MD 2018 MD 6번 : 유전자재조합 ?

[때기때기]

이 문제 유전자 재조합에 관련된 내용 맞나요?
보기 ㄱㄴㄷ 모두 생소하게 느껴져서 이해가 안돼요ㅜㅠ
자세한 설명 좀 부탁드립니다..!

[그래그래]

오오! 크리스퍼 관련 문제가....유전자치료랑 관련해서 발표했던 부분이라 반갑네요. 크리스퍼는 유전자 가위 기술로 2015년에 사이언스와 네이처에서 핫했던 발견으로 뽑혔습니다.
하지만 이 문제를 크리스퍼를 몰라도 "상동재조합"으로 풀면 될 것 같습니다.
ㄱ. 그림에서 보시면 sgRNA가 결합한 부위가 잘리고 있습니다. sgRNA 염기서열이 target 유전자에 상보적으로 결합하면 Cas9이 잘라줍니다.(핵산가수분해효소)

[그래그래]

핵산 가수분해가 "이중가닥절단"을 만들어주면 이부분이 상동재조합에 의해 수정됩니다.
ㄴ. 상동재조합에서 RecA가 상동염색체로 끼어 들어갑니다. 상동염색체 대립유전자를 주형으로 Nick이 매꿔집니다.
ㄷ. Gene targeting이랑 같은 원리로 보시면 될 것 같습니다. 목적 유전자 주변에 상보적서열을 두면 상동재조합에 의해 돌연변이 유전자가 들어갈 수 있습니다.
아직 18 MD 안풀어봐서.. 틀린부분있으면 알려주세요!

[때기때기]

자세한설명 감사합니다!!😁

[듀가티]

보기ㄴ 경우 DNA 이중절단시 수복기작은 비상동말단연결과 상동재조합이 있습니다 이중 비상동말단연결의경우 이중절단된 단면을 다시연결하는 방법인데 이경우 먼저 이중절단된단면을 다듬기위해서 핵산말단분해효소가 먼저 도입되어 절단면의 일부뉴클레오티드를 제거한한후 연결효소 이용하여 절단면을 연결합니다 따라서 이방법은 일부뉴클오티디가제거될위험이 있어서 야생형으로 수복이되지않습니다 보기ㄷ의경우 상동재조합이용한 이중절단 복구의경우 가정먼저 재조합에 이용할수 있는 자매이중가닥이존재해야 합니다 그래서 이 복구 기작은 주로 DNA 가복제시 이중절단된가닥이 복제된 자매가닥을이용하여 재조합통해서 수복이 진행됩

[듀가티]

수복이 진행됩니다 이 과정은 유전학책보면 나오니 자세한건 봐보시고요 아마 이중절단된 부위와 상동서열지닌 DNA 절편에 기능 결핍 목적유전자삽입하여 재조한DNA 절편만든후 이 절편을 상동재조합통한 이중절단 수복에 이용하는 방법이면 부위특이적 돌연변이 만들 수 있을것 같습니다

[때기때기]

쌤 질문마다 답을 다 자세히 달아주셔서 도움많이받고있습니다 정말감사해요!!

[듀가티]

이중절단 수복기작중 상동재초합기작은 전공책 으로 자세히보시구 익히시는게 도움이 될거에요

[때기때기]

혹시 어떤 유전학책 참고하면 좋을까요?

[듀가티]

노란책이나 아님 레닌져 생화학보셔두 되구요

[때기때기]

네 감사합니다!!