 얻을 수 있기 때문입니다.

In the present study, none of our patients showed evidence of immune reactions, carcinogenesis, harvesting problems, or morbidity related to the use of general

anesthesia.

본 연구에서, 우리 환자들의 면역 반응, 발암, 수확 문제 또는 전신 마취의 사용과 관련된 합병증의 증거가 아무것도 없음을 보여 주었습니다.

Several hypotheses have been proposed to explain the role of BM-derived MSCs in SCI models.

여러 가설들은 척수 손상 모델에서 골수 유래 중간엽줄기세포의 역할을 설명하기 위해 제안되었습니다.

First, they improve neurologic deficits by generating either neural cells or myelinproducing cells.

첫째, 그들은 각각 신경 세포 또는 수초 생산 세포 생성하여 신경 학적 결손을 호전 하였습니다.

Second, transplanted stem cells act to guide axonal regeneration by producing extracellular matrix rather than by differentiating into neurons.

둘째, 이식 된 줄기 세포는 뉴런(신경)에 분화보다는 세포 외 기질을 생산에 의해 축삭 재생을 안내(유도)하는 역할을 합니다.

Third, transplanted BMderived cells promote compensatory mechanisms that reorganize the neural network and activate endogenous stem cells.

셋째, 이식된 골수 유래 세포는 신경 연결망 재구성과 내인성 줄기세포 활성화 보상 작용을 촉진합니다.

Finally, they facilitate angiogenesis and reduce apoptosis and necrosis at the injection site.

마지막으로, 그들은 혈관 신생을 가능하게하고(촉진하고) 주사 부위에서 세포 사멸 및 괴사를 감소시킵니다.

Chronic spinal cord injury doesn’t seem to have homing effect which attracts injected stem cells to pathology site by systemic injection.

만성 척수 손상은 전신 주사에 의해 병리학 부위에 줄기세포를 주사한 것이 호밍효과 (스스로 손상 부위를 찾아가는 것)반응을 불러일으키는 것 같이는 보이지 않습니다.

Therefore, we performed direct injection of stem cells into injured spinal cord site.

따라서, 우리는 손상된 척수 부위에 줄기 세포의 직접 주입을 수행 하였습니다.

Direct intramedullary injection has been reported to be safe and well tolerated in human trials.

직접 골수내(척수내) 주입(주사)은 인간 시험에서 안전하고 잘 견디는 것으로 발표(보고) 되고 있습니다.

Also, stem cell injection through lumbar puncture was reported to be feasible and safe in human trials, as well as animal studies.

또한, 요추 천자 법을 통한 줄기세포 주입(주사)은 동물연구에서 뿐만 아니라, 인간 시험에 실현가능하고 안전한 것으로 발표(보고)되었습니다.

Therefore, to enhance the stem cell therapeutic effect, we performed the second and third injections by lumbar tapping at the first and second months after intramedullary injection.

그러므로 줄기 세포의 치료 효과를 높이기 위해, 우리는 골수내(척수내) 주입 후 첫 번째와 두 번째 달에 요추천자 방법으로 두 번째와 세 번째 주사를 수행(실시)하였습니다.

To decide the amount of cells to inject, we adopt the most common amount, because the numbers of stem cells reported in the literatures were variable.

주입(주사)하기 위한 세포의 량을 결정하기 위해, 우리는 가장 일반적인 양을 적용 하였 습니다. 왜냐하면 줄기세포의 수는 문헌들이 서로 다르게 발표(보고)했기 때문입니다.

This study is not a randomized controlled trial.

이 연구는 무작위 통제 시험이 아닙니다.

However, we can compare our results with those of the relevant previous literature which analyzed spontaneous recovery in spinal cord injury (SCI) patients.

그러나, 우리는 척수 손상 환자들에 자연적으로 회복을 분석한 관련이 있는 이전의 문헌의 그것과 우리의 결과를 비교할 수 있습니다.

In the prospective study, the fastest spontaneous motor improvement of upper extremity in cervical spinal cord injury patients occurs over the first three months of injury and becomes steady state at 12 months after injury.

전향적(장래의) 연구에서 경수 척수 손상 환자의 상지의(팔) 빠른 자연적 운동기능 호전(개선)은 손상 후 첫 번째 3개월에 걸 처 일어나며, 손상 후 12개월에서는 멈추는 상태가 됩니다.

When compared to our data, the difference is definite.

우리의 데이터(자료)에 비교한 때, 그 차이는 명확합니다.

Six patients (Patients 2,5,6,7,8,and 9) were treated at the time of more than 12 months after injury, and three patients (Patients 6,8,and 9) showed motor improvement (50%) during the follow-up period.

6 명의 환자(환자 2,5,6,7,8, 그리고는 9)는 손상(부상)후 12개월 이상 시간(기간)에 치료 받았고, 세 명의 환자 (환자, 6, 8, 9)는 추적 관찰 기간 동안 운동기능 개선 (50 %)을 보였습니다.

In addition, the three patients who showed improved motor performance in daily tasks were treated at the time of chronic status (8, 38, and 96 months for Patients 4, 6 and 9, respectively).

또, 세명의 환자들은 그들은 일상 작업의 검사에서 호전 된 운동 수행을 보였고 세 명의 환자들은 만성적 상태(환자들 4. 6. 그리고 6, 각각 8개월, 38개월, 그리고 96개월)의 기간에 치료를 받았습니다.

This suggests that MSCs played an important role in motor recovery of chronic SCI.

이것은 만성적 척수손상의 운동기능 회복에서 중간엽 줄기세포가 중요한 역할을 한다는 것을 시사합니다.

In the EP improvement, it was reported that there was no spontaneous improvement of EP during the follow-up period in ASIA A or B patient.

전기생리학 개선에서, 이것은 아시아 등급 A 또는 B환자에서는 추적관찰 동안 전기생리학의 자연적인 개선은 없다고 발표(보고)했습니다.

But in our study, six patients (Patients 4,6,7,8,9,and 10) among ten patients of the ASIA A or B (60%) showed electrophysiological improvement after stem cell treatment.

그러나 우리의 연구에서, 아시아 A 혹은 B(60%)의 10명의 환자 중 6명의 환자 (환자 4,6,7,8,9, 10)는 줄기 세포 치료 후 전기 생리학 개선(호전)을 보여 주었습니다.

In addition, another literature reported that absent initial SEP did not show any recordable SEP throughout the first year of injury except neuropraxy.

또한, 다른 문헌은 신경절단을 제외한 부상의 기록할 수 있는 체성감각유발 전위가 첫 번째 일 년 내내 보이지 않았다고 초기체성 감각유발 전위의 부재를 발표했습니다.

However, our data showed that SEP recovered from being absent to being present after the treatment in two cases (Patients 7 and 8).

그러나, 우리의 자료(데이터)는 두 경우( 환자들 7와 8)에서 치료 후 존재하지 않는 것에서 존재하는 것으로부터 체성감각유발 전위가 회복하는 것을 보였습니다.

These results after the stem cell treatment showed differences compared to natural course of electrophysiological change.

이러한 결과는 줄기세포 치료 후 전기생리학 변화의 자연적 경과에 비해 차이를 보였습니다

According to published reports, the presence of initially detectable SEP is associated with a favorable functional and neurological outcome.

공개된 보고서에 따르면, 초기에 발견할 수 있는 체성감각유발 전위의 존재는 유리한 기능과 신경학적 결과와 결부되어 있습니다.

In our study, three patients (Patients 6,9, and 10) had initially recordable SEPs; all of these patients showed improved motor power and gradual postoperative improvement of EP.

우리의 연구에서, 세 명의 환자 (환자 6.9, 10)는 처음에 기록 할만한 체성감각유발전위 검사를 했습니다.; 이들 환자들의 모두는 호전된 운동기능 및 수술 후 점진적 전기 생리 학의 향상을 보여 주었습니다.

However, EP improvement did not always correlate with motor power improvement (Patients 3, 4, and 7).

그러나, 전기생리학 호전은 항상 운동기능 호전(환자들 3,4. 와 7)과 연관되어 있는 것은 아닙니다.

Motor power improvement was also not strictly correlated with MRI changes.

운동기능 호전은 엄격하게 또한 역시 자기공명영상 변화와 엄격하게 연관이 없었습니다.

Of the seven patients who showed MRI change, three (Patients 4, 6, and 9) showed motor improvement, and all showed improvement in the performance of daily tasks.

7명의 환자들 자기공명영상 변화를 보였고, 세 명(환자들 4,6,와 9)은 운동 기능 향상을 보였고, 그리고 모두가 일상작업 수행 검사에서 호전을 보였습니다.

This phenomenon suggests that coincidental improvement of motor power and MRI translates into improved recovery.

이 현상은 운동기능의 우연의 호전과 자기공명영상이 호전된 회복으로 나타내는 것을 시사 합니다.

In all MRI studies, gadolinium enhancement was performed.

모든 MRI 연구에서, 양도체 조영증강을 실시했습니다.

The thickened portions around the injured site were not enhanced in all the cases (Patients 5, 6, 7 and 9) .

부상 부위 두꺼워진 부분은 모든 경우에서 (환자 5, 6, 7 및 9) 향상 되지 않았습니다.

Therefore, the thickening of spinal cord after stem cell injection was not associated with tumorous condition or inflammatory lesion.

따라서, 줄기 세포 주사(주입) 후 척수의 두꺼운 것은 종 양성 조건이나 염증성 병변과 연관성이 없습니다.

If it was ectopic calcification, T1 and T2 images would show low signal intensity, but there was no such low signal intensity lesion.

만약에 이소성 석회화(정상 위치가 아닌 곳의 석회화)라면, T1와 T2영상은 낮은 신호 강도를 보여주는 것이지만, 이러한 낮은 신호 강도 병변이 없었습니다.

Although we can not explain exactly now, the findings on the thickening of the spinal cord after stem cell injection is supposed to be related with axonal regeneration.

비록 우리가 지금 정확하게 설명 할 수 없지만, 줄기 세포 주입 후 척수의 두꺼워짐에 대한 연구 결과는 축삭 재생과 관련이 있는 것으로 추정됩니다.

In the prospective analysis of motor recovery from SCI, the rate of recovery is rapid during the first three months and motor improvement is almost completed by nine months after cell therapy.

척수손상에서 운동(기능) 회복의 예비 분석에서, 회복 율은 처음 3 개월간 급속했고 세포치료 후 9개월로 운동기능 호전은 거의 완료되었습니다.

Therefore, we think six to 11 months of follow-up duration is not short period to observe, whether or not motor improvement and MRI changes are developed.

따라서, 우리는 추적기간의 6개월에서11개월은 관찰하는 것이 짧은 기간이 아니다 라고 생각합니다.

In addition, clinical improvement of motor power after stem cell injection was not related with paracrine effect such as in the stem cell treatment of Parkinson’ disease, but related with axonal regeneration.

또한, 줄기 세포 주입(주사) 후 운동기능의 치료(임상적) 호전은 파킨슨 병의 줄기 세포 치료에서 주변 분비 효과와 같은 이런 것과 관련이 없지만 축삭 재생과 관련은 있습니다.

Therefore, the motor improvement after stem cell injection would not return to the previous state.

그러므로 줄기 세포 주입 후 운동(기능) 호전은 이전 상태로 돌아가지 않을 것입니다.

About hydrocephalus, there were no clinical symptoms associated with hydrocephalus such as headache, nausea or vomiting.

뇌수종에 대해, 두통, 메스꺼움 또는 구토 등 수두증과 관련된 임상 증상은 없었습니다.

In addition, when lumbar puncture was performed to inject the stem cells, cerebrospinal fluid pressure was within normal range in all cases.

또한, 요추천자법은 줄기세포주입을 위해 시행했을 때. 뇌척수액 압력이 모두 경우에 정상 범위 안이 있었습니다.

Furthermore, there have been no previous reports about hydrocephalus after cell injection by lumbar puncture.

뿐 만 아니라, 요추 천자법에 의한 세포 주입(주사) 후 수두증에 관한 이전의 보고는 없었습니다.

Therefore, we did not consider further eval‎uation to detect hydrocephalus.

따라서, 우리는 뇌수종을 감지하는 추가 평가를 고려하지 않았습니다.

5. Conclusion

결론

Ten patients underwent clinical trial of direct injection of MSC for SCI.

10명 환자는 10 명 척수손상에 대한 중간엽줄기세포의 직접주입(주사)의 임상시험을 받았습니다.

Although we were unable to establish the statistical significance of this treatment, some patients showed clinical, radiological, and electrophysiological evidence of improvement.

비록 우리는 이 치료의 통계적 유의성(의의)을 설정 할 수 없었지만, 일부 환자는 치료에서, 호전의 방사선 및 전기 생리학상 증거를 보여 주었습니다.

Importantly, there were no significant complications of autologous MSC transplantation.

중요한 것은, 자가 중간엽줄기세포 이식의 큰 합병증이 없었습니다.

Collectively, our results show that BMderived stem cell therapy is a promising and safe treatment for chronic SCI.

공동으로, 우리의 결과는 골수유래 ​​줄기 세포 치료는 만성 척수손상에 대한 유망하고 안전한 치료라는 것을 보여줍니다.

Additional studies on the use of MSCs for SCI in larger patient populations are warranted to confirm‎ the results of this pilot study.

추가적인 연구는 큰 환자 집단에 척수손상에 대한 중간엽줄기세포의 사용에 대해 이 선구적인 연구의 결과를 확인하기 위해 보증하는 것입니다.

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사진이 잘못 나오면 어떻하나 걱정했는 데 괜찮은 것 같습니다.

전상용 교수님께서 지난 2013년 6월 16일 (일) 성체줄기세포 임상연구 심포지움2013년

연세대학교 의과대학 세브란스 심장혈관병원 강당 3층에서 열린 3상과 관련된 발표에서는 1.2상 중심으로 척수손상에서 줄기세포의 전략과 현황이라는 주제로 발표하셨습니다.

이 논문과 임상에서 실험실까지 내용은 다른 곳에 절대 올리거나 소개하시는 것은 금합니다 혼자서 보십시오.

이 논문과 이 논문의 다른 이름인 임상에서 실험실까지를 함께 보시면 이해가 빠르실 것입니다.

줄기세포에 희망을 걸고 계시는 가족님들 힘내세요

복사하셔서 보실 수 있도록 해 두었습니다 .

임상에서 실험실까지 논문 발표 프리젠테이션자료인 척수손상의 줄기세포 치료:임상에서 실험실까지

본문 설명 1 전체 사진 소개 역시 잘못된 사진을 수정하여  복사 가능하도록 하겠습니다.

다만 다른 부분은 보시기 불편하셔도 스크랩 및 복사를 금지하오니 양해 부탁드립니다.

참고로 전상용 교수님의 3상의 발표에서는  1,2상을 하신 것을 말씀하셨습니다.

3상 발표에서의 것은 일단 다른 각 질환 1순 후에 소개 하겠습니다.

[카피카피(김은식)]

이곳에는 녹내장 뿐만아니라 다른 희귀,난치병에 관한 최신 희망적이 치료 자료들을 소개할 것입니다. 병원이나 자연스럽게 아시게 된 환우님들게도 희망을 전해주시는 희망의 전도사가 되어수십시오. 척수손상도 이제는 변상에 누워만 있어야 할때가 아닌 기지개를 펼때입니다.

[오히메2]

골수에서 채취한 중간엽줄기세포가 녹내장 시신경에도 효과있을 가능성이 있다는 거네요

[카피카피(김은식)]

아스트로사이트(별 아교 세포-阿膠細胞, astrocyte ] , 올리고덴드로사이트 [oligodendrocyte] 등이 신경 재생에서 어떤 역할을 하는 지 생각해보세요 . 그리고 물론 중간엽줄기세포로 존스 홉킨스 대학에서 연구 발표 있습니다.