첫댓글Protein A 라는 물질은 항체의 Fc부위에 붙는 성질을 가집니다. 이러한 Protein A에 비드가 붙어있으니, 비드도 Protein A를 따라 항체의 Fc와 함께 움직이게 됩니다. Protein A라는 물질의 성질을 미리 알아야 수월하게 풀 수 있는 문제입니다.
@promise2018Fc에 결합한다는 사실은 지식뿐만 아니라 데이터로도 알 수 있습니다. Protein A가 항체의 Fab와 결합하면 '단백질 ㉠ ㉡ ㉢ 복합체'와 경쟁관계가 되므로, '단백질 ㉠ ㉡ ㉢ 복합체'를 비드 침전으로 얻을 수 없기 때문입니다. (아래 그림 풀이 참고)
첫댓글 Protein A 라는 물질은 항체의 Fc부위에 붙는 성질을 가집니다. 이러한 Protein A에 비드가 붙어있으니, 비드도 Protein A를 따라 항체의 Fc와 함께 움직이게 됩니다. Protein A라는 물질의 성질을 미리 알아야 수월하게 풀 수 있는 문제입니다.
사전지식이 필요한 문제군요 감사합니다
@promise2018 Fc에 결합한다는 사실은 지식뿐만 아니라 데이터로도 알 수 있습니다.
Protein A가 항체의 Fab와 결합하면 '단백질 ㉠ ㉡ ㉢ 복합체'와 경쟁관계가 되므로,
'단백질 ㉠ ㉡ ㉢ 복합체'를 비드 침전으로 얻을 수 없기 때문입니다.
(아래 그림 풀이 참고)
@飛烏 아~그렇군요 그림까지...그뤠잇입니다!^^
그림 풀이
그렇다면 항체-ㄱ, ㄴ-ㄷ은 이황화결합을 하고 있는데 왜 환원상태의 밴드에서 결합이 파괴된 상태로 관찰되나요?
<실험 2>로부터 알 수 있는 사실
- 항체 X는 단백질 ㉠에 결합하는 항체이다.
- 항체 Y는 단백질 ㉡에 결합하는 항체이다.
<실험 1>로부터 알 수 있는 사실
- ㉡과 ㉣은 비공유결합한다. (비환원상태 해석)
이유 : 실험2를 근거로 항체 X는 ㉡과 결합하지 못한다. 항체X는 ㉠과 결합한다.
따라서, ㉣은 항체 X가 결합할 수 있는 단백질 ㉠을 포함할 것이다.
- 단백질 ㉣은 단백질 ㉠과 ㉢이 이황화결합으로 연결된 복합체이다. (환원상태와 비환원상태 비교)
- 항체는 경쇄와 중쇄가 이황화결합되어 있다.(환원상태와 비환원상태 비교, 지식)
[확장]
다음과 같이 추가적으로 <실험3>을 수행한다.
실험1의 (라)에서 분리된 단백질을 ★비환원상태★에서 전기영동한 후, X와 Y를 이용하여 각각 웨스턴 블롯팅을 수행하면 어떤 결과가 나오는가?
답 : 그림 첨부