첫댓글원리는 동일합니다. 실험 목적에 따라 칩에 결합된 DNA는 다양하게 세팅할 수 있습니다.
세포에서 발현되는 RNA를 모두 추출했다고 해도 불안정하기 때문에 쉽게 분해됩니다. 따라서 추출한 RNA를 즉시 cDNA로 합성합니다. 그러면 세포에서 추출한 RNA는 대부분 cDNA로 합성되고, DNA는 안정하기 때문에 다루기 쉽고 보관에 용이하죠. cDNA library 제작은 세포에서 발현되는 모든 RNA의 정보를 얻기 위해 실시합니다. cDNA 정보 = RNA 정보라고 보시면 됩니다.
이 실험에서 cDNA library 제작은 칩에 결합시키기 위해서입니다. 실험 목적은 호르몬 처리로 인해 새로 합성되는 RNA를 찾는 것이므로, 호르몬 처리된 세포의 RNA로 cDNA library를 만들고 PCR로 증폭시킨 다음, 칩에 결합시킵니다. 호르몬 처리된 세포의 cDNA와 호르몬 처리되지 않은 세포의 cDNA를 칩과 혼성화시키고 비교합니다. 동시에 혼성화되는 spot에는 우리가 찾는 유전자가 없습니다. 호르몬 처리된 세포의 cDNA만 혼성화되는 spot에 원하는 유전자가 있습니다.
첫댓글 원리는 동일합니다. 실험 목적에 따라 칩에 결합된 DNA는 다양하게 세팅할 수 있습니다.
세포에서 발현되는 RNA를 모두 추출했다고 해도 불안정하기 때문에 쉽게 분해됩니다. 따라서 추출한 RNA를 즉시 cDNA로 합성합니다.
그러면 세포에서 추출한 RNA는 대부분 cDNA로 합성되고, DNA는 안정하기 때문에 다루기 쉽고 보관에 용이하죠. cDNA library 제작은 세포에서 발현되는 모든 RNA의 정보를 얻기 위해 실시합니다. cDNA 정보 = RNA 정보라고 보시면 됩니다.
이 실험에서 cDNA library 제작은 칩에 결합시키기 위해서입니다. 실험 목적은 호르몬 처리로 인해 새로 합성되는 RNA를 찾는 것이므로,
호르몬 처리된 세포의 RNA로 cDNA library를 만들고 PCR로 증폭시킨 다음, 칩에 결합시킵니다.
호르몬 처리된 세포의 cDNA와 호르몬 처리되지 않은 세포의 cDNA를 칩과 혼성화시키고 비교합니다. 동시에 혼성화되는 spot에는 우리가 찾는 유전자가 없습니다. 호르몬 처리된 세포의 cDNA만 혼성화되는 spot에 원하는 유전자가 있습니다.
감사합니다;)RNA추출에서 PCR증폭까지의 과정은 유리슬라이드에 결합된 DNA절편에 혼성화시킬 cDNA를 제작하는 과정이라 보면되는건가요?
@응??? 아니요. 칩에 결합시킬 cDNA(유리슬라이드에 결합된 DNA 절편)를 제작하는 과정입니다. 혼성화시킬 cDNA는 이것과 별개로 A, B 준비합니다.
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