첫댓글 Sanger 사슬종결서열 분석법에서 맨 나중에 전기영동 하고나서 자기방사법으로 전기영동 결과를 확인해야 하기 때문에 새로 신장되는 가닥을 표지해야 합니다. 이 때 1)프라이머를 표지 할 수도 있고 2)사용하는 dNTP를 표지할 수도 있습니다.1) 프라이머를 표지할 때는 프라이머를 인산기가 표지된 ATP를 이용하여 인산화 시킵니다. 이 때 인산화효소를 사용하게 되는데 이 효소는 ATP의 감마 인산을 옮겨줍니다. 따라서 감마인산을 방사성 동위원소로 표지하여 사용합니다.2) 사용하는 dNTP를 표지하는 경우에는, dNTP끼리 중합될 때 첨가되는 염기의 알파인산기를 통해 연결되므로 알파인산기를 방사성 동위원소로 표지하여 사용합니당
아 인산기하나만 잇는 염기를 사용한다는게 아니고 거기에 표지를 한다는거였군요!친절한 설명 감사드립니다 이해되었아요~~~^^
dNTP의 인산기 세개가 직렬로 붙어 있는데 가까운쪽부터 알파인산, 제일 멀리 있는게 감마인산이에요. ATP도 마찬가지구요. dNTP가 DNA에 중합될때 피로인산이 떨어져나가는데 이때 감마인산, 베타인산이 떨어져나가니까 이 둘에 표지를 하면 표지인자가 떨어져나가니까 효과가 없겠죠. 그래서 합성된 이후까지 남아있는 알파인산을 방사성 동위원소로 표지합니다. 프라이머는 위엣분이 설명이 자세하네요ㅋ
방사성동위원소표지에 대한 내용이었군오 이해되었어요 설명 너무 감사드립니다^^!
http://cafe.daum.net/S2000/bS7/7534댓글 참고하세요.이미지가 있어요
감사합니다^^
첫댓글 Sanger 사슬종결서열 분석법에서 맨 나중에 전기영동 하고나서 자기방사법으로 전기영동 결과를 확인해야 하기 때문에 새로 신장되는 가닥을 표지해야 합니다. 이 때 1)프라이머를 표지 할 수도 있고 2)사용하는 dNTP를 표지할 수도 있습니다.
1) 프라이머를 표지할 때는 프라이머를 인산기가 표지된 ATP를 이용하여 인산화 시킵니다. 이 때 인산화효소를 사용하게 되는데 이 효소는 ATP의 감마 인산을 옮겨줍니다. 따라서 감마인산을 방사성 동위원소로 표지하여 사용합니다.
2) 사용하는 dNTP를 표지하는 경우에는, dNTP끼리 중합될 때 첨가되는 염기의 알파인산기를 통해 연결되므로 알파인산기를 방사성 동위원소로 표지하여 사용합니당
아 인산기하나만 잇는 염기를 사용한다는게 아니고 거기에 표지를 한다는거였군요!
친절한 설명 감사드립니다 이해되었아요~~~^^
dNTP의 인산기 세개가 직렬로 붙어 있는데 가까운쪽부터 알파인산, 제일 멀리 있는게 감마인산이에요. ATP도 마찬가지구요. dNTP가 DNA에 중합될때 피로인산이 떨어져나가는데 이때 감마인산, 베타인산이 떨어져나가니까 이 둘에 표지를 하면 표지인자가 떨어져나가니까 효과가 없겠죠. 그래서 합성된 이후까지 남아있는 알파인산을 방사성 동위원소로 표지합니다. 프라이머는 위엣분이 설명이 자세하네요ㅋ
방사성동위원소표지에 대한 내용이었군오
이해되었어요 설명 너무 감사드립니다^^!
http://cafe.daum.net/S2000/bS7/7534
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감사합니다^^