첫댓글전기영동에 변성젤을 쓰는지 비변성젤을 쓰느냐에 따라서 핵산이나 단백질이 펴져있거나 모양을 그대로 유지하거나 하는걸로 알고있어요~ dAMP 처리시에 밴드가 4개 나오는걸 봐서는 클레나우조각에 dAMP가 기질로서 붙질 못했다는 얘긴거 같아요~ 우리도 알다시피 DNA중합시 삼인산뉴클레오시드를 사용하지 인산기 한개인 뉴클레오티드를 사용하진 안잖아요~그래서 클레나우조각의 구조변형이 없어서 트립신에 의해서 절단된 밴드를 보여주는 거죠~앞서서 dNTP로 처리한 4가지 경우는 삼인산이여서 클레나우조각에 기질로 자리잡고 앉으니까 트립신이 원래 작용하던 부위에 변화가 생기면서 한곳이 더이상 절단할 수 없게 되는거죠~
8번 레인을 보면 클레나우조각이 어쨋든 DNA 중합효소니까 기질로DNA랑 삼인산뉴클레오시드를 사용할테니, 주형에 상보적인 dATP랑 DNA기질이 있을땐 클레나우조각의 구조가 완전히 변형되서 이젠 트립신이 작용하던 두곳에 모두 작용을 못해서 밴드가 맨위 하나만 나오게 되구요~!
첫댓글 전기영동에 변성젤을 쓰는지 비변성젤을 쓰느냐에 따라서 핵산이나 단백질이 펴져있거나 모양을 그대로 유지하거나 하는걸로 알고있어요~
dAMP 처리시에 밴드가 4개 나오는걸 봐서는 클레나우조각에 dAMP가 기질로서 붙질 못했다는 얘긴거 같아요~ 우리도 알다시피 DNA중합시 삼인산뉴클레오시드를 사용하지 인산기 한개인 뉴클레오티드를 사용하진 안잖아요~그래서 클레나우조각의 구조변형이 없어서 트립신에 의해서 절단된 밴드를 보여주는 거죠~앞서서 dNTP로 처리한 4가지 경우는 삼인산이여서 클레나우조각에 기질로 자리잡고 앉으니까 트립신이 원래 작용하던 부위에 변화가 생기면서 한곳이 더이상 절단할 수 없게 되는거죠~
8번 레인을 보면 클레나우조각이 어쨋든 DNA 중합효소니까 기질로DNA랑 삼인산뉴클레오시드를 사용할테니, 주형에 상보적인 dATP랑 DNA기질이 있을땐 클레나우조각의 구조가 완전히 변형되서 이젠 트립신이 작용하던 두곳에 모두 작용을 못해서 밴드가 맨위 하나만 나오게 되구요~!
제가 이해를 잘 못 한건지... 제 질문에 대한 답이 어느 부분인지 모르겠어요 ^^;.
지금 이문제가 기출문제 목록에 없어서 아쉬워했는데 설명해주셔서 정말 감사합니다!!!!
그럼 6번레인에 DNA 기질을 첨가한다면 48kDa 와 27kDa 의 두 밴드가 사라지고 64와 11kDa밴드는 나타난다고 하면 맞는 말일까요?
@긍정의힘 네~! 7번레인과 같은 상황일테니 그렇게 될꺼 같아요!!
@열정의생물쌤 감사합니다~!!
@긍정의힘 뽝공요!!!
비밀글 해당 댓글은 작성자와 운영자만 볼 수 있습니다.16.04.29 00:12
아 지송요! 여기서 결합은 중합효소랑 뉴클레오티드간의 결합을 얘기하는거 같아요~! 이걸 너무 장황하게 썼네요
중합효소랑의 결합이군요! 감사합니다~
이 문제는 의외로 해석이 아주 간단합니다.
1번 레인과 각 레인을 비교하면 됩니다.
패턴의 동일유무만 보면 됩니다.
1번은 효소KF만 있고 두 가지 기질(DNA 기질, 뉴클레오타이드) 모두 없는 경우로
결합물이 없이 그냥 효소 혼자있을 때의 트립신에 의한 분해 양상입니다.
그러나 여기에 어떤 결합물(DNA든 뉴클레오타이드 든지)이라도 결합한다면
효소KF는 구조가 변하고
트립신에 대한 분해양상이 달라진다.
2,3,4,5,7,8,9,10,11은 모두 1번과 패턴이 다르다.
즉 이들은 KF에 결합하여 구조를 바꾼다.
그러나 6번만 1번과 동일하다.
즉 6번 재료는 KF의 구조를 전혀 변화시키지 못한다.
즉 dAMP는 KF에 결합하지 못한다.
7번→6번..☞☜ (소근소근) 상세한 풀이 감사합니다!
@시계 앗 수정했어요. 감사합니다
2번 보기는 왜 맞는건지 설명좀해주세요 ㅠㅠ
전기영동 1번의 75kDa의 띠가 트립신에 의해 절단되기 전의 KF라고 생각하면 될것같아요
트립신에 의해 절단되는 부위 첫번째로 의해 75인 KF가 48,27로 되고
두번째 절단부위로 인해 64, 11로 나눠진거에요!
그러면 dNTP와 DNA기질이 클레나우조각에 결합하는 자리가 같다고 봐도 되는건가요? 같은자리에 입체구조의 변화가 나타났으니깐요
위의 데이터로는 결합자리는 알 수 없습니다.
결합여부와 그로부터 구조의 변화가 일어난다는 것만 알 수 있습니다.
근데 지식적으로
DNA중합효소(KF)의 기능을 봤을 때 주형, 프라이머, dNTP 결합 자리가 모두 존재하겠지요.
문제에 제시된 'DNA기질' 자체에 이미 주형과 프라이머가 포함되어 있으며
정상적인 중합반응이 진행된다면
프라이머 말단에 dNTP들이 연결되어 길어지겠지요.
경쟁적저해제처럼 결합자리가 같다 그런 개념이 아닙니다.
언급된 요소들은 모두 KF효소에 대한 기질입니다.